209例儿童血清HBV标志物与HBV DNA检测分析

冯艳梅

（山西省吕梁市离石区中医院，山西吕梁033000）

乙型肝炎病毒感染是世界最严重的公共卫生问题之一，我国是乙型病毒性肝炎的流行大国，乙型肝炎病毒表面抗原携带者实际人数超过1.2亿，病毒性肝炎及相关性肝病如肝硬化(LC)、肝癌(HCC)，是严重危害我国人民健康的常见病[1]。儿童时期感染HBV者，大多数转变为慢性感染[2]，并在以后可能发展为肝硬化和肝细胞癌，对其今后生长发育和身心健康都会带来很大的影响，因此HBV感染的快速、敏感的诊断方法，将显著影响慢性HBV感染的流行及其不良后果的发生。为此，笔者检测了吕梁市209名感染儿童HBV血清学模式和HBV DNA含量，以评价血清标志物和DNA检测在儿童HBV感染中的诊断价值，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

209例血清标本采自吕梁市离石区中医院和地区医院儿科2007年1月～2009年10月住院及门诊HBV感染者，其中，男 132 例，女 77 例，年龄为 0.5～12 岁，平均(7.3±2.6)岁。无菌收集患者血清标本并置-80℃冰箱中贮存备用。

1.2 方法

1.2.1 血清标志物检测 使用上海科华生物工程公司试剂盒（酶联吸附免疫法）检测所有血清标本 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和 HBcAb。

1.2.2 HBV DNA检测 HBV DNA定量检测试剂来自深圳匹基生物工程股份有限公司，采用BIO-RAD i-Cycler荧光定量PCR检测仪进行检测。荧光PCR循环程序设置如下：37℃，5 min；94 ℃，1 min；95 ℃，5 s；60 ℃，30 s；42 个循环；40 μl反应体系；60℃收集荧光信号，荧光信号收集时设定为Fam荧光素。检测理论极限：125 copies/ml，实验采用阳性截止值为≥500 copies/ml。

1.3 统计学处理

采用SPSS12.0对所得数据进行统计分析，计数资料采用卡方(χ2)检验，所有数据以均数±标准差表示，显著性检验水准为 P＜0.05。

2 结果

209份标本根据HBV血清标志物（HBV M）阳性模式可分为四组，其中模式 1（HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+）85 例，模式 2(HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+)71 例，模式 3(HBsAg+、HB-cAb+)46 例， 模式 4 （HBsAb+、HBeAb+/- 、HBcAb+）7 例。HBV DNA阳性率在模式1、模式2、模式3、模式4分别为96.5%、35.2%、45.7%、14.3%。 各组比较，有显著性差异（χ2=88.556，P=0.000），见表 1。

表1 HBV M感染模式与HBV DNA阳性率的关系

3 讨论

乙肝血清标志物(HBV-M)的检测是临床诊断乙型肝炎病毒感染及病程发展的准确而可靠的依据，也是诊断乙型肝炎的重要指标，但主要反映人体对HBV感染的免疫状态，没有直接反映HBV在患者体内的复制情况，更不能作为判断患者是否具有传染性的直接证据；而PCR则可以准确反映出HBV-DNA的复制水平、病程变化和治疗恢复情况等。PCR法检测HBV-DNA直接反映病毒存在、活动性复制及具有传染性的可靠指标，使得临床医生对于乙肝患者体内的HBV的复制以及传染性有了更直接的了解，从而也更有利于临床HBV感染的诊断、治疗方案选择及疗效的判断。本研究 HBV DNA 阳性率在模式 1 （HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+）、模式 2(HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+)、模式 3(HBsAg+、HB-cAb+)、 模式 4 （HBsAb+、HBeAb+/- 、HBcAb+） 中分别为96.5%、35.2%、45.7%、14.3%，与文献[3-4]检测 HBV DNA 的结果基本相符。同时本研究结果说明HBsAg的存在特别是HBeAg的出现，乙肝病毒的复制非常活跃，HBsAg和HBeAg可作为临床HBV感染和强传染性的重要指标；但随着HBeAg/HBeAb的阳性转换，并不是所有的感染者HBV-DNA都随着转阴，相当一部分HBeAb阳性的所谓小三阳患者HBV-DNA持续阳性。

综上所述，HBV-M与HBV DNA二者之间互有联系但又有所不同。笔者建议采用荧光PCR方法对乙肝血清学标志物阳性的儿童进一步作HBV DNA检测，以判定疾病的严重程度及传染性高低，以指导医务人员尽早采取积极合理的防治方案，防止患儿病情恶化或慢性化及个体间的传播。

[1]姚集鲁,高志良,彭晓谋,等.病毒性肝炎临床诊治的基础与应用研究[J].中山医科大学学报,1999,20(1):169.

[2]谢新宝,朱启镕.乙型肝炎病毒母婴传播和阻断的研究进展[J].传染病信息,2006,19(3):101-102.

[3]王晓东,李秀全,李凤焕,等.慢性乙肝血清标志物与HBV DNA水平的关系[J].国际检验医学杂志,2006,27(12):1070-1072.

[4]许铁军,曹远陆,乔春格,等.乙型肝炎血清标志物与HBV DNA含量的相关性分析[J].检验医学与临床,2006,3(6):247-248.