乳腺癌组织中ER β与NF-κB的表达及意义

韩芬 杨晓

乳腺癌是女性常见恶性肿瘤之一，近年来发病率逐年上升。大量研究认为其发病与雌激素刺激有关，而雌激素通过雌激素受体(ER β)发挥作用，雌激素受体与乳腺癌关系一直是国内外研究的重点。核因子κB(NF-κB)是一种广泛存在于体内的细胞转录因子，对肿瘤细胞增殖和凋亡具有核心调节作用。本研究采用免疫组化SP法对乳腺癌中NF-κB与ER β的表达情况进行检测，并结合临床病理学特征分析其在乳腺癌发生、发展中的作用及相关性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2008年1月至2009年1月河南中医学院第一附属医院病理科手术治疗、病理资料完整的乳腺癌病理蜡块82例，全部病例术前均未行放疗、化疗及性激素药物治疗。患者均为女性，年龄30～76岁，平均年龄47.5岁。其中有腋淋巴结转移者47例，无腋淋巴结转移者35例。根据2002年国际抗癌协会(UICC)TNM分类标准分为:I期12例，Ⅱ期36例，Ⅲ期19例，Ⅳ期15例。组织病理学分级(按病例资料记录):G1(高分化)36例，G2(中分化)17例，G3(低分化)29例。同时收集到同期45例患者的癌旁正常组织作对照。

1.2 主要试剂 兔抗人NF-κB多克隆抗体、鼠抗人ER β单克隆抗体及SP试剂盒、DAB显色剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3 方法 所有标本均经甲醛固定，常规脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋，做4 μm连续切片，用高压锅抗原修复，SP两步法、DAB显色，操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。PBS替代一抗作为阴性对照，已知阳性的乳腺癌切片作为阳性对照。

1.4 结果判断 光镜下NF-κB阳性反应为细胞浆呈现棕黄色，ER β阳性反应为细胞核呈现棕黄色。在400倍光镜下观察，并选取10个背景清晰的高倍视野，根据阳性细胞所占视野所有肿瘤细胞的百分比计算出每例标本的NF-κB与ER β表达率。根据其表达率及染色强度分别记为:(-，阴性)无明显阳性反应细胞或阳性细胞面积小于10%，染色浅;(+，弱阳性)阳性细胞面积大于10%，但小于50%，染色较深;(++，强阳性)阳性细胞面积大于50%，染色深。

1.5 统计学处理 采用SPSS 12.0统计软件，计数资料行χ2检验或Fisher＇s确切概率法，相关分析采用列联表资料的χ2检验。P＜0.05有统计学意义。

2 结果

2.1 NF-κB和ER β在乳腺癌和癌旁正常组织中的表达(见表1) NF-κB表达于细胞浆，乳腺癌组织中阳性表达率分别为45.1%，高于癌旁组织阳性表达率15.6%，具有显著性差异(P＜0.05)。ER β表达于细胞核，乳腺癌组织中ER β阳性表达率为25.6%，低于癌旁组织64.5%，具有显著性差异(P＜0.05)。

表1 乳腺癌组织三种蛋白的表达与临床病理指标的关系(例，%)

2.2 NF-κB和ER β与乳腺癌主要临床病理指标之间的关系(见表1) NF-κB的表达与淋巴结转移有关，有腋淋巴结转移组阳性表达率(55.3%)高于无腋淋巴结转移组(31.4%)，二者之间具有显著性差异(P＜0.05);NF-κB的表达与肿瘤大小、组织分级、TNM分期之间无显著性差异(P＞0.05)。

ER β的表达与组织分级有关，高分化组阳性表达率(38.9%)高于中低分化组(15.2%)，二者之间具有显著性差异(P＜0.05);ER β的表达与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移之间无显著性差异(P＞0.05)。

表2 乳腺癌组织中NF-κB与ER β表达的相关性(例)

2.3 NF-κB与ER β在乳腺癌组织中表达的相关性(见表2)

ER β阳性表达的21例乳腺癌组织中，NF-κB阳性表达7例(33.34%)，ER β 阴性表达 61 例中，NF-κB 阳性表达 30 例(49.18%)，Pearson相关分析显示，NF-κB 和ER β 在乳腺癌组织中的表达无关(P＞0.05)。

3 讨论

核转录因子kappa B(NF-κB)是一种广泛存在于细胞中的核转录因子，是多种信号转导途径的聚会点。活化的NFKB在肿瘤发生发展中的作用机制与它抗凋亡及促进细胞生长等有关［1］。本研究结果显示:NF-κB在乳腺癌组织阳性表达率(45.1%)高于癌旁正常组织(15.6%)，NF-κB蛋白的表达与是否存在淋巴结转移相关(P＜0.05)，提示NF-κB参与乳腺癌的发生发展过程，且与乳腺癌的浸润及转移有关，与国外学者［2］研究结果相似。

雌激素受体ER β是在人乳腺组织中发现的一种新的雌激素受体亚型。有报道发现ER β几乎存在于所有正常个体的乳腺组织内，并且是乳腺间质中主要ER形式［3］。在对一系列乳腺癌癌前期病变研究中也发现ER β蛋白水平较正常明显下降。大多数研究结果提示ER β蛋白阳性表达是一个提示预后良好的指标。本研究结果显示，ER β在癌旁正常组织中阳性表达率(64.5%)明显高于乳腺癌组织(25.6%)，与国内外文献报道相符。ER β表达与组织分级呈负相关(P＜0.05)，与 Skliris等［4］研究结果一致。ER β 在乳腺癌的发生与发展中的作用，可能成为评估乳腺癌病变及患者预后的重要指标之一。

本研究显示，NF-κB和ER β在乳腺癌组织中的表达无关(P＜0.05)。目前，有关 ER与NF-κB的相互作用已被广泛地研究，但在目前的研究中仍存在不一致的结论，其差异可能与不同的组织细胞类型及相互作用的环节不同有关，因此二者在乳腺癌中的表达关系仍需进一步研究。

ER β在乳腺癌中的潜在作用存在着很大的争议。有研究发现ER β有促进乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的作用。因此，ER β与NF-κB的相互作用十分复杂，作用环节仍未完全明确，有待进一步研究和探讨。

［1］Chen F，Castranova V，Shi X.new insights into the role of nuclear factor rd3 in Cell Growth Regulation.Am J Pathol，2001，159(2):387-397.

［2］Nagai S，Washiyama K，Kurimoto M，Takaku A，Endo S，Kumanishi T.Aberrant nuclear factor kappa B activity and its participation in the growth of human malignant astrocytoma.J Neurosurg，2002，96(5):909-917.

［3］Roger P，Sahla ME，Makela S，et al.Decreased expression of estrogen receptor beta protein in proliferative preinvasive mammary tumors.Cancer Res.2001，61(6):2537-2541.

［4］Skliris GP.Munot K.Bell SM，et al.Reduced expression of oestrogen receptor beta in invasive breast cancer and its reexpression using DNA methyl transferase inhibitors in a cell line model.J Pathol 2003，201(2):213-220.