复方利血平片中盐酸异丙嗪的含量测定及含量均匀度考察

辛俊衡

（广西壮族自治区梧州食品药品检验所，广西 梧州 543002）

复方利血平片曾用名为复方降压片，主成分为利血平、氢氯噻嗪、维生素B6、混旋泛酸钙、三硅酸镁、氯化钾、维生素B1、硫酸双肼屈嗪、盐酸异丙嗪。现行国家药品标准尚未收载有关该片剂中各主要成分的含量测定方法，已有文献[1-4]报道了采用高效液相色谱（HPLC）法测定，但盐酸异丙嗪的含量及含量均匀度考察尚未见报道。本试验采用HPLC法测定盐酸异丙嗪的含量及含量均匀度，结果满意，现报道如下。

1 仪器与试药

安捷伦1200型高效液相色谱仪，包括G1311A四元泵，G1329A全自动进样器，G1314B紫外检测器，Chemstation色谱工作站；岛津UV-2450型紫外-可见分光光度计；Sartorius BP211D型电子天平（d=0.01 mg，80 g）。对照品盐酸异丙嗪（批号为 100422-200501）、利血平（批号为100041-200311）、氢氯噻嗪（批号为10030P-200001）、维生素B6（批号为100116-200502）、泛酸钙（批号为100370-200301）、维生素B1（批号为100390-200502）、硫酸双肼屈嗪（批号为100514-200301），均由中国药品生物制品检定所提供；淀粉（梧州市冰泉实业有限公司，批号为081028）；乙腈为色谱纯；硬脂酸镁、三硅酸镁、氯化钾、十二烷基硫酸钠、三乙胺、磷酸均为分析纯；复方利血平片（每片含盐酸异丙嗪2.1 mg，市售品）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent TC C18柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.3%十二烷基硫酸钠溶液-磷酸（60∶40∶0.02，用三乙胺调pH 至 3.3）；流速：1.0 mL/min；检测波长：250 nm；进样量：20 μL。

2.2 溶液制备

精密称取盐酸异丙嗪对照品42 mg，置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取该贮备液5 mL，置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。取样品20片，精密称定，研细，取约1片的量，精密称定，置50 mL量瓶中，加流动相适量振摇30 min使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。按处方比例配制不含盐酸异丙嗪的阴性对照样品，照供试品溶液制备方法配制阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

系统适用性试验：分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图（见图1）。结果阴性对照品溶液在对照品溶液的色谱峰相应位置无干扰峰，对照品峰保留时间约11 min，理论塔板数为11 624。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：精密吸取盐酸异丙嗪对照品贮备液3.0，4.0，5.0，6.0，7.0 mL，分别置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取上述溶液20 μL注入液相色谱仪，记录峰面积。以峰面积 Y对进样量 X（μg）进行线性回归，得回归方程为Y=5 319 X+5，r=0.999 9（n=5）。结果表明盐酸异丙嗪进样量在0.504～1.176 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

精密度试验：取对照品溶液20 μL，连续进样6次。结果峰面积的 RSD为0.2%（n=6），表明仪器精密度良好。

重现性试验：取同一批样品（批号为080107）6份，按样品含量测定方法测定。结果含量为96.8%，RSD=0.4%（n=6），表明方法重现性良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液（批号为 080107），于 0，2，4，6，8 h时分别进样，依法测定峰面积。结果的 RSD=0.3%（n=5）。

加样回收试验：分别精密称取已知含量的样品（批号为080102，含量98.0%，平均片重0.110 2 g）9份，置50 mL量瓶中，精密加入对照品贮备液（0.42 mg/mL）2.0，2.5，3.0 mL，按供试品溶液制备方法制备，依法测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 加样回收试验结果（n=9）

2.4 样品含量测定

取对照品溶液与供试品溶液，各进样 20 μL，依法测定，记录峰面积，按外标法计算含量。结果见表2。

表2 样品含量测定结果（n=3）

2.5 样品含量均匀度考察

取样品1片，置50 mL量瓶中，按供试品溶液含量测定方法测定含量，考察含量均匀度，结果见表3。

表3 样品含量均匀度测定结果

3 讨论

取盐酸异丙嗪对照品溶液进行全波段扫描，结果在250 nm波长附近有最大吸收，故选取250 nm作为检测波长。参照文献进行流动相选择，分别比较了甲醇-乙腈-水[2]、乙腈-水[3]、庚烷磺酸钠溶液-乙腈-甲醇-三乙胺[4]等流动相，结果它们与本法的分离效果都比较好，甲醇、乙腈系统有些拖尾，加三乙胺扫尾，最后采用本法的流动相。

制剂中盐酸异丙嗪为抗组胺药物，是制剂中主要成分之一，但在制剂中含量低，故考察了3批不同厂家产品中盐酸异丙嗪的含量及含量均匀度。结果含量均在一般片剂的限度（标示量的90.0%～110.0%）内，但含量均匀度的 A+1.80 s有2批接近最高限度15.0，说明含量均匀度不是很好。标准中对盐酸异丙嗪不作定性和定量检验，故在生产中为了提高投料准确性和混料均匀性，应进行这两项质量控制。本法专属强，准确度高，可参照使用。

[1]赵雪梅，张淑琴.反相高效液相色谱法测定复方利血平片中6个组分的含量[J]. 药物分析杂志，2003，23（5）：335-338.

[2]靳宝峰，温丽萍，刘 伟，等.高效液相色谱法用于复方降压片含量的测定[J]. 沈阳部队医药，1994，7（1）：50-51.

[3]方东伟.高效液相色谱法测定复方利血平片中氢氯噻嗪含量[J].中国药业，2005，l4（9）：51.

[4]吴艳琳，林志华，汪 洋，等.高效液相色谱法测定复方利血平片中4种成分的含量[J]. 中国药师，2007，10（6）：559-560.