风寒感冒片中盐酸麻黄碱含量的 RP-HPLC法测定

(山东大学附属省立医院，济南 250021)

风寒感冒片由十一味中药材组成，具有辛温解表和宣肺止咳之功效，对风寒感冒引起的头痛、畏寒、发热、流涕和咳嗽等具有良好的疗效。方中君药麻黄具有发汗散寒、宣肺平喘和利尿消肿等功能，其主要有效成分为麻黄碱和伪麻黄碱。2008年 1月 ～ 2009年 1月，本文建立了用高效液相色谱测定风寒感冒片中盐酸麻黄碱含量的方法，用于控制风寒感冒片的质量。

仪器和药物:高效液相色谱仪、LC2002色谱工作站、盐酸麻黄碱(中国药品生物制品检定所，批号:200303)、风寒感冒片(0.50 g/片，自制)、色谱醇、超纯水、分析纯，酸性甲醇为 0.3%盐酸甲醇液。

方法与结果:①色谱条件:Diamonsil C 18色谱柱(4.6 mm×200 mm，5μm)，流动相为甲醇 0.01mol/L、KH2PO4(8∶92，磷酸调 pH 3.0);流速为 1ml/min、检测波长 210 nm、柱温 25℃。理论塔板数按盐酸麻黄碱峰计算不得低于3 000。②盐酸麻黄碱对照品溶液的制备:精密称取盐酸麻黄碱对照品 11.45mg，置 100ml量瓶中，加酸性甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，得 0.114 5mg/ml的盐酸麻黄碱对照品贮备液。取贮备液 5ml加酸性甲醇液溶于25ml量瓶，摇匀，0.45μm微孔滤膜滤过即得对照品稀释液(22.90μg/ml)。③供试品溶液的制备:取本品适量，研细后取细粉约 0.5g，精密称量，置 100ml容量瓶中，加入酸性甲醇至刻度，密塞，超声处理 30min，放冷，用酸性甲醇补足至刻度，摇匀，普通滤纸滤过，取续滤液 5ml，用酸性甲醇定容至 25ml，摇匀，0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。④线性关系考察:精密吸取对照品贮备液 10μl，对照品稀释液 5.0、7.5、10.0、12.5μl，依上述色谱条件分别注入液相色谱仪，以盐酸麻黄碱的质量(M)为横坐标，峰面积积分值(A)为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为 A=4.244×106M+3.164×104，r=0.9999，盐酸麻黄碱在 0.1145～1.1450μg范围内呈良好的线性关系。⑤方法专属性:按同样工艺制备缺麻黄药材的阴性对照，再按供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。分别精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液，供试品溶液和阴性对照品溶液各 10μl，注入液相色谱仪，结果表明阴性对照无干扰。⑥精密度试验:精密吸取盐酸麻黄碱贮备液 10μl注入液相色谱仪，连续进样6次，其峰面积的 RSD=0.85%，表明进样精密度良好。⑦重复性试验:取本品(批号:030601)细粉约 0.5g共 6份，按下面的样品测定方法测定，6份样品中盐酸麻黄碱含量的 RSD=1.70%。⑧加样回收率试验:取本品(批号:030601)，研细，按高、中、低 3个浓度每个浓度精密称定 3份。分别加入定量的盐酸麻黄碱对照品，按下面的样品测定方法测定，平均回收率为 99.73%，RSD=1.50%。结果见表 1。⑨样品测定方法与结果:取本品 3批，按以上方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液和对照品稀释液，按上述色谱条件进样各 10 μl，以峰面积按外标法计算含量，结果 3批片剂麻黄碱含量(mg/片 )分别为 1.79、1.78、1.79。

表1 加样回收率结果

讨论:麻黄碱是麻黄药材的主要有效成分，故选用麻黄碱作为指标成分控制本品的质量。选择流动相时，筛选了甲醇—水、乙腈—水等流动相系统，试用了三乙胺、磷酸、冰醋酸等对色谱峰分离有影响的试剂，最后确定采用文中所述流动相系统，分离效果较好。用甲醇超声提取样品，进样后色谱峰拖尾，柱效为 2500，而采用 3‰盐酸甲醇液超声提取样品可使色谱峰的拖尾情况得到改善，柱效可达 4000。