均匀设计优选藏药如达胃宁的组方Δ

赖先荣，吴秦西，向永臣，王兰，李胜容，杨仕军

（1.成都中医药大学，成都市 610075；2.成都市第五人民医院，成都市 611130；3.重庆市中药研究院制药厂，重庆市 400065；4.四川省江源天然产物有限公司，洪雅市 620360）

消化性溃疡（简称溃疡病），临床表现以腹痛为主，疼痛限于上腹部，有慢性、周期性和节律性3个特点，严重影响人们的工作及生活质量[1]。藏药如达胃宁根据藏医传统医药理论组方，以沙棘、川木香作为组方药味，用于治疗溃疡病。

沙棘为胡颓子科植物沙棘Hippophae rhamnoides L.的干燥成熟果实，功能消食化滞、活血散瘀，用于治疗消化不良、食积腹痛、瘀血等证[2]，藏医用于培根病、消化不良、胃溃疡等病症的治疗[3]；沙棘果肉油具有抑制胃总酸排出量及增加胃黏液分泌量的作用[4]。

川木香为菊科川木香属植物川木香Vladimiria souliei（Franch.）Ling 及灰毛川木香 Vladimiria souliei（Franch.）Ling var.cinerea Ling的干燥根，功能行气止痛，用于治疗脘腹胀痛、肝胆疼痛等症[3，5]；在藏医经典名著《月王药诊》、《四部医典》、《晶珠本草》中也有记载，功能清培根热、化瘀止痛、健脾消积，治培根热症、气血量不和所致的胃腹胀痛、胁痛等症[6]。川木香中分离得到的乙酸乙酯部位，具有抑制实验性胃溃疡形成的作用[7]。

笔者以溃疡指数及溃疡抑制率为指标，采用均匀设计方法对藏药如达胃宁的组方比例进行筛选和优化，为进一步探索其防治溃疡病的作用机制提供理论基础。

1 材料

1.1 仪器

BS110型电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；游标卡尺（无锡锡工量具有限公司）。

1.2 试药

沙棘（压榨离心法制成沙棘果油提取物，提取物收率为10%，批号：20070401）、川木香（乙醇回流提取-醋酸乙酯萃取法制成川木香提取物，提取物收率为6%，批号：20070401）均由成都中医药大学民族医药研究所提供；盐酸雷尼替丁胶囊（西南合成制药股份有限公司，批号：061003）；利血平注射液（广东邦民制药厂有限公司，批号：060308）；甲醛溶液（37%～40%，成都市科龙化工试剂厂，批号：20060124）；聚乙二醇400（成都市科龙化工试剂厂，批号：20060306）。

1.3 动物

普通级昆明种小鼠170只，♀♂兼半，体质量18～22 g，由四川省医学科学院实验动物研究所提供（动物合格证号：SCXK（川）2004-15）。

2 方法与结果

2.1 筛选实验方法与结果

采用均匀设计试验设计筛选实验，选用混合水平的试验表U6（6×3）[8]进行试验，同时采用单因素试验方法考察组方各药味抑制溃疡形成的作用。

取小鼠130只，随机分13组，每组10只，分别为正常（给予同体积生理盐水）、模型（给予同体积含水聚乙二醇-400溶液）、雷尼替丁（给予50 mg·kg-1雷尼替丁的含水聚乙二醇-400溶液）、组方设计各剂量（按表1设计剂量给予药物的含水聚乙二醇-400溶液）、各给药剂量（按表2设计剂量给予药物的含水聚乙二醇-400溶液）组。ig给药（0.2 mL·20 g-1），连续7 d，实验前禁食不禁水24 h，各组再给药1次，1 h后sc利血平10 mg·kg-（1正常组sc等量生理盐水），6 h后颈椎脱臼处死动物，解剖取胃，结扎胃的贲门部和幽门部并经胃壁向胃腔内注入1%甲醛2 mL，将胃取出浸入1%甲醛溶液中，30 min后沿胃大弯剪开，洗净胃内容物，将胃黏膜展开，游标卡尺测定胃黏膜损伤的程度（计分方法：无损伤为0分，瘀血点为1分，线状瘀血长度＜1 mm为2分，1～2 mm为3分，2～3 mm为4分，＞3 mm为5分），计算溃疡指数、溃疡抑制率。数据以±s 表示。各组溃疡指数数据处理采用SPSS 10.00统计软件，各组实验数据方差齐性，采用单因素方差分析的两两比较方法进行统计分析。因素水平见表1；均匀设计试验结果见表2。溃疡抑制率（%）＝（模型组平均溃疡指数－各给药剂量组平均溃疡指数）/模型组平均溃疡指数×100%。

表1 因素水平Tab 1 Factors and levels

表2 均匀设计试验结果Tab 2 Results of uniform design

各均匀设计组数据处理采用DPS统计软件，进行二次多项式逐步回归分析，进行数学模型最优化的寻优处理。

显著水平P＝0.06（P＜0.1）；相关系数R＝0.95

显著水平P＝0.06（P＜0.1）；相关系数R＝0.95

由表2可知，与模型组比较，均匀设计组、各单味药组均能显著降低溃疡指数（P＜0.01），具有显著抑制溃疡形成的作用。回归方程（1）、（2）的寻优结果表明，藏药如达胃宁组方的优化比例为沙棘（X1）1.5份、川木香（X2）9份。

2.2 验证实验方法与结果

取小鼠40只，随机分4组，每组10只，分别为正常（给予同体积生理盐水）、模型（给予同体积含水聚乙二醇-400）、雷尼替丁（50 mg·kg-1雷尼替丁的含水聚乙二醇-400溶液）、优化比例（按藏药如达胃宁组方的优化比例给予药物的含水聚乙二醇-400溶液）组。按“2.1”项下方法，依法计算溃疡指数、溃疡抑制率。验证实验结果见表3。

表3 验证实验结果Tab 3 Results of verifying test

由表3可知，与模型组比较，雷尼替丁及优化比例组（沙棘1.5份、川木香9份）均能显著降低溃疡指数（P＜0.01或P＜0.05），具有显著抑制溃疡形成的作用。

3 讨论

本研究表明，藏药如达胃宁组方的优化比例为沙棘1.5份、川木香9份，能显著降低溃疡指数（P＜0.01），为进一步深入探索藏药如达胃宁防治溃疡病的作用机制建立了良好基础。

溃疡病防治的关键在于改善溃疡愈合质量，降低溃疡复发率。沙棘和川木香均可用于溃疡病的治疗。沙棘消食化滞、活血散瘀，可以抑制胃蛋白酶的活性和降低游离酸，针对溃疡病发病的愈合期和疤痕期（如脾胃虚弱、血瘀等证），缓则治其本；川木香行气止痛，保护胃黏膜，兼有止痛作用，急则治其标，针对溃疡病发病的活动期（如胃脘疼痛等症）。通过均匀设计试验探索药物组方优化比例，表明沙棘油提取物与川木香提取物以一定比例配伍配比后，能提高抗溃疡作用，具有协同增效作用，二者合用，急则治其标、缓则治其本，治疗作用互补、标本兼治，共同用于溃疡病的治疗。

均匀设计试验结果表明，复方抑制溃疡形成作用中川木香的贡献较大，发挥了行气止痛作用，为传统藏医药理论中应用川木香“生肌脂”、“愈溃疡”提供了理论证据，有利于拓展藏药在溃疡病治疗上的用途。

[1]陆星华，于中麟，江鸿志，等.溃疡病的流行病学研究——北京地区358644例胃镜分析[J].中华消化杂志，1996，16（3）：152.

[2]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].2005年版.北京：化学工业出版社，2005：25、127.

[3]罗达尚主编.中华藏本草[M].北京：民族出版社，1997：162、265.

[4]邢建峰，董亚琳，王秉文，等.沙棘果肉油对大鼠胃液分泌的影响及抗胃溃疡作用[J].中国药房，2003，14（8）：461.

[5]王战国，赖先荣，肖莹莹，等.川木香的研究进展[J].中国药房，2006，17（4）：303.

[6]赖先荣，孟保华，江志尧，等.川木香对实验性胃溃疡形成的抑制作用研究[J].现代生物医学进展，2008，8（1）：34.

[7]赖先荣.川木香有效组分抗消化性溃疡的研究进展[J].第四军医大学学报，2006，27（增刊）：45.

[8]方开泰.均匀设计与均匀设计表[M].北京：科学出版社，1994：98.