TPPA和 TRUST两种检查方法在梅毒血清学检查中的应用

秦玲

梅毒是一种严重的性传播疾病,它不仅引起全身性损害,同时还可以通过胎盘传给胎儿,引起先天性梅毒[1]。近年来梅毒的发病率明显上升,检测方法的可靠性治疗的准确性及血液制品使用的安全性[2],采取合适的检查方法有利于指导临床的诊断和治疗。梅毒的实验室检测在梅毒诊断中占有非常重要的地位,是诊断梅毒的重要依据之一。目前甲苯胺红不加热血清试验 (TRUST)和明胶颗粒凝集试验 (TPPA)已广泛应用于实验室,作为检查梅毒螺旋体的重要方法。本研究旨在探讨分别采用 TPPA和 TRUST两种检查方法在梅毒血清学检查中的应用,从而为临床梅毒检测方法的选择提供进一步的指导。

1 资料与方法

1.1 标本来源 选择我院 2005年 1月—2009年 12月 26例(份)梅毒血清标本作为研究对象,其中,男 19例,女 7例,年龄 18-67岁。根据梅毒的诊断标准[2]:其中Ⅰ期梅毒 10例,Ⅱ期梅毒 9例,Ⅲ期梅毒 4例,潜伏梅毒 3例;另选 10例经临床确定为类风湿性关节炎、乙型肝炎、SLE、肺结核的作为对照组;以及 10例健康体检者作为研究对象。

1.2 试剂与仪器 TRUST试剂由上海荣盛生物技术有限公司生产,TPPA试剂由日本富士株式会社生产提供。所用仪器为Biocell-2010酶标仪、Biocell-Fluido洗板机均由郑州博赛生物工程有限公司提供。所有试剂盒 46例标本采用 TPPA和TRUST两种检查方法同时进行检测,操作严格按照各厂家项目 SOP文件和仪器 SOP文件的要求进行均在有效期内按说明书严格操作。

1.3 检测方法 46例标本采用 TPPA和 TRUST两种检查方法同时进行检测,操作严格按照各厂家项目 SOP文件和仪器SOP文件的要求进行。TRUST结果判断:以可见中等或较大的红色凝聚物为阳性;可见较小的红色凝聚物为弱阳性;可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物为阴性。TPPA结果判断:若粒子成纽扣状凝集,呈现外周边缘均匀且平滑的圆形为阴性;若粒子形成小环状,呈现外周边缘均匀平滑的圆形为可疑;若外周边缘不均匀且杂乱的凝集在周围为阳性。TRUST和 TPPA每次均作阴、阳性对照。

1.4 统计学方法 采用 SPSS11.0软件进行统计学分析。计数资料的比较用 χ2检验;以 P＜0.05为差异有统计学意义。其中敏感性=阳性数 /检测数 ×100%;特异性=TN/(FP+TN)×100%(其中:TP=真阳性,FN=假阴性,FP=假阳性,TN=真阴性)。

2 结果

2.1 两种检查方法法的检测阳性率比较 两组阳性率比较,TPPA检测法对梅毒检测的阳性率明显高于 TRUST检测法,差异有统计学意义 (P＜0.05,见表1)。

2.2 两种检测方法的敏感性和特异性比较 TPPA检测梅毒的敏感性和特异性明显高于 TRUST检查法。且检测Ⅲ期梅毒及潜伏梅毒的阳性率分别均高于 TRUST检测的阳性率,两组比较差异具有显著性 (P＜0.05,见表2)。

表1 两种检查方法法的检测阳性率比较Table1 Two inspection methods tested positie method

表2 两种检测方法的敏感性和特异性比较Tab le 2 Two detection method is the sensitivity and specificity

3 讨论

梅毒是由于梅毒螺旋体感染引起的传染性疾病,近年来,我国梅毒的发病率明显呈现上升趋势。因此对梅毒检测的准确率及特异性对梅毒的诊治具有重要的临床意义。

目前用于梅毒血清学检验方法有性病研究实验室试验(VDRL)、不加热血清反应素试验 (USR)、快速血浆反应素试验 (RPR)、甲苯胺红不加热血清试验 (TRUST)、梅毒酶联免疫吸附试验 (TP-ELISA)、梅毒胶体金法 (SYP)、荧光密螺旋体抗体吸收试验 (FTA-ABS)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒螺旋体抗体 TPPA、梅毒螺旋体制动试验(TPI)等 10种,但临床检验室较常用的是 TRUST、TPPA[3]。

TRUST主要是测定血清中的心磷脂抗体。梅毒螺旋体内部具有类脂质抗原,在螺旋体属中各群之间或同螺旋体以外均可出现交叉反应,而且采用肉眼观测,其漏检率较高,故特异性、敏感度较低,但其价格低廉、操作简便。TRUST检测在梅毒感染的不同时期检出率差别较大。除Ⅱ期检出率高外,其他各期极易漏检出现假阴性结果。由于心磷脂存在其他组织中,自身免疫性疾病,如类风湿性关节炎、乙型肝炎患者、系统性红斑狼疮、活动性肺结核等甚至正常人都能产生抗心磷脂抗体,导致生物性假阳性结果。在Ⅰ期、Ⅲ期和潜伏期梅毒时,可呈阴性反应,TRUST作为过筛试验具有操作简便、快速、价格低廉的特点,是其他方法替代不了的,但其灵敏度、特异性、符合率均低于 TPPA[4]。

梅毒螺旋体 TPPA是检测梅毒特异性抗体,感染者一旦感染后,该抗体终身检测为阳性。TPPA是在人工载体明胶粒子上包被纯化后梅毒菌株成分,滴加样本后样本中的抗体与菌株结合,凝聚于明胶颗粒,用于梅毒抗体的检测。明胶颗粒凝集试验法能偶敏感的反应梅毒螺旋体抗体的滴度,但其在相邻滴度的判断常与检测者的主观感觉有关[5]。TPPA是将纯化的致病性梅毒的精致菌株成分包被在人工载体明胶粒子上,检测血清中相应的抗体。TPPA敏感性、特异性较高,但检测时间较长,结果判定常有主观色彩,不适于大批量的筛选试验[6-8]。

以上研究说明,TPPA的敏感性和特异性优于 TRUST检测法,是临床常用的梅毒确诊试验,但其不适合大量标本的筛查,更适合用于 TRUST测定阳性后的确诊试验,建议临床检验医师应予以注意。

1 吴志华.皮肤性病学第 3版 [M].广州:广东科学技术出版社,2001:132.

2 张学军.皮肤性病学 [M].北京:人民卫生出版社,2003:486.

3 阮乐幸.TP-ELISA用于血清梅毒筛查的可行性评价 [J].中国输血杂志,2002,15(6):413.

4 周渭珩,裘新民,洪为松,等.梅毒胶体金法和 TPPA诊断梅毒的比较研究 [J].浙江临床医学,2004,6(4):324-325.

5 李卫红,曹付群,张振武,等.驻马店市 1997—2006年淋病、梅毒流行病学分析及预防策略 [J].现代预防医学,2008,35(1):150-151.

6 曾英.梅毒血清学检测方法比较及临床应用探讨 [J].国际检验医学杂志,2007,28(11):1054-1055.

7 孔丽蕊.3种梅毒血清学检测方法的评价 [J].检验医学与临床,2008,5(18):1119-1120.

8 胡艳文,邢双,于晓红,等.梅毒血清学不同检测方法的检测结果评价 [J].山西医学杂志,2009,10:942.