金丝桃苷对荷瘤小鼠肿瘤抑制作用研究

王丽敏,王跃新,朱秋双,杨 玉,白 雪,刘明远

(佳木斯大学基础医学院,黑龙江 佳木斯 154007)

贯叶金丝桃为藤黄科金丝桃属多年生草本植物,具有清热解毒、抗抑郁、抗病毒等功效[1]。金丝桃苷(Hyperin,Hyp)属黄酮醇苷化合物,是金丝桃属植物的特征性成分之一[2]。金丝桃苷毒性小,具有镇痛、抗炎、止咳、抗氧化、保护心血管系统等多种药理学活性[3,4]。我们在前期的实验中发现金丝桃苷在体外可以显著抑制多种肿瘤细胞的增殖,但目前尚无金丝桃苷对动物移植性肿瘤抑制作用的报道。本文通过小鼠移植性肿瘤模型的整体实验,观察金丝桃苷对其肿瘤生长抑制作用,为金丝桃苷用于肿瘤的临床治疗提供实验依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

结肠癌细胞株 HCT8、肉瘤 S180由哈尔滨医科大学肿瘤医院提供,由本研究室定期腹腔接种传代保种。雌性昆明种小鼠(合格证号:黑动字第99101001号 ),体重 18～ 22g,由佳木斯大学实验动物中心提供。金丝桃苷购自北京生物制品研究所。

1.2 方法

1.2.1 接种 HCT8结肠癌细胞及 S180肉瘤细胞

将预先接种 HCT8、S180腹水瘤的小鼠处死,从腹腔抽出的瘤液,用生理盐水按 1∶3比例稀释成 5× 106个癌细胞/mL悬液,每只小鼠右侧腋窝皮下接种0.2mL。以上操作在无菌条件下进行。

1.2.2 分组及给药

接种后随机分组,每组10只。其中金丝桃苷设三个剂量组 (1.5、3.0、 6.0 mg/kg,ip给药 ),阳性组 (顺铂 3.0mg/kg,ip给药),阴性对照组给予灭菌生理盐水(ip给药 )。接种24 h后给药,每日1次,记录各组小鼠生长情况并称重,连续 8d。

1.2.3 指标测定

实验组于末次给药次日,处死小鼠,剥离瘤块称其重量。并计算抑瘤率。

抑瘤率= (对照组瘤质量-给药组瘤质量)/对照组瘤质量×100%

1.2.4 数据处理

所有数据以平均值±标准差表示,采用双侧 T检验进行组间分析。以P＜0.05作为显著性检验标准。

2 结果

2.1 不同处理对荷瘤小鼠外形变化影响

与正常对照组相比,荷瘤对照组小鼠的瘤块明显增大,质地较软且界限模糊,难以剥离,有的还扩散至胸骨、锁骨等处.金丝桃苷不同剂量组和顺铂组小鼠的瘤块较小,界限清晰,质地较硬,容易剥离;金丝桃苷不同剂量组对小鼠的外形基本无影响,其毛发、活动及体重基本正常;顺铂组小鼠毛发蓬松零乱、行动迟缓,体重增加缓慢,部分小鼠体重有微量减轻。

2.2 金丝桃苷对 S180荷瘤鼠的抑瘤作用

金丝桃苷对 S180荷瘤鼠具有很好的抑瘤效果,金丝桃苷各剂量组的平均瘤质量与生理盐水组相比差异显著(P＜0.01),并且抑瘤效果有良好的剂量依赖性,其中金丝桃苷6.0mg/kg组的抑瘤率最高,达到62.93% (见表1)。

2.3 金丝桃苷对 HCT8异种移植瘤小鼠的抑瘤作用结果

金丝桃苷对 HCT8异种移植瘤小鼠表现出明显的抑瘤作用,可使其瘤重明显减轻,与生理盐水组相比差异显著(P ＜0.01),当剂量为 6.0mg/kg时,抑瘤率可达到65.04%(见表 2)。

表1 金丝桃苷对 S180荷瘤鼠的抑瘤作用 (±s,n=10)

表1 金丝桃苷对 S180荷瘤鼠的抑瘤作用 (±s,n=10)

注:与生理盐水组比较,*P＜0.05,** ＜0.01。

组别 剂量(mg/kg)体重(g)开始 结束 瘤质量(g) 抑制率(%)生理盐水 — 20.49±1.11 22.96±1.27 1.16±0.23 —金丝桃苷 1.5 20.55± 1.73 21.78± 1.28 0.98± 0.12* 15.52 3.0 21.03± 1.16 22.25± 1.73 0.61± 0.11** 47.41 6.0 20.19± 1.73 21.68± 1.86 0.43± 0.07** 62.93顺铂 3.0 19.65± 1.41 20.13± 1.24 0.38± 0.09** 67.24

表2 金丝桃苷对人结肠癌 HCT8异种移植瘤生长抑制作用 (±s,n=10)

表2 金丝桃苷对人结肠癌 HCT8异种移植瘤生长抑制作用 (±s,n=10)

注:与生理盐水组比较,*P＜0.05,**P＜0.01。

组别 剂量(mg/kg)体重(g)开始 结束 瘤质量(g) 抑制率(%)生理盐水 — 20.37±1.62 22.76±1.41 1.23±0.24 —金丝桃苷 1.5 20.95± 1.84 22.17± 1.46 0.92± 0.21* 25.20 3.0 20.67± 1.39 21.89± 1.65 0.62± 0.18** 49.59 6.0 21.31± 1.09 22.83± 1.72 0.43± 0.09** 65.04顺铂 3.0 20.16± 1.41 20.97± 1.31 0.41± 0.03** 66.67

3 讨论

恶性肿瘤是临床常见的一种疾病,严重威胁着人民的身心健康。肿瘤的化疗是治疗肿瘤不可缺少的手段,由于现阶段用于临床的化疗药物对肿瘤细胞选择性普遍较差,毒副反应大已成为当今肿瘤治疗的一大难题。近年来,从植物中寻找天然抗肿瘤药物越来越受到人们的重视,天然植物药因其毒性低、疗效好,而成为治疗肿瘤的新途径,是当前抗肿瘤新药研究的主要发展方向。

我们从整体的角度观察了金丝桃苷对结肠癌 HCT8和肉瘤 S180移植性模型小鼠肿瘤生长的影响 ,结果表明金丝桃苷在小剂量时对荷瘤小鼠就产生抑瘤作用,随着剂量增加其抑瘤效果逐渐提高并且金丝桃苷不同剂量组荷瘤小鼠的外形保持基本正常,说明在此剂量范围内未表现出毒性,通过进一步研究,金丝桃苷有希望发展成为一种新型的抗癌药。

[1]Josey E S,Tackett R L.St John’s wort:a new alternative for depression[J].International Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics,1999,37(3):111-113

[2]李艳,曹学丽,付鹏.贯叶金丝桃活性成分及其分离纯化与检测方法的研究进展 [J].药学进展,2008,32(1):15-20

[3]张成伟,周亚球,陈磊.金丝桃苷药理作用研究进展 [J].安徽医药,2007,11(11):961-963

[4]李庆林,陈志武,马传庚.金丝桃苷对原代培养的大鼠心肌细胞缺氧-再给氧损伤的影响[J].中草药,2006,37(4):575-577