杜仲雄花茶对小鼠抗应激作用的实验

陈百泉,娄丽杰,杜红岩,付建敏,杜兰英,李 钦

(1.河南大学中药研究所,河南 开封 475004;2.中国林业科学研究院经济林研究开发中心,河南 郑州 450003)

杜仲雄花茶对小鼠抗应激作用的实验

陈百泉1*,娄丽杰1,杜红岩2,付建敏2,杜兰英2,李 钦1

(1.河南大学中药研究所,河南 开封 475004;2.中国林业科学研究院经济林研究开发中心,河南 郑州 450003)

目的:研究杜仲雄花茶对小鼠的抗应激作用。方法:昆明种小鼠随机分为4组,空白对照组、杜仲皮对照组、杜仲雄花给药高剂量组和杜仲雄花给药低剂量组,各组按设计剂量灌胃给药,连续14 d;末次给药1 h后进行耐低温、耐高温、负重游泳及耐缺氧的应激实验,并记录其存活时间。结果:不同剂量的杜仲雄花茶均有明显的抗应激作用,能有效延长小鼠的耐低温、耐高温、负重游泳及耐缺氧的时间。结论:杜仲雄花茶具有明显的抗应激作用。

杜仲雄花茶;耐低温;耐高温;游泳;耐缺氧

杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)是我国特产的名贵中药材。我国杜仲资源约占世界杜仲资源总量的99%以上[1]。杜仲皮、茎、叶均可入药,主要产于贵州、四川、湖北、浙江等省。杜仲皮具有补肝肾,强筋骨,安胎,抗衰老的功效,但对于杜仲雄花的药用却报道很少。杜仲为雌雄异株树种,其中雄株占40%～60%[2]。近年来研究发现,杜仲雄花与叶,皮含有相类似的有效成分,富含总黄酮,桃叶珊瑚甙,绿原酸等,其中黄酮类化合物的含量高于皮和叶[3]。杜仲雄花茶形状与普通茶叶十分相似,不需要和其他茶种配合,具有汤色黄绿透亮,滋味浓而爽口,香气独特而持久,回味甜的特点,它充分利用了杜仲雄花资源,开拓了杜仲综合利用的新途径。本试验研究了杜仲雄花茶对小鼠耐低温、耐高温、负重游泳及耐缺氧能力的影响。

1 实验材料

1.1 动物

昆明种小白鼠160只,雌雄兼有,体重20 g±2 g,由河南省实验动物中心提供,购进适应3 d。

1.2 药品

杜仲雄花茶(由灵宝市天地科技生态有限责任公司)。

1.3 仪器

电子天平(JY10001上皿电子天平,上海精密科技仪器有限公司);250mL磨口广口瓶;250mL锥形瓶;电热恒温水浴锅(上海博迅医疗器械厂,型号:HHS-11-2);温度计;秒表(上海星钻秒表有限公司)。

1.4 药材的处理

取杜仲雄花茶200 g,加一定量的清水浸泡30min,加水没过药面1 cm,煎煮3次,时间分别为60、40、20min,合并3次滤液蒸发浓缩至 200mL(1mL含生药1 g),装瓶备用[4]。用同样的方法制备杜仲皮水煎液。

2 试验方法

2.1 耐低温试验[5]

取小鼠40只,雌雄各半,随机分为 4组,每组10只,分别为空白对照组,杜仲皮对照组,杜仲雄花高剂量组,杜仲雄花低剂量组。每天空白对照组灌胃生理盐水20mL/kg,杜仲皮对照组灌胃杜仲皮水煎液20mL/kg,杜仲雄花高低剂量组分别灌胃杜仲雄花茶水煎液20mL/kg,5mL/kg,连续给药14 d。于末次给药1 h后,将小鼠放入-25℃的低温冰箱中,记录其存活时间。结果见表1。

2.2 耐高温试验[5]

取小鼠40只,雌雄各半,分组与给药剂量同2.1。末次给药1 h后,将小鼠置于250mL的锥形瓶中,然后将锥形瓶放入温度为42℃±0.5℃的恒温水浴锅中,并用纱布封住瓶口。记录小鼠在此条件下的存活时间。结果见表1,说明杜仲雄花茶能延长小鼠在高温条件下的存活时间。

2.3 负重游泳试验[5]

取小鼠40只,分组与给药剂量同2.1。末次给药1h后,随机抽取小鼠,每只负重(5%体重重量),然后放入深23 cm、温度为25℃±1℃的水中游泳。以小鼠游泳至头部深入水中15 s不再浮起为结束,记录小鼠游泳持续时间。结果见表1。

2.4 耐缺氧试验[5]

取小鼠40只,分组与给药剂量同2.1。末次给药1 h后,将小鼠放入盛有10 g钠石灰的磨口广口瓶中(钠石灰上垫滤纸用以吸收尿液),每瓶1只,瓶口涂凡士林,密封容器,拧紧瓶塞,以最后一次呼吸为指标,记录小鼠在缺氧条件下的存活时间。结果见表1。

2.5 数据处理

所有数据用计算机SPSS 10.0软件进行处理,均数以表示。

3 实验结果

实验结果表明,与空白对照组相比,杜仲雄花茶高、低剂量组都能显著的延长小鼠的低温、高温存活时间,负重游泳时间和缺氧存活时间(P ＜0.05)。

表1 杜仲雄花茶对小鼠耐低温,耐高温,耐疲劳,耐缺氧能力的影响

4 讨论

应激是机体在受到各种内外环境因素刺激时出现的非特异性全身反应。外界环境的不良刺激如过度疲劳、过冷或过热、缺氧等以及人体自身过度的忧、思、恐、怒等情感刺激,均可构成应激原,使机体处于应激状态[6]。过量或长期的有害刺激可引起机体的代谢紊乱,免疫力下降,进而引起一系列的疾病。有多种疾病的发病均与慢性应激有关,如原发性消化性溃疡、甲亢、高血压、冠心病、支气管哮喘等。慢性应激所造成的脂质过氧化物的长期积蓄还可损害生物膜,促使细胞发生退行性变化,加速机体器官的老化[7]。而抗应激就是要减轻,抵抗这种应激反应对机体造成的不良影响。

本实验证实杜仲雄花茶水煎液可以延长小鼠的低温存活时间,高温存活时间,负重游泳时间和缺氧存活时间,有效提高小鼠的抗应激能力,使机体对环境变化的适应性增强,对应激因子引起的机体损伤具有保护作用。杜仲入药虽已有2000多年的历史,但是对杜仲雄花的研究却很少,对抗应激的报道也很少,其抗应激机制有待于进一步研究。

[1]杜红岩.杜仲优质高产栽培[M].北京:中国林业出版社,1996:143.

[2]王丙武,王雅清,莫 华,等.杜仲雌雄株细胞学、顶芽及叶含胶量的比较[J].植物学报,1999,41(1):11-15.

[3]张康健,董娟娥,马柏林,等.杜仲次生代谢物部位差异性的研究[J].林业科学,2002,38(6):12-16.

[4]程郁昕,宁康健,吕锦芳,等.杜仲叶对小鼠中枢镇静作用的实验研究[J].中国中医药科技,2007,14(2):98-99.

[5]陈奇.中药药理研究方法学[M].2版.北京:人民卫生出版社,2006:778.

[6]张雪琳.关于运动性疲劳的氧自由基-脂质[J].河北体育学院学报,2000,14(3):67.

[7]蔡晶,王万山,雷林生.钩吻素子对小鼠抗应激作用的实验研究[J].广州中医药大学学报,2007,24(4):317-319.

[责任编辑 李武营]

Anti-stimulation effects of Eucommia ulmoides male flower tea on mice

CHEN Bai-uan1*,LOU Li-jie1,DU Hong-yan2,FU Jian-min2,DU Lan-ying2,LI Qin1(1.Institute of Chinese Materia Medica,Henan University,Kaifeng,Henan 475004,China;2.Economic Forestry Research and Development Center,Chinese Academy of Forestry,Zhengzhou,Henan 450003,China)

Objective:To study the effects of Eucommia ulmoides male flower on the mice s ability of antistimulation.Methods:The mice were divided into four groups at random,the control group,the Eucommia fur control group,high dose group and low dose group,After the mice were administrated by gastric perfusion on design dose for 14 days,the impact on anti-stimulation action by mice s common lower temperature resistant test,higher temperature resistant test,swimming test and anti-anoxia test were conduceted,and the alive time was recorded.Results:The remarkable anti-stimulation action could be found in the different dosages of Eucommia ulmoides male flower,and could effectively extend the time of mice s lower and higher temperature resistant,loaded swimming capacity and anti-anoxia time.Conclusion:Eucommia ulmoides male flower tea has significant antistimulation action.

Eucommia ulmoides malef lower;Lower temperature-resistant;Higher tem perature resistant swimming;anti-anoxia

R285.5

A

1672-7606(2010)03-0197-03

2010-05-25

国家“十一五”科技支撑项目(2006BAD18B0303);国家林业局重点攻关项目(2006-61);国家“948”项目(2008-4-66);河南省教育厅自然科学基金(2008A360003)。

陈百泉(1962-),男,河南长垣人,副教授,硕士生导师,从事药理学的教学及科研工作。