中药平车前不同部位总黄酮含量测定

2010-04-03王恩张小华

长春中医药大学学报 2010年1期

关键词：平车车前草药用

林莺,王恩,张小华 ,李芳

（滨州医学院,山东烟台 264003）

中药平车前不同部位总黄酮含量测定

林莺,王恩,张小华 ,李芳

（滨州医学院,山东烟台 264003）

目的提取平车前不同部位总黄酮并测定其含量。方法用索式提取器乙醇抽提平车前不同部位总黄酮,获得乙醇提取液,利用减压浓缩法蒸去乙醇获得总黄酮提取液,并用芦丁标准曲线法计算平车前不同部位的总黄酮含量。结果平车前穗、叶、根中总黄酮含量分别为4.04%、2.48%、2.05%。结论平车前全草均含有黄酮类成分,其中穗中含量最高,含有较高的镇咳有效成分。因此,平车前全草均可用于总黄酮类药用资源开发。

平车前;总黄酮;微波提取

车前是车前科车前属植物,又称车前菜、牛舌草、车轮菜、猪耳草等。车前全身是宝,嫩可食用,成可入药。车前作为一味常用中药,始载于《神农本草经》,列为上品,被国家卫生部列入可用于保健品生产的原料名单[1-2]。车前科植物有3属约260种。而我国仅有车前属1属,13种[3]。目前开发用于药用的主要是大车前（Plantago major L.）、车前（plantago asiatical L.）和平车前（Plantago depresaa Willd.）[4]。车前味甘、寒,无毒,具有清热解毒、祛痰、止咳、利尿等作用[5],主气癃止痛,利水通小便,除湿痹,久服轻身耐老[4,6-7]。现代药理研究表明,车前全草中主要有效成分为乌苏酸、车前苷、环烯醚苷类、黄酮类成分[8]。其中黄酮类化合物为镇咳主要成分,车前草中的黄酮及其苷类对呼吸系统有着明显的作用。车前苷作用于呼吸中枢,具有明显的镇咳作用,通过兴奋分泌神经可促进气管、支气管液及消化液的分泌,且无溶血作用。苯乙酰咖啡酰糖酯类化合物能够抑制环腺苷酸磷酸二酯酶与5-脂氧合酶,说明总黄酮类物质是车前镇咳抗炎活性的主要物质基础[3,9-10]。但是在不同植物的不同部位,总黄酮的含量可能不同,这对于药材的采集及中药有效成分的提取都具有至关重要的关系。现在对车前总黄酮含量的研究多集中在对大车前的研究,而对平车前的研究较少。为了充分利用中药资源,了解不同植物来源的中药有效成分,本文选取平车前（Plantago depresaa Willd.）为供试材料,通过对平车前不同部位总黄酮含量的研究,探索平车前体内总黄酮的分布,为中药有效成分提取提供基础理论依据。

1 材料与仪器

722型分光光度计（上海分析仪器厂）。试剂标准品芦丁为国药集团化学试剂有限公司生产。所用试剂均为分析纯,所用水为蒸馏水。所用平车前,7月采集于本地,自然晾干,待用。

2 方法与结果

2.1 总黄酮的提取[7,11]精密称取平车前穗、叶、根各1 g于索氏提取器中,加入70%的乙醇100 mL及少许CaCO3,提取8 h,提取液减压浓缩蒸去乙醇。浓缩液于分液漏斗中用相同体积的乙醚洗2～3次,以除叶绿素及腊质等,然后用 70%的乙醇定容至100 mL,待测。

2.2 绘制标准曲线[11]精密称取芦丁10 mg,用70%的乙醇溶解并定容至100 mL,使其浓度为100 μ g/mL。将芦丁溶液用70%的乙醇稀释成0,5,10,15,20,25,30,35,40,45,50,55,60,65,70,75,80,85,90,95,100 μ g/mL,各取 1 mL 于试管中 ,加 70%的乙醇 1 mL,加入300 μ L 5%的NaNO2,6 min后加入300 μ L 10%的 Al（NO3）3 溶液 ,6 min 后再加入 2 mL 4%NaOH,10 min后于分光光度计波长510 nm处测定A值。绘制浓度CA标准曲线。

2.3 总黄酮含量的测定[11]取经稀释过的样品溶液各1 mL,按上述同样的步骤和方法测定得A值,从标准曲线查得样品中总黄酮的含量（μ g/mL）,测得中药车前不同部位的总黄酮含量,以芦丁计分别为:穗4.04%,叶 2.48%,根 2.05%。

2.4 回收率试验精密称取车前草适量,加入芦丁对照品适量,按样品液制备和样品测定方法操作,测得平均回收率为98.7%,RSD=1.63%（n=6）。

2.5 精密度试验精密吸取芦丁对照品溶液2.0 mL,按2.2项下方法连续测定6次,测定其吸收度后RSD=0.32%（n=6）。表明仪器精密度良好。