P-gp在大肠癌中的表达及临床意义

李旭强，王 慧，郑纪宁

(承德医学院，河北承德 067000）

P-gp在大肠癌中的表达及临床意义

李旭强，王 慧，郑纪宁△

(承德医学院，河北承德 067000）

目的:探讨大肠癌组织多药耐药基因(MDR-1）产物P-糖蛋白(P-gp）表达与大肠癌临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学染色法检测80例大肠癌组织P-gp的表达情况，对其临床病理学因素进行分析。结果:80例大肠癌患者中，P-gp阳性表达率为43.75%(35/80）。P-gp表达与大肠癌的分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移无关(P＞0.05）;与年龄有关，≥60岁者P-gp的阳性表达率明显低于60岁以下者(P＜0.01）。结论:大肠癌组织P-gp的表达率较高，并且与年龄相关，临床检测P-gp对选择个体化化疗方案具有重要意义。

大肠癌;P-gp;免疫组织化学;多药耐药基因

大肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤，发病率逐年上升，仅次于胃癌、食管癌。但大肠癌早期症状不明显，且病情发展缓慢，发现时多为晚期，治疗多采用手术与化疗相结合的方法，然而临床疗效不十分满意。近年的研究证实，多药耐药基因(MDR-1）是造成大肠癌化疗失败或早期复发的主要原因，其表达产物P-糖蛋白(P-gp）是造成耐药性的物质基础[1]。本研究采用免疫组化染色方法检测80例大肠癌组织P-gp的表达情况，并结合病人的临床资料进行综合分析，以期为临床制定个体化治疗方案提供资料。

1 材料与方法

1.1 标本选择 2009年7月-2009年12月承德医学院附属医院病理科大肠癌手术切除标本80例，男46例、女34例，年龄25-80岁，所有患者均为首次发现大肠癌，术前均未接受化疗、放疗等治疗。大肠癌病理学分级按组织分化程度分为高分化腺癌(31例）、中分化腺癌(38例）和低分化腺癌(11例）。所有标本均经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，5μm连续切片。

1.2 主要试剂 即用型鼠抗人P-gp单克隆抗体(产品编号:R-0432，K-0432;克隆号:JSB-1）、SP免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒，上海长岛生物技术有限公司。

1.3 方法 实验操作严格按照SP免疫组化试剂盒说明书进行，以PBS代替一抗作为阴性对照，用已知阳性片作为阳性对照。P-gp定位于细胞膜，阳性染色为均匀一致的棕黄色。每张切片观察5个400倍视野，记录每个视野肿瘤细胞的染色情况，计算阳性细胞百分率，取平均值，根据阳性细胞百分率对表达程度进行评估，＜10%定为阴性(-），＞10%定为阳性(+）[2]。

1.4 统计分析 采用SPSS 11.5统计软件行卡方检验和Fisher精确概率法检验，P＜0.05为差异显著性的标准。

2 结果

80例大肠癌标本，检出P-gp阳性表达35例，阳性率为43.75%。P-gp表达与大肠癌病理特征的关系:大肠癌组织P-gp的表达与分化程度、浸润深度、临床分期和淋巴结转移无关(P＞0.05）;大肠癌组织P-gp的表达与年龄有关，年龄≥60岁者大肠癌组织P-gp的阳性表达率明显低于年龄＜60岁者(P＜0.01）。见附表。

附表 大肠癌组织P-gp表达与大肠癌临床病理特征的关系

3 讨论

早在1970年，国外学者Beilder等最先报道了多药耐药现象。多药耐药是指某些癌细胞株对一种抗肿瘤药物产生抗药性，同时对其它非同类型的药物亦产生抗药性，这种现象被称为多药抗药性，即多药耐药现象[3]。近年的研究证实，MDR1及其产物P-gp过度表达是造成大肠癌化疗失败、影响生存率的重要因素，而化疗又是治疗大肠癌的重要手段，尤其是中晚期大肠癌[3-4]。吴瑾等[5]的研究证实，MDR-1基因的表达与大肠癌化疗疗效呈负相关，MDR-1基因阳性表达者化疗疗效明显低于阴性表达者。因此，通过检测大肠癌组织P-gp的表达情况可以预测患者的化疗敏感性，对P-gp表达阳性的患者可选用某些与MDR非相关的化疗药物，进行有针对性的个体化化疗，制订个体化治疗方案，从而提高大肠癌的化疗敏感性。

本研究发现，大肠癌组织P-gp的阳性表达率为43.75%，与文献报道的38%-85%一致;大肠癌组织P-gp的表达与大肠癌分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移无明显相关性(P＞0.05），与Chen[6]等的研究相符。本研究在分析P-gp的表达与大肠癌临床资料的关系时还发现，年龄≥60岁者大肠癌组织P-gp的阳性表达率明显低于年龄＜60岁者(P＜0.01）。前人的研究成果尚未揭示大肠癌组织P-gp表达与年龄的相关性，考虑原因可能如下:年龄跨度范围小，本研究为随机抽取、比例适中;病例数较少。另外，Chen等[6-7］的大量研究证实，60岁以上P-gp表达率低可能和老年人细胞新陈代谢功能降低、细胞凋亡增多等因素有关。

本研究结果表明，大肠癌患者的化疗应根据P-gp的表达情况，选择合理的个体化化疗方案，避免无效化疗导致的副作用;另外，60岁以上的大肠癌患者化疗可能会更敏感，但也要重视相关副作用。然而，单纯依据P-gp对大肠癌化疗疗效作出早期预测还不够，关键是克服MDR现象，因此对MDR现象产生的机制还需进一步深入研究，以期待联合逆转剂以克服MDR现象，为进一步提高大肠癌化疗疗效提供可能。

[1]Pérez-Tomás R.Multidrug resistence: retrospect and prospects in anti-cancer drug treatment[J].Curr Med Chem,2006,13(16):1859-1876.

[2]魏学明,顾国利,任力,等.多药耐药基因产物在大肠癌组织中的表达及临床意义[J].世界华人消化杂志,2009,17(24):2463-2468.

[3]Jaeger W.Classical resistance mechanisms[J]. Int J Clin Pharmacol Ther,2009,24(1):46-48.

[4]刘丽梅，闫晓初，郭德玉，等.耐药表型GST-π、P-gp及 Topo Ⅱ在大肠癌中的表达及其临床意义 [J].消化外科,2004,3(2):118-121.

[5]吴瑾,白玉贤,崔滨斌.初发及复发转移大肠癌患者外周血MDR-1基因表达的研究[J].临床肿瘤学杂志,2002,7(5): 321-324.

[6]Chen WY,Mao WM,Zhao L,et al.Expression of P-gp,GST-pi and Top,alpha in gastr and colorectal cancers and there clinical significance[J].Zhong Hua Zhong Liu Za Zhi,2005,27(12):738-740.

[7]徐巧远 ,张幸平 .P-gp、GST-Π在大肠癌中的表达及意义[J].重庆医科大学学报,2008,33(3):317-319.

EXPRESSION AND CLINICAL SIGNIFICANCE OF P-GP IN COLORECTAL CARCINOMA

LI Xu-qiang, WANG Hui, ZHENG Ji-ning
(Chengde Medical College, Hebei Chengde 067000, China)

Objective:To investigate the relationships between multidrug resistance gene product P-gp expression and the clinical pathological characteristics in human colorectal carcinoma.Methods:P-gp expression in 80 cases of colorectal carcinoma tissue were determined by SP immunohistochemical staining.Results:The positive rate of P-gp expression in colorectal carcinoma was 43.75% (35/80). The P-gp expression had no relations with differentiation degree, clinical stage, infi ltration depth and lymph node metastasis (P＞0.05); But had relations with age, the positive rate of P-gp expression in colorectal carcinoma of patients≥60-year old was obviously lower than patients under 60 (P＜0.01).Conclusions:The P-gp expression in colorectal carcinoma is fairly high and has relations with age. It is very important to detect P-gp expression when determine individualization treatment.

Colorectal carcinoma; P-gp; Immunohistochemistry; Multidrug resistance gene

R735.3

A

1004-6879(2010）04-0356-02

2010-04-29）

△ 通讯作者