PAPP-A、sICAM-1和 sVCAM-1变化与子痫前期的关系

张军英 韩霞 马京华 牟桂军 赵岩红

子痫前期患者,当其他蛋白未受到影响时,妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)水平已开始升高,它可作为判定胎盘功能、预测疾病发展进程的重要指标[1]。研究证实子痫前期发病的中心环节是广泛的血管内皮受损及功能障碍,内皮细胞激活是子痫前期的重要病理起因,可溶性细胞黏附分子-1(sICAM-1)和可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)在子痫前期患者血清中有浓度升高趋势[2]。为初步探讨子痫前期患者血中 PAPP-A水平与血管内皮细胞活性的相关性,本文对 115例子痫前期患者血清的 PAPP-A、sICAM-1和sVCAM-1水平进行检测。

1 资料与方法

1.1 资料来源 选择 2006年 4月至 2007年 3月在我院门诊进行产前检查的子痫前期患者115例(子痫前期组),入选患者复合《妇产科学》(第 6版)的诊断标准,年龄 23～36岁,孕周34～40周。正常对照组 127例,为随机选取的与子痫前期组同期分娩的正常健康孕妇,年龄 22～35岁,孕周 35～40周。

1.2 方法

1.2.1 采血：取静脉血 5 ml,置于柠檬酸钠的试管内,4℃、1 500 r/m in离心 20min。取上层血清贮于 -20℃待测。

1.2.2 PAPP-A检测：采用河北省计生委科研所提供的 PAPPA检测试剂盒。采用双抗体夹心酶联免疫方法测定PAPP-A蛋白含量,PAPP-A多抗将孕妇血清中的 PAPP-A结合在酶标板上。然后通过辣根过氧化物酶标记的PAPP-A单克隆抗体介导酶促反应对PAPP-A蛋白进行定量。每次实验均设质控及标准曲线,当相关系数(r)达 95%以上实验有效。根据相关软件输入该次试验蛋白标准溶液各点OD值及样品 OD值,进入分析窗口给出样本浓度值。

1.2.3 sICAM-1和 sVCAM-1检测：均采用酶联免疫吸附法(ELISA),试剂盒购于美国 BBL公司。操作严格按说明书进行。过程如下：系列稀释的 sICAM-1和 sVCAM-1标准品和稀释的待测血清 100μl加入 96孔酶标板,再加生物素标记的抗sICAM-1或 sVCAM-1抗体 50μl,室温下孵育 1 h,用洗涤液洗 3次,每孔加 100μl辣根过氧化物酶标记的链霉素亲和素,室温下孵育 20m in,按常规加底物 3,3,5,5-四甲基联苯胺(TMB)显色,于酶标仪上测各孔 A 450 mm值。根据不同浓度的标准血清 A450 mm值作标准曲线,计算待测样本血清 sICAM-1和sVCAM-1浓度。

2 结果

2.1 2组血清中PAPP-A水平比较 子痫前期组 PAPP-A水平明显高于正常对照组(P＜0.05)。见表 1。

表1 2组PAPP-A、sICAM-1和sVCAM-1检测结果比较 ±s

表1 2组PAPP-A、sICAM-1和sVCAM-1检测结果比较 ±s

注：与对照组比较,＊P＜0.05

项目 子痫前期组(n=115) 对照组(n=127)PAPP-A(mU/m l) 181±32＊ 69±5 sICAM-1(ng/ml) 287±11＊ 207±18 sVCAM-1(ng/m l) 523±15＊ 151±11

2.2 2组血清中 sICAM-1、sVCAM-1水平比较 子痫前期组sICAM-1和 sVCAM-1水平明显高于正常对照组(P＜0.05)。见表 1。

2.3 2组血清中 PAPP-A、sICAM-1和sVCAM-1水平相关性子痫前期组血清中PAPP-A水平与sVCAM-1水平呈正相关(r=0.56,P＜0.05)。子痫前期组血清中PAPP-A与 sICAM-1水平、正常对照组血清中PAPP-A水平与 sICAM-1、sVCAM-1水平均无相关性(P＞0.05)。

3 讨论

3.1 正常妊娠及子痫前期时PAPP-A水平变化 PAPP-A是一种大分子糖蛋白,相对分子质量为 750 000。PAPP-A由胎盘合体滋养层和蜕膜产生,属于α2巨球蛋白,具有激活补体,起免疫抑制的作用,孕早期就可以在母体血清中检测到,在正常妊娠过程中随着妊娠进展,母体PAPP-A水平继续升高,当其他妊娠蛋白水平开始下降时,母血PAPP-A水平仍在升高,到妊娠足月时达高峰此时母血 PAPP-A水平是羊水的 10倍,而整个妊娠期间,胎血中测不到PAPP-A,这是因为 PAPP-A相对分子质量大,不能透过胎盘进入血循环,产后2～3 d在母血中即测不出。它是惟一一种在母血中浓度最高,羊水中次之,胎血中不含有的妊娠蛋白。其来源于绒毛周围纤维蛋白,生物功能尚不完全清楚,可能具有免疫抑制、保护胎儿免遭排斥的作用。当自然流产、异位妊娠、宫内胎儿发育迟缓(IUGR)、胎死宫内时,母血PAPP-A呈低值,这与胎盘功能不足使其合成减少有关[3,4]。有研究表明,子痫前期患者血清中PAPP-A水平已开始升高,它可作为判定胎盘功能,预测胎儿高危程度及先兆子痫发展程度的指标[1,5]。本研究结果与此一致。

3.2 子痫前期与血管内皮细胞损伤的相关性 子痫前期患者血管内皮细胞激活与中性粒细胞关系密切并可调节其他内皮细胞黏附因子,介导白细胞与激活内皮之间结合的黏附分子日益引起人们重视。细胞间黏附分子(ICAM)与血管细胞黏附分子(VCAM)均属于免疫球蛋白超家族黏附分子,ICAM介导单核细胞、淋巴细胞及中性粒细胞与激活内皮的黏附;VCAM介导单核细胞、淋巴细胞及嗜伊红性粒细胞与激活内皮的黏附。在循环系统中上述黏附分子的趋化作用诱导白细胞进入炎症部位。

因此,黏附分子的表达反映了内皮细胞的激活,通过测量循环系统中这些黏附分子的可溶性形式,即可反映内皮细胞的活性状态。很多种疾病均可发现循环系统中有内皮细胞黏附分子的浓度升高现象,例如肿瘤、炎症及代谢病(如糖尿病)等。国外关于子痫前期患者血清中黏附分子的研究越来越多,而且结论并不一致[2,6]。在我们的研究中,测量了子痫前期患者血清中sICAM-1及sVCAM-1浓度,结果发现子痫前期患者血清中 sICAM-1及 sVCAM-1均明显高于正常妊娠女性,产生此差别的原因有待于进一步研究。总之,本研究结果进一步支持了内皮激活是子痫前期的中心发病原因的理论,也说明了激活的白细胞在子痫前期组织损伤中的作用,测量孕妇血清中sVCAM-1及sVCAM-1水平对于子痫前期有重要的预测价值。

1 Bersinger NA,Odegard RA.Second-and third-trimester serum levels of placental proteins in preeclampsia and small-for-gestational age pregnancies.Acta Obstet Gynecol Scand,2004,83：37-45.

2 Kim SY,Ryu HM,Yang JH,et al.Maternal serum levels of VCAM-1,ICAM-1 and E-selectin in preeclampsia.J Korean Med Sci,2004,19：688-692.

3 Spencer K,Yu CK,Cowans NJ,et al.Prediction of pregnancy complications by first-trimester maternal serum PAPP-A and free beta-hCG and with second-trimester uterine artery Doppler.Prenat Diagn,2005,25：949-953.

4 Fialova L,Malbohan IM.Pregnancy-associated plasma protein A(PAPPA)：theoretical and clinical aspects.Bratisl Lek Listy,2002,103：194-205.

5 Bersinger NA,Groome N,Muttukrishna S.Pregnancy-associated and placental proteins in the placental tissue of normal pregnant women and patients with preeclampsia at term.Eur J Endocrinol,2002,147：785-793.

6 Chaiworapongsa T,Romero R,Yoshimatsu J,et al.Soluble adhesionmolecule profile in normal pregnancy and pre-eclampsia.JMatern Fetal Neonatal Med,2002,12：19-27.