仔猪PRRS母源抗体消长规律的测定

陈军义 王开功 周碧君 方 英 文 明 岳 筠 江昭华 程振涛 张双祥

为消除或降低母源抗体对仔猪猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗免疫的抑制，同时防止猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒在免疫空白期对仔猪的侵袭，试验通过酶联免疫吸附试验(ELISA)分别对产前1个月免疫猪繁殖与呼吸系统综合征灭活疫苗(NVDC-JXAl)的母猪和曾感染过猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的母猪所产仔猪的母源抗体进行监视，分析其消长规律，并在此基础上确定了仔猪猪繁殖与呼吸障碍综合征的首免日龄，从而为其他猪场提供参考依据。

1.材料与方法

1．1 材料

1.1.1 试验动物

在产前1个月免疫猪繁殖与呼吸系统综合征灭活疫苗(NVDC-JXAl)的4头母猪所产的40头仔猪，贵州大学种猪场提供；曾感染过猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒猪场的6头母猪所产的58头仔猪，贵阳地区某种猪场提供。

1.1.2 试剂

猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒(生产批号为081010)，购自武汉科前动物生物制品有限责任公司。

1.1.3 疫苗

猪繁殖与呼吸系统综合征灭活疫苗(NVDC-JXA1株)(20mL／瓶)，中牧实业股份有限公司成都药械厂生产。

1．2 方法

1.2.1 免疫

无猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒感染猪场的妊娠母猪在产前1个月肌肉注射猪繁殖与呼吸系统综合征灭活疫苗(NVDC-JXAl株)，4mL／头。

1.2.2 血清样品的采集

在4头免疫母猪所产的40头仔猪中，分别于5、10、15、20、30日龄随机选择20头仔猪采集血液，离心制备血清；在曾感染过猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒猪场的6头母猪所产的JJ头仔猪中，分别在／0～14日龄、15～19日龄,20～24日龄、25～29日龄、30～34日龄、35～39日龄随机选择25～32头仔猪采集血液，离心制备血清，所有血清均保存在-20℃冰箱中。

1.2.3 猪繁殖与呼吸障碍综合征血清抗体的检测

参照检测试剂盒说明书进行。试验成立的条件为阳性对照孔平均OD630值≥1.0，阴性对照孔平均OD630值＜0.3。结果判定：样品OD630值大于0.42为阳性，在0.38～0.42间为可疑，小于0.38为阴性。

2.结果与分析

2.1 免疫猪繁殖与呼吸障碍综合征灭活疫苗母猪所产仔猪母源抗体消长规律

采集不同日龄(5～30日龄)仔猪的血清，应用猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒对各阶段的仔猪血清进行猪繁殖与呼吸障碍综合征抗体水平监测，结果表明，免疫猪繁殖与呼吸障碍综合征灭活疫苗母猪所产仔猪的母源抗体在5日龄抗体阳性率最高(50.0%)，随着日龄的增加猪繁殖与呼吸障碍综合征抗体阳性水平逐渐降低，至30日龄时全部仔猪的母源抗体检测结果为阴性。母源抗体水平总体不高，平均抗体阳性率仅为20.0%(20／100)。

2.2 曾感染猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒猪场的母猪所产仔猪母源抗体消长规律

采集不同日龄(10～39日龄)仔猪的血清，应用猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒对各阶段仔猪的血清进行猪繁殖与呼吸障碍综合征抗体水平监测，结果表明，曾感染过猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒猪场的母猪所产仔猪的母源抗体从10～14日龄开始逐渐上升，至20～24日龄抗体阳性水平达到最高(51.9%)，此后逐渐下降，到35～39日龄抗体阳性率降为15.6%。各日龄段的母源抗体水平均比免疫母猪所产仔猪的母源抗体水平高。

3.讨论

(1)当前，预防猪繁殖与呼吸障碍综合征的发生关键在于对猪群进行猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗的合理免疫，而仔猪首免日龄的确定则是疫苗免疫的重中之重。试验通过ELISA方法检测仔猪血清样品的猪繁殖与呼吸障碍综合征抗体，结果表明，未感染猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒猪场的疫苗免疫母猪所产仔猪的母源抗体水平在5日龄时最高[50.0%(10／20)]，此后不断下降，在30日龄下降到0(0／20)；而曾感染过猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒猪场仔猪的母源抗体水平在20～24日龄达最高，为51.9%(14／27)，此后逐渐下降，至35～39日龄下降为15.6%(5／32)。为使母源抗体既能保证仔猪在免疫空白期抵御猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的感染，同时又能避免或降低母源抗体对仔猪猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗免疫的干扰，不同类型猪场应根据实际情况采取不同的首免日龄。根据试验结果，确定猪繁殖与呼吸系统综合征灭活疫苗(NVDC-JXAl株)免疫母猪所产仔猪的首免日龄为17～20日龄，而感染过猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒猪场的母猪所产仔猪的首免日龄为30～34日龄。

(2)曾感染过猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒猪场的母猪所产仔猪的母源抗体阳性水平在10～24日龄逐渐升高，这与母源抗体在仔猪体内抗体水平缓慢下降的自然消长规律有些出入。笔者认为有以下原因：首先，感染猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的母猪所产的部分仔猪在某些情况下血清中不能检测出阳性母源抗体。其次，采集血液时，在仔猪群中随机选择25～32头，使某一阶段可能选择的含阳性母源抗体的仔猪多。

(3)有些猪场由于曾经感染过猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒或是引进的外来猪种感染过该病毒，同时该病毒自身具有持续感染和隐性感染的特性，会对猪场的仔猪群构成潜在的威胁。据报道，免疫母猪所产的仔猪所获得的猪繁殖与呼吸障碍综合征母源抗体对强毒感染能够产生一定的保护力。因此，不论猪场是否发生过猪繁殖与呼吸障碍综合征，只要猪场位于猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒易感区域内，在母猪临产前均应加强免疫1次猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗，从而使子宫内的胎儿获得被动免疫，并使仔猪在吮食母乳时获得足够的母源抗体，使仔猪在首免前有一个保护其免受该病毒侵袭的“缓冲时间带”。