玉环柚脱毒苗关键技术

徐森富，汪恩锋，王普形，柯 胜

(1.台州科技职业学院，浙江台州 318020;2.浙江省玉环县绿野农业科技有限公司，浙江 玉环 317600)

玉环柚原名楚门文旦、文旦，产地浙江玉环，是中国四大名柚之首，连续8次夺得全国柚类评比冠军，是浙江省的特色优势农产品，也是玉环县对外宣传的一张金名片。同时玉环柚营养价值高，全身是宝，果皮可制蜜饯、果皮糖和提取芳香油，果中富含柠檬苦素和类黄酮等多种活性成分，柚中黄酮含量高纯度大极具开发竞争力。“九五”时期玉环县有玉环柚0.305万 hm2，产量6万 t，从业人员3万余人，产值超亿元，占农业总收入的1/3以上。2006年由于受柑橘黄龙病的影响，玉环县砍了大批文旦树，文旦种植面积下降到0.183万hm2，而真正有一定产量的只有0.1万 hm2左右，文旦产量也降到1.5万 t。玉环柚种植面积逐年减少，文旦贩销、文旦饮品、文旦深加工等相关产业面临严重威胁，部分农民收入明显减少，形势十分严峻。据统计目前全县有效结果面积已不足667 hm2，总产量只有近 1万 t，一些产区此病仍以15%～20%速度蔓延，玉环柚产业面临生存危机，鉴于黄龙病感染力强，老区难以继续种植，给玉环柚的发展带来了威胁，故进行了玉环柚脱毒苗关键技术的探讨。

1 选址

选址要符合浙江省有关特色农产品种子种苗工程发展规划。繁殖区为黄龙病隔离区，利于脱毒苗安全繁育。我们选在产地生态环境条件良好，远离污染源，并有可持续生产能力的农保区作为实施区，也是玉环柚唯一柑橘黄龙病隔离区，水、电、路配套，园路与76省道相通，交通方便。

2 危险性病害脱除与病毒检测

首先对玉环柚优选良种进行脱毒，采用茎尖嫁接、试管胚胎培育等脱毒手段培育的玉环柚优选良种脱毒纯种，经过指示植物与系统检测手段检测后，确认为无衰退病、裂皮病、碎叶病与黄龙病等病毒后，置于钢架大棚40目网室内培植，3道以上隔离门、专人负责，并经数年培育，每年秋冬多次用OTBIA检测，确认该种苗培育安全。

3 大棚网室隔离技术

脱毒苗快繁选址远离玉环柚大田产区2～3 km，传毒昆虫较难迁飞，有利育苗安全。

钢架大棚牢固，垮度5.5 m，抗风抗压能力强。

育苗场地区块隔离，网室设计中设立3道缓冲门隔离，避免传毒昆虫潜入育苗室。3道缓冲门仅能进入育苗室外通道，经第4道门才可进入采穗圃、育苗室、练苗室，并分别用40目避虫网隔离，母本园经过第5道门，层层隔离，在一定程度上提高了脱毒苗繁育过程中的安全性。

制订脱毒苗安全生产操作技术规程。生产操作人员经清洁消毒后方可进入避虫网室，未清洁消毒者与闲人一律免入。用于生产的基质要经溴甲烷灭菌消毒，并在安全期内运入，病虫活动期不得开门运入。种子与植物活体 (树枝、草把、蔬菜及瓜苗)等一律不得带入避虫网室。刀、剪等工具用前要经1%次氯酸消毒，或高温沸水中烧煮5～10 min。专业工具专项生产，锄头等工具一律采用5%漂白粉液处理3 min后使用。遇台风雨，如有避虫网破损，要立即更换新网，待风静雨止后立即全面喷药，药剂选用2%菌克毒克200倍，加20%甲氰菊酯1 000倍或加48%乐斯本800倍，每7 d 1次，连续2次。

4 建立母本园和采穗圃

优选良种脱毒苗工厂化繁育工作的前提是建立上规模的良种母本园。在网室大棚进行母本园和采穗圃的分离，并对母本园进行隔离，同时对采穗圃首批采自非黄龙病区作砧木用的香抛种子经过热处理消毒后，播于网室内预先以溴甲烷消灭病菌后的基质中，并当年秋季经OTBIA检测确认为无危险性病害砧木后，从玉环柚脱毒1号与3号母本上分别剪取接穗，分株、分区嫁接，培育玉环柚一代纯种。

5 砧木种子采集与热处理

培育无病毒砧木苗的种子必须来自非黄龙病区，用的香抛种子选于浙西健康母树，至12月中下旬果实充分成熟后采摘，采后后熟10～15 d取出种子，先在清水中漂洗种皮上果胶、酸液后置0.1%高锰酸钾液清洗3～5 min，再用清水漂洗后荫干至种皮发白，立即热处理后摧芽播种，经热处理后的种子发芽率高达95%以上，根系发达，发根量几乎是常规苗的50倍，也是脱毒苗表现速生、早产的保证。

6 基质灭菌消毒

溴甲烷是一种常用的熏蒸杀虫剂，具有杀虫、杀线虫、杀螨灭菌、除草、灭鼠、防病等多种功效，应用极广泛。脱毒苗培育与土壤环境灭菌消毒少不了溴甲烷，但它又是一种高毒化学品，渗透性极强，要严格按照溴甲烷应用技术操作规程进行。

7 网室小气候调节

玉环柚为芸香科柑橘属柚类果树，该树种性喜温湿环境，又是一种半耐荫果树，在网室内栽培育苗，冬季盖膜，平均气温达11～13℃，加上种子经热处理刺激，根系生长旺盛，表现速生。入春后膜内气温回升快，春分前后午间膜内气温常超过35℃，过高气温又在一定程度上抑制了脱毒苗的安全生产，因此，网内加盖黑色或银灰色遮阳网(遮光率达50% ～60%)。4月至10月上旬遮光，可有效控制高温对脱毒苗的危害。3月下旬开始分步揭膜，先揭顶膜，至4月下旬再揭围膜，结合午间遮阳网的应用，保持网室内气温稳定在20～30℃，十分有利脱毒苗快速生长对温度的需求。至10月下旬气温逐渐下降至10℃左右时，要及时围膜保温，防止脱毒苗过早停止生长。至11月下旬，气温降至5～8℃时要适时盖上网室顶膜保温防冻。脱毒苗基质含水量状况不仅影响着肥液分解供苗木吸收，而且基质中足够的含水量，高温时因水分蒸发带走热量，可维护网室内正常的气温，防止高温伤苗;为此，夏季高温采用喷水散热法，结合遮阳网的应用，创造网室内良好的小气候环境条件，是脱毒苗繁育中一项必不可少技术措施。冬季保持室内基质60%～80%的含水量，又可维护脱毒苗正常生理活动对水分和肥液的需求，稳定网室内正常气温，创造良好的小气候环境条件，使水与光热的调节同步进行。

8 脱毒苗肥水调控

玉环柚脱毒苗培育由于基质疏松得体，保肥持水力强，网室内气温相对稳定，成为幼苗到嫁接大苗快速生长的重要条件，因此基质的干湿度大小成为控制脱毒苗生长的主要因素。幼苗定值后浇施0.3%尿素水溶液定根，不仅有利成活，供给速效肥可防止缓苗促进生长。此后每隔15 d追施0.3%～0.5%复合肥、尿素水溶液，以薄肥勤施，既保持基质60%～80%的含水量，促进基质中的有机养分水解供给种苗吸收，有利于快速生长。进入盛夏高温季节，充分供水，以增加蒸发量散热，可维持室内脱毒苗生长适宜温度，避免苗木因高温造成危害。9－10月份停止施肥，适当控水，可防止肥水过多而抽发冬梢造成空耗养份降低苗木抗寒力。冬季充分供给肥水，又缩短了脱毒苗的半休眠状态，延长生长期，并充分吸收肥水，使早春提前进入生长活动期，对提高苗木质量，缩短种苗扶育周期，提前进入树冠造型搭架，促进早产等均具现实意义。

9 生产流程

良种种子热处理→玉环柚良种→茎尖嫁接(砧木种子热处理)→嫁接苗→生物分子检测→无病毒苗木→供大田种植、建立无病毒柚园新区。每一生产流程都要严格遵循规程，确保任何环节无病毒侵入的机会。

10 小结和讨论

综观国际柑橘生产，先进国家均对柑橘 (含柚类)病毒病十分重视，美国、西班牙、土耳其、南非、以色列均已推行“株系保护计划”，并实行苗木注册制度，采取法规保护从而使生产上了新台阶。我国的广东、广西、福建等省原是黄龙病区，由于重视病毒病控制工作，加大了无毒化种苗生产管理力度，从而使病毒病得到了有效控制，生产取得快速发展。因此控制病毒病是促进生产发展的重要措施，特别是无病毒苗的培育尤为关键。玉环县政府近几年连续出台政策，同时确定了玉环柚的发展目标，那就是近期采取玉环柚种植面积稳定在0.2万 hm2左右，其中重点基地面积确保0.1万hm2，产量确保2万t;新区发展和老区改造0.1万hm2，将在现有一定规模的苔山塘、楚北塘、红沙塘等建立10个玉环柚重点基地。近期需要大量的无病毒苗木，按600株·hm－2计，至少需80万株无病毒苗，市场前景广阔，经济和社会效益巨大，开展对脱毒苗产业化关键技术研究是重在发挥品种土地等资源优势，保护玉环柚种质资源，促进特色产业可持续发展必然选择，同时为同类柑橘黄龙病的防治提供较好的探索与示范。

［1］裘维蕃.植物病理学 ［ M］.北京:科学出版社，1985.

［2］张天苗.柑橘病毒病 ［M］.北京:中国农业出版社，2004.