柚皮苷亲水凝胶骨架片制备及体外释放的研究

张 涵， 索绪斌， 宋雅芳， 唐立海

(1.广州中医药大学脾胃研究所，广东广州510405;2.广东药学院中药开发研究所，广东广州510006)

柚皮苷是柚中主要的黄烷酮，其全称为柚皮素－7－O－新橙皮糖苷(其结构式见图1)，是一种双氢黄酮类化合物［1，2］，主要存在于芸香科植物葡萄柚、橘、橙的果皮和果肉中，也是骨碎补、枳实、枳壳、化橘红等中药的主要有效成分之一［3］。研究表明，柚皮苷具有降低血浆中总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇(动脉粥样硬化的主要致病因素)水平的作用［4］。除此而外，还具有镇静、抗氧化、抗肿瘤、抗真菌、抗动脉粥样硬化、解痉、镇痛、调节血糖等药理作用［5］。柚皮苷为水溶性药物，制成常规制剂，半衰期短，血药浓度波动大，生物利用度相对较低［6］，将柚皮苷制成凝胶骨架片可以延长药物释放时间，降低毒副作用，提高患者的顺应性。本实验欲将柚皮苷制成能持续12 h释放药物的凝胶骨架片，对其制备方法及其体外释放度进行了研究，为该药物缓释制剂的研究提供参考。

图1 柚皮苷的结构式Fig.1 Structure of naringin

1 仪器与材料

BS124S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);Agilent 1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);ZRS－8G智能溶出试验仪(天津大学无线电厂);国家标准检验筛(浙江上虞市道墟五四仪器沙筛厂);ZP17E型旋转压片机(上海天和制药机械有限公司)。

柚皮苷(陕西浩洋生物科技有限公司);色谱纯甲醇(江苏汉邦科技有限公司);羟丙甲基纤维素(HPMC)K4M、K15M、K100M(上海卡乐康包衣技术有限公司);甘露醇(天津市福晨化学试剂厂);蔗糖(天津市福晨化学试剂厂);聚乙二醇(PEG)10000(国药集团化学试剂有限公司);PEG 400(汕头市光华化学厂);PEG 4000(广东光华化学厂)，其余试剂为市售分析纯。

2 方法

2.1 色谱条件

色谱柱:Chromasil ODS柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇－冰醋酸－水(35 ∶4 ∶61)，流速为1 mL/min;检测波长283 nm;柱温:室温;流速:1.0 mL/min;进样量:20 μL。

2.2 标准曲线制备

精密称取柚皮苷对照品约10 mg，置于10 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，作为贮备液。取贮备液配制成不同浓度的对照品溶液，进样检测，记录峰面积，以峰面积(Y)对药物浓度(X，μg/mL)进行线性回归，得回归方程为:Y =18 234.7X－1 051.6，R=0.999 6。在 4.7 ～940 μg/mL 范围内线性关系良好。

2.3 凝胶骨架片的制备

称取柚皮苷适量，加入辅料(乳糖、甘露醇、蔗糖及 PEG 等 )，加入 HPMC(K4M、K15M 或K100M)，混匀。加50%乙醇适量，制软材，挤过12目筛制颗粒，40℃干燥，过筛，加入1%润滑剂(硬脂酸镁)，混匀，压片，片重约0.5 g。采取单因素考察辅料及HPMC类型及含量(4%、7%或10%)对柚皮苷亲水凝胶骨架片缓释性能的影响。

2.4 体外释放度的测定

采用《中华人民共和国药典》2005年版第二部附录XC第三法即小杯桨法。取本品，以水250 mL为释放介质，温度37℃，转速为100 r/min，依法操作，分别于第 0、1、2、4、6、8、10、12、15、18、24 h 时，取样5 mL，滤过，同时补充5 mL介质，取20 μL续滤液按上述HPLC条件进样检测。

2.5 体外释放模型

将柚皮苷亲水凝胶骨架片(由PEG4000、乳糖及7%HPMC K15M组成)的药物体外溶出曲线分别进行零级模型、一级模型、Higuchi模型和 Ritger－Pappas模型拟合。根据拟合曲线的相关性，以R值最大为优。判断出柚皮苷亲水凝胶骨架片的最佳体外释放模型。根据Ritger－Pappas模型拟合的n值大小判断该凝胶骨架片的药物释放机制。

3 结果与讨论

3.1 PEG对凝胶骨架片缓释性能的影响

辅料PEG类型对药物释放的影响见图2，从图中可看出，药物溶出速度:PEG 4000＞PEG 400＞PEG 10000。含PEG 400骨架片在前2 h的药物释放比较缓慢，2 h后的药物释放比较均匀且释放速度加快，17 h后药物基本释放完全;含PEG 4000骨架片的药物在体外释放较为均匀，15 h后药物基本释放完全;含PEG 10000骨架片的药物在体外并非均匀释放，5～10 h时的药物释放速度较快，21 h后药物基本释放完全。缓释凝胶骨架片中加入PEG主要是为了增加骨架片中释药孔道，调整药物的释放速度，根据前面试验结果，我们选择PEG 4000作为凝胶骨架片的释药速度调节剂。

图2 PEG的类型对骨架片药物溶出的影响Fig.2 Effect of PEG type on the release of drug from the hydrogel matrix tablets

3.2 填充剂对凝胶骨架片缓释性能的影响

填充剂(乳糖、蔗糖及甘露醇)对骨架片中药物的释放见图3，从图中可以看出，在0～3 h之间，三者的溶出速度相似，在3～19 h之间，以甘露醇为填充剂的骨架片药物溶出速率较快，以蔗糖与乳糖为填充剂的骨架片药物释放速度相近;分析其原因可能是甘露醇的溶解及结晶性都强于后两者，骨架片中甘露醇的快速溶解导致了药物的快速释放;但是从片剂的成型而言，乳糖的片剂成型性要优于甘露醇和蔗糖，因此我们选择乳糖作为骨架片的填充剂。

图3 填充剂(乳糖、蔗糖及甘露醇)对骨架片药物溶出的影响Fig.3 Effect of diluent agents(lactose，sucrose and mannital)on the release of drug from the hydrogel matrix tablets

3.3 HPMC类型对凝胶骨架片缓释性能的影响

HPMC类型对药物释放的影响见图4，从图中可以看出，不同类型HPMC对凝胶骨架片的药物溶出速度不一样，其药物溶出速率顺序为:HPMC K4M＞HPMC K15M＞HPMC K100M。以HPMC K4M制成的骨架片，9 h内药物基本释放完全;以HPMC K15M和HPMC K100M制成的骨架片，其释药时间分别为11 h和19 h。其原因在于 HPMC K4M、HPMC K15M及HPMC K100M具有不同的分子量和分子长度，表现于外是他们具有不同的黏度，分子量越大，黏度越大，药物释放时间越长，因此可以根据实际需要选择HPMC，以制备释放速度合适的缓释凝胶骨架片。根据上述结果及实际需要，我们选择HPMC K15M作为片剂的凝胶骨架。

图4 HPMC类型(K100M、K15M及K4M)对骨架片药物溶出的影响Fig.4 Effect of HPMC(K100M、K15M and K4M)type on the release of drug from the hydrogel matrix tablets

3.4 HPMC K15M含量对凝胶骨架片缓释性能的影响

HPMC K15M含量对骨架片药物溶出的影响见图5，从图中可看出骨架片中HPMC含量，影响骨架片药物的溶出，其药物溶出速率大小为:4% ＞7%＞10%，随着HPMC含量的加大，药物的溶出速率随之减慢。HPMC K15M含量为4%的骨架片释药时间为7 h;骨架片中HPMC K15M含量增加到7%，其释药时间延长至13 h，增加到10%时，其释药时间则延长至17 h。从这里可以看出，可以通过调整骨架片中HPMC含量，来调整药物的释放速度。

图5 HPMC K15M含量对骨架片药物溶出的影响Fig.5 Effect of the content of HPMC K15 on the release of drug from the hydrogel matrix tablets

3.5 体外释放曲线拟合结果

将凝胶骨架片0.5～11 h的体外释放结果进行模型拟合，拟合结果见表1。由表中模型拟合结果可知，零级模型、Higuchi模型和 Ritger－Pappas模型的释放度与时间均有较好的相关性，以R值最大为优。由表1结果可知该凝胶骨架片中药物以零级释放。Ritger－Pappas模型释放参数 n=0.964 37＞0.89，说明柚皮苷亲水凝胶骨架片中柚皮苷的释放以溶蚀为主。

表1 凝胶骨架片释放模型拟合结果Tab.1 Results of model fitting of the drug release from the hydrogel matrix tablets

4 结论

采取体外释放，单因素考察了辅料(乳糖、蔗糖、甘露醇和 PEG)，HPMC类型(K4M、K15M 和K100M)及其含量(4%、7%和10%)对柚皮苷亲水凝胶骨架片缓释性能的影响。制备的骨架片能持续缓慢释放药物。本实验对柚皮苷亲水凝胶骨架片的体外释放进行模型拟合，其药物释放为零级，拟合方程为 Mt/M∞=0.084 7t－0.003 6，R=0.998 299。Ritger－Pappas模型拟合中，其释放参数n=0.964 37＞0.89，结果表明柚皮苷亲水凝胶骨架片中柚皮苷的释放机制以溶蚀为主。

［1］贾冬英，姚 开，谭 敏，等.柚果皮中生理活性成分研究进展［J］. 食品与发酵工业，2001，27(11):74－78.

［2］龚盛昭，陈秋基，曾海宇.柚皮中有效成分综合利用的途径［J］. 广州食品工业科技，2003，19(3):81－82，96.

［3］苏 玲，刘启德.柚皮苷生物活性和药代动力学研究新进展［J］. 中国医药经济与管理，2008，2(10):74－80.

［4］黄凤香，林家逊.柚皮苷药物动力学及生物活性研究新进展［J］. 华夏医学，2009，22(4):777－779.

［5］杨宏亮，田 衍，李沛波，等.柚皮苷及柚皮素的生物活性研究［J］. 中药材，2007，30(6):752－754.

［6］范碧亭，张兆旺.中药药剂学［M］，上海:上海科技出版社，1997:491－521.