冻融胚胎移植周期患者年龄及移植胚胎个数与妊娠结局的关系

张印峰 徐慧颖 张云山 鲁振宇 徐凤琴

冻融胚胎移植周期患者年龄及移植胚胎个数与妊娠结局的关系

张印峰 徐慧颖 张云山 鲁振宇 徐凤琴

目的：探讨冻融胚胎移植周期患者的年龄、移植胚胎个数对妊娠结局的影响。方法：解冻胚胎移植周期中可供移植的1 052个周期按年龄分为≤34岁为A组、35～39岁为B组、≥40岁为C组，按移植胚胎个数分为单胚胎移植为D组、2个胚胎移植为E组、3个胚胎移植为F组，分析年龄、移植胚胎个数与冷冻胚胎解冻移植（FET）结局的关系。结果：A组、B组、C组间着床率差异有统计学意义（P＜0.01）。A组与B组妊娠率差异无统计学意义（P＞0.05），但均高于C组（P＜0.05）。A组与B组流产率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。D组妊娠率与E、F组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。E组多胎率与F组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。E组减胎率与F组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。D、E、F组间宫外孕率差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：≥40岁患者妊娠率显著降低。宫外孕、流产与移植胚胎个数无关。冻融周期移植2个胚胎是合理的选择。

胚胎移植 低温保存 妊娠，多胎 妊娠，异位

随着临床超排卵、实验室技术的不断改进，冻融胚胎移植技术的不断改善，减少每次移植胚胎个数，增加累计移植次数，并提高累积妊娠率已成为可能，也是将来不断努力的方向。笔者对本中心解冻周期非选择性胚胎移植进行回顾性分析，探讨冻融胚胎移植的妊娠结局与年龄、移植胚胎数目的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2005年1月—2008年 12月在本中心进行解冻胚胎移植的患者1 156例，平均年龄（35.1±4.2）岁。可供移植1 052个周期。其中自然周期982个，激素替代周期46个，促排卵周期24个。取卵周期中体外受精（IVF）周期734个，单精子卵胞浆内显微注射技术（ICSI）周期239个,IVF+ICSI周期79个。按年龄分为≤34岁为A组、35～39岁为B组、≥40岁为C组，将相同1 052个周期按移植胚胎个数分为单胚胎移植组（D组）、2个胚胎移植组（E组）、3个胚胎移植组（F组），分别分析年龄、移植胚胎个数与FET结局的关系。

1.2胚胎冷冻、复苏方法 采用程序化慢速冷冻法，Vitrolife胚胎冷冻包（FREEZE-KIT1TM）。解冻采用Vitrolife胚胎解冻液包（THAW-KIT1TM）。

1.3解冻胚胎移植时机的选择 自然周期：月经周期规则，基础体温双相明显患者，在月经中期检测血促黄体激素（LH）峰。LH峰出现第3天或排卵后第2天行冷冻胚胎解冻移植（FET），移植后用黄体酮（P）或人绒毛膜促性腺激素（hCG）支持黄体。促排周期：适用于月经周期规则无排卵患者，采用克罗米芬、来曲唑或卵泡刺激素诱发排卵，通过监测血LH峰、排卵后第2天移植。激素替代周期：适用于月经周期不规律患者，应用戊酸雌二醇（补佳乐）、黄体酮注射液，于肌内注射黄体酮第6天后进行移植，移植后应用黄体酮进行黄体支持。

1.4妊娠判定方法 解冻移植后14 d检测尿和（或）血hCG，>25 μg/L为生化妊娠，移植后28 d B超检查宫腔可见妊娠囊及胎心搏动为临床妊娠。

1.5统计学处理 采用SPSS 16.0软件进行统计学分析，计量资料用±s表示，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同年龄各临床指标比较 3组患者着床率、妊娠率和流产率比较差异有统计学意义（P＜0.05），B组与C组、A组与C组妊娠率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。A组与B组、A组与C组流产率比较差异有统计学意义（P＜0.01）。3组间多胎妊娠率、减胎率、宫外孕率差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 冻融周期不同年龄组与妊娠结局的比较

2.2冻融周期移植胚胎个数与妊娠结局的关系 D组与E组、与F组妊娠率差异有统计学意义（P＜0.01）。E组多胎率、减胎率显著低于F组，差异有统计学意义（P＜0.01）。宫外孕率、流产率各组间差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 移植胚胎个数与妊娠结局的关系

3 讨论

Jansen[1]报道行IVF治疗的患者，生育力下降始于34岁，保持较高妊娠率高峰的年龄是39岁。吴敬之等[2]研究显示≤35岁各组间妊娠率差异无统计学意义。冻融周期40岁以上着床率显著降低，增加移植胚胎个数亦没有改善[3]。对于40岁以上患者，卵子的非整倍体发生率增高、线粒体数量减少、子宫内膜形态和功能改变导致的子宫容受性降低[4]。本研究显示，C组妊娠率低于A、B组，说明冻融周期≥40岁者妊娠能力明显下降。

Jansen[1]研究发现IVF流产率随年龄的增长而增长，取卵周期的流产率低于冻融周期。Verlinsky等[5]报道胚胎质量是评估流产的重要因素,染色体非整倍性、染色体易位等异常是早期流产的主要原因。行IVF/ICSI/FET治疗的肥胖患者（BMI≥27kg/m2）或体质量过轻（BMI≤20 kg/m2）流产的风险增加，尤其是行激素替代的冻融周期患者有更高的流产率[6]。本研究发现C组FET流产率高于A、B组，B组高于A组，可以看出年龄是造成流产的重要因素。

在IVF-ET过程中，为提高妊娠率1个治疗周期植入较多的胚胎，由此导致多胎妊娠发生率为自然妊娠（3%）的10倍，甚至10倍以上，剖宫产率、新生儿患病率和病死率也随即增加[7]。IVF-ET中多胎减为双胎与IVF-ET中直接双胎妊娠比较，早期流产率增加。可能的原因：（1）机械破坏导致的非特异炎症、死亡胚胎及其孕囊物质导致局部血管微血栓的形成，继发流产发生。（2）穿刺对保留胎儿胚胎附着处的损伤导致胎盘后出血。（3）不恰当地注射生理盐水导致羊膜囊对胎盘的压迫、生理盐水渗出，影响保留胎儿血液供应而流产[8]。（4）减胎造成的心理压力。笔者认为，为减少多胎、减胎、流产的发生冻融周期移植2个胚胎为宜。

[1] Jansen RP.The effect of female age on the likelihood of a live birth from one in-vitro fertilisation treatment[J].Med J Aust,2003,178(6):258-61.

[2] 吴敬之，史哲，易艳红，等.194个冻融胚胎移植周期临床结局分析[J].实用医学杂志，2003，19（16）：618-619.

[3] Wang JX,Yap YY,Mathews CD.Frozen-thawed embryo transfer:influence of clinical factors on implantatin rate and risk of mulitiple conception[J].Human Reprod,2001,16(11):2316-1319.

[4] 庄广伦.现代辅助生殖技术[M].北京：人民卫生出版社.2005：156-166.

[5] Verlinsky Y,Conhen J,Munne S,et al.Over a decade of preimplantation genetic diagnosis experience-a multicenter report[J].Fetil Steril,2004,82（2）:292-294.

[6] Veleva1 Z,Tiitinen A,Vilska S,et al.High and low BMI increase the risk of miscarriage after IVF/ICSI and FET[J].Human Reproduction,2008,23(4):878-884.

[7] 朱依敏,叶英辉,黄荷凤.移植优质胚胎及减少移植胚胎数量对体外受精一胚胎移植结局的影响 [J].中华妇产科杂志，2004，39（8）：559-560.

[8] 裴莉，叶虹，曾品鸿，等.体外受精一胚胎移植中多胎减胎后双胎妊娠结局的比较[J].重庆医学，2009，38（16）：2007-2010.

Relationship between Pregnancy Outcome and Maternal Age and Number of Transferred Embryos in Infertile Patients Undergoing FET

ZHANG Yinfeng,XU Huiying,ZHANG Yunshan，LU Zhenyu,XU Fengqin

Tianjin Medical University,Tianjin 300070,China

Objective:To investigate the influence of maternal age and the number of transferred embryos on pregnancy outcomes in infertile patients undergoing frozen thawed embryo transfer（FET).Methods:A retrospective analysis was performed in our center on the clinical data of 1 052 thawing cases from January 2004 to December 2008.There were 6 groups in the study including A group(≤34 year-old),B group(35-39 year-old),C group(≥40 year-old),D group(single embryo transfer),E group(2-embryo transfer)and F group(3-embryo transfer).Results:The implantation rate was significantly lower in A group compared with that of B group(P＜0.05),but higher than that of C group (P<0.05).The abortion rate was significantly lower in A group compared with that of B group(P＜0.05).There were significant differences in multiple pregnancy rate and fetal reduction rate between E group and F group （P＜0.05).There was no difference in ectopic pregnancy rate between groups(P＞0.05).Conclusion:The implantation rate decreased significantly in patients≥40 year-old.The number of transferred embryos was not correlated with ectopic pregnancy and abortion rate.Transplantation of 2 call embryos is the reasonable choice.

embryo transfer cryopreservation pregnancy,multiple pregnancy,ectopic

300070 天津医科大学（张印峰）；天津市中心妇产科医院生殖医学中心（徐慧颖，张云山，鲁振宇，徐凤琴）

（2009－12－25收稿 2010－03－17修回）

（本文编辑 魏杰）

短篇与病例报告