基质效应对钾、钠、氯比色法测定结果的影响
2009-11-29熊传银朱秋玲潘小平
熊传银,朱秋玲,潘小平
(广州市花都区人民医院检验科,广东 广州 510800)
基质效应对钾、钠、氯比色法测定结果的影响
熊传银,朱秋玲,潘小平
(广州市花都区人民医院检验科,广东 广州 510800)
目的:观察基质效应对钾、钠、氯比色测定结果的影响。方法:用不同基质的校准品分别对钾、钠、氯进行校准,再对同一批临床标本分别进行测定,对检测结果进行差异显著性分析及相关性分析。结果:使用人血清基质的校准品校准和水溶液校准品校准后和钾、钠、氯检测结果具有统计学差异(Plt;0.01);水溶液校准品校准后的检测结果显著高于血清基质校准品校准后的检测结果,但两种校准方法结果相关性较好。结论:用不同基质的校准品校准仪器,测定电解质钾、钠、氯具有统计学差异,存在非常明显的基质效应。
比色法;钾;钠;氯;基质效应
目前临床实验室测定电解质的方法有离子选择电极法、火焰光度法、电量法和酶法等[1],其中以电极法应用最为广泛。但目前与全自动生化仪配套的电极价格昂贵,而国产电极法电解质分析仪多未能与全自动生化仪进行模块连接,大大降低了检测效率,并且国产电极性能欠佳,因此在全自动生化仪上使用比色法测定电解质项目已被越来越多的实验室所接受。钾、钠的酶法测定是一类发展时间较短的新检测方法,因其自动化程度高、检测线性宽、结果准确度高,因此近年来被临床实验室广泛应用。但比色法检测更易受到基质效应的影响,导致检测结果出现恒定误差。本文使用不同基质的校准品对K+、Na+、Cl-校准,然后检测同一批临床标本,通过观察检测结果了解该方法受到基质效应影响的程度,现报道如下。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1仪器与试剂 日本日立7600-020全自动生化分析仪。英国朗道(RANDOX)酶法检测钾、钠离子试剂盒,批号分别为:钾(PT7168)124426,钠(NA7167)134424;英国朗道(RANDOX)化学比色法测定氯离子试剂盒,批号为:氯(CL1645)124425。
1.1.2校准品 水溶液校准品为RANDOX钾、钠、氯检测试剂盒配套校准物;血清基质校准品为英国RANDOX公司生产人基质复合校准品(冻干)CAL2350,批号:500UN。
1.1.3标本 采集本院门诊及住院病人静脉血20份,立即分离血清,标本均无溶血、黄疸、脂血,并且经初步检测浓度水平包括正常及异常值水平。
1.1.4其他 实验用去离子水水质≤1.0μS/CM;复溶用量具均经过国家计量部门校准。
1.2方法生化仪实验参数均严格按照试剂盒要求设定。用复合校准品分别对K+、Na+、Cl-进行项目校准,以1~20号顺序测定标本,再以20~1顺序测定,记录数据。再用水溶液校准品分别对K+、Na+、Cl-进行项目校准,按上述方式重新测定标本,记录数据。
1.3统计学处理使用SPSS13.0统计软件对以上两组测定进行配对t检验及相关性分析。Plt;0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
使用人血清基质复合标准品校准后测定结果与水溶液校准品校准后测定经配对t检验,K+、Na+、Cl-三个检测项目的t值分别为28.79、94.76、5.01,具有统计学差异(Plt;0.01),结果见表1。
使用水溶液校准品校准后的K+、Na+、Cl-检测结果(Y1、Y2、Y3)显著高于血清基质校准品校准后的检测结果(X1、X2、X3),经相关性分析:
项目n复合标准液水溶液标准液t值PK+403.17±0.653.72±0.7728.79lt;0.01Na+40137.82±8.24150.81±8.8194.76lt;0.01Cl-40101.53±4.45104.36±7.065.01lt;0.01
3 讨 论
基质效应是指样本中除分析物以外,所有其他成分所介导的分析误差,影响分析物定量测定的准确性[2]。因基质效应而导致的检测结果的偏差称为基质偏差。国际标准化组织对基质效应所作的定义是:“除被测定物质以外样本的物质,它可以影响到被测物的检测一测定结果”(ISO15189)。随着比色法测定电解质的越来越广泛的应用,基质效应对电解质酶法测定的影响也越来越被人们重视。由于基质效应与检测的方法及校准品选择有关[3],因此也直接导致定标后测定结果出现偏差[4]。本实验结果表明,在比色法测定电解质时使用不同基质的标准液进行项目校准后,其检测结果均有统计学差异(Plt;0.01),虽然两种校准方式的测定相关性较好,但水溶液校准品校准后的检测结果显著高于血清基质校准品校准的结果。目前市售的试剂配套校准品(除免疫比浊法试剂盒外)通常是水基质校准品,与室内质控及被测定的人血清标本的基质相差较大。而水溶性标准品与血清校准品相比较而言,后者的基质更接近于新鲜人血清(临床标本)。虽然血清校准液在制备过程中经过过滤、透析或离子交换、添加剂等预处理后,其基质与新鲜人血清基质也略有差异,但相比于水溶性基质更令人满意。值得注意的问题是,离子检测较其他实验项目更为特殊,目前市售的血清基质校准品多为冻干状态,而临床实验室在对此类校准品复溶时所用的纯净水的水质也会对检测结果有一定的影响,未达标的实验用水中含有较多外源性离子,此部分离子参与到反应体系中将对实验结果产生干扰。同时校准品中各项目的量值会受到复溶时操作的影响,因此使用精密校正过的量具和保持严谨的操作步骤,对于提高检测结果的准确程度至关重要。水基质校准品多由厂家直接配制,均一性及含量误差较小,对于保证量值的溯源性具有一定的优点。
本实验中在复溶血清基质校准品时使用水质、量具及复溶过程均经过严格控制,以减少偶然误差对实验准确性的影响。笔者认为,从减少基质效应对比色法影响的角度上来说,合理谨慎地使用血清基质校准品对电解质比色法项目进行校准更有利于减小实验误差。
[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M]. 第3版. 南京:东南大学出版社,2006:559-563.
[2]湛玉良,井新辉,李静.校准基质对测定结果的影响[J].陕西医学检验,2002,17(1):18-19.
[3]叶解民.基质效应及定标方式对氯电极测定的影响[J]. 上海医学检验杂志,2002,17(1):16-18.
[4]王毓三.基质效应[J]. 临床检验杂志,2002,20(增):112-115.
[编辑] 一 凡
R446.1
A
1673-1409(2009)02-R057-02
10.3969/j.issn.1673-1409(R).2009.02.023
2009-04-12
熊传银(1970-),男,湖北公安人,副主任检验师,硕士,从事医学临床检验工作。