湖沼地区草本植物化感作用对日本血吸虫毛蚴影响的研究

张爱华，邓德明， 陈中义

(长江大学医学院，湖北 荆州 434023)

皮慧芳，何 琼，何昌浩

(华中科技大学同济医学院，湖北 武汉 430030)

湖沼地区草本植物化感作用对日本血吸虫毛蚴影响的研究

张爱华，邓德明， 陈中义

(长江大学医学院，湖北 荆州 434023)

皮慧芳，何 琼，何昌浩

(华中科技大学同济医学院，湖北 武汉 430030)

目的：观察洲滩草本植物与日本血吸虫之间的化感作用及生态学关系，探讨控制湖沼地区血吸虫病传播的新措施。 方法：采用改良的Rorbert’比较法和平皿法，观察湖北省荆州市郊血吸虫病疫区草本植物浸出液(10%)对日本血吸虫毛蚴趋向钉螺的影响及杀灭毛蚴的作用。结果：野胡萝卜草、猫眼草、地菜、苔草、紫花地丁等洲滩草本植物的浸出液能够非常显著地抑制日本血吸虫毛蚴的趋向运动，而小蓟的浸出液具有显著地吸引日本血吸虫毛蚴的作用；益母草、毛茛、猫眼草、蒿及藜蒿浸出液对日本血吸虫毛蚴具有杀灭作用。结论：洲滩草本植物的化感作用具有控制血吸虫病传播的潜在能力，有望成为一种控制湖沼地区血吸虫病的新措施。

草本植物；化感作用；日本血吸虫毛蚴

在我国，50年代以来一直执行“以消灭钉螺为主导的综合性防治措施”，但钉螺在地球上存在的历史久远[1，2]、面积广泛[3]，以灭螺来控制血吸病的策略遇到很大的困难。

化感作用“Allelopathy”源于希腊语“Allelon(相互)”和“Pathos(损害、妨碍)”[4，5]，1984年Rice[6]在《Allelopathy》中定义为：植物或微生物的代谢分泌物对环境中其他植物或微生物的有利或不利的作用。对洲滩草本植物-血吸虫毛蚴-钉螺-血吸虫尾蚴这一环节，特别是对植物与毛蚴形成的微生态环境进行研究，即利用植物对毛蚴的化感作用阻断日本血吸虫感染人类的途径，以期达到控制血吸虫病之目的，也许比起让钉螺绝迹这个方法更为可行。在生物多样化和钉螺无害化理论指导[7]下，近年来，作者开展了洲滩植物对血吸虫毛蚴趋向的影响及杀灭作用的研究，现报道如下。

1 材料与方法

1.1材料

图1 “ф”形板示意图

1.1.1草本植物 将采自湖北省荆州市荆州区太湖农场洲滩地的地菜(Capsella bursa-pastoris)、猫眼草(Euphorbia helioscopia)、野胡萝卜(Daucus carota)、苔草(Carex argyi )、苜蓿(Medicago hispida)、紫花地丁(Medicago hispida)、小蓟(Cephalanoplos segetum)、益母草(Leonurus artemisia)、蒿(Artemisia apiaceea )和毛茛(Ranunculus japonnicus)等植物，分别取全株及其根、茎、叶各10g研碎，置于100ml去氯水中浸泡24h，制成10%浸泡液，备用。

1.1.2“ф”形板 将Robert’s比较法[8]中上层由有机玻璃制作并粘合的“ф”形容器，改由无需粘合的石蜡制成(见图1)。

1.2方法

1.2.1改良的Roberts 比较法 在“ф”形板中加入刚孵出的毛蚴悬液1ml，让毛蚴在容器内自由活动并均匀分布。在两侧加样点处用加样器分别加入待测趋化物质(各种洲滩草本植物浸泡液)50μl(实验组)和等量去氯水作为对照(对照组)，5min后，插入挡板阻止毛蚴从一侧游到另一侧。随即在两边各加碘酒1滴，杀死并固定毛蚴，静置片刻，在显微镜下计数毛蚴数，然后进行统计学处理。

1.2.2平皿法 在实验和对照平皿中分别注入刚孵出的毛蚴悬液0.5ml，让毛蚴在平皿内自由活动并均匀分布。用加样器在实验平皿中加入150μl植物浸泡液(实验组),对照平皿中加入等量去氯水(对照组)。1min后，分别观察计数沉于两平皿底面的死毛蚴数(即为杀死之毛蚴数)。然后在两平皿内加入2滴碘液杀死毛蚴，分别计数两平皿的死毛蚴数即为总毛蚴数。

1.3统计学处理率的差异性检验采用χ2检验。Plt;0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1洲滩草本植物对日本血吸虫毛蚴趋向运动的影响野胡萝卜草的茎、猫眼草的叶和根、地菜叶、苔草的茎、紫花地丁等洲滩草本植物的浸出液能够非常显著地抑制日本血吸虫毛蚴的趋向运动，而小蓟的浸出液具有显著地吸引日本血吸虫毛蚴的能力。见表1。

表1 洲滩草本植物对日本血吸虫毛蚴趋向运动的影响

注： +、-代表对毛蚴趋向的影响，其中+为吸引，-为排斥。

2.2草本植物浸出液杀灭日本血吸虫毛蚴效果益母草、毛茛(叶)、猫眼草(茎)、蒿(茎)浸出液对日本血吸虫毛蚴具有杀灭作用。见表2。

表2 草本植物浸出液杀灭日本血吸虫毛蚴效果

3 讨论

本研究结果表明，野胡萝卜草的茎、猫眼草的叶和根、地菜叶、苔草的茎、紫花地丁等洲滩草本植物的浸出液能够十分显著地抑制日本血吸虫毛蚴的趋向运动，而小蓟的浸出液具有显著地吸引日本血吸虫毛蚴的能力；同时表明益母草、毛茛(叶)、猫眼草(茎)、蒿(茎)浸出液对日本血吸虫毛蚴具有杀灭作用。

周述龙等[9]报告，日本血吸虫毛蚴对钉螺的感染率与毛蚴的数量成正比，如果降低毛蚴数量，对于控制血吸虫病传播无疑是十分重要的。如果使用洲滩本身具有的易于生长繁殖的草本植物，使其形成优势种群，其具有显著地杀灭日本血吸虫毛蚴和阻止毛蚴趋向钉螺的作用，即可产生明显的减少毛蚴感染钉螺的效果，达到不需要杀灭钉螺就能够控制人类血吸虫病，特别是控制湖沼型血吸虫病传播的目的。

这些抑制毛蚴趋向钉螺运动和杀灭毛蚴的草本植物化感作用的有效组分、使用的适宜浓度、时间以及其作用机理等，尚需进一步研究。

[1]周晓农.实用钉螺学[M].北京:科学出版社，2005：6-8.

[2]李友松,林金祥.滇西洱源县钉螺化石的初步研究[J].中国血吸虫病防治杂志，2001，13(2)：98-100.

[3]郝阳，吴晓华，邓浩，等. 2007年全国血吸虫病疫情通报[J].中国血吸虫病防治杂志， 2008，20(6)：401-404.

[4]余叔文.植物间相互作用-相生相克现象.植物生理与分子生物学[M].北京:科学出版社,1992：376-394.

[5]孙文浩.相生相克作用及其应用[J].植物生理学通讯，1992，28(2)：81-87.

[6]Rice E L.Allelopathy[M]. 2nd edition. New York: Academic Press，1984：1-50.

[7]何昌浩.钉螺无害化的理论与实践[J].中国寄生虫病防治杂志,2003,15(6)：478.

[8]Roberts TM， Stibbs H， Chernin E，etal.A simple quantitative tegnique for testing behavioural responses of Schistosoma mansoni miracidia to chemicals[J]. J Parasitol，1978，64：277-282.

[9]周述龙，林建银，蒋明森. 血吸虫学[M]. 第2版. 北京：科学出版社，2001：385.

[编辑] 一 凡

2009-06-18

张爱华(1957-)，女，湖北江陵人，副教授，从事寄生虫生态学及寄生虫病防治工作；通讯作者：何昌浩， E-mail：hechanghao@126.com。

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2009.03.002

R532.21

A

1673-1409(2009)03-R003-02