盐逆境条件下盐芥还原型维生素C含量变化情况
2009-11-11宋晓峰
宋晓峰
摘要不同盐浓度梯度下处理野生型盐芥,观察其对盐芥体内维生素含量变化的影响。结果表明:在低浓度的盐浓度下,维生素含量没有明显的变化。随着盐浓度的增加,盐芥所含维生素C量相应降低。
关键词盐胁迫;盐芥;还原型维生素C;含量
中图分类号 Q945.78;S637.9 文献标识码A文章编号 1007-5739(2009)15-0078-01
目前世界上大约有10亿公顷受盐渍化影响的陆地,约占陆地总面积的7%[1]。因此,研究植物的耐盐机制是目前的当务之急。盐芥作为模式植物拟南芥的近亲,拥有着许多与拟南芥共同的优点以作为试验系统。维生素C对于植物抗氧化作用、光合保护以及调节生长发育等都具有非常重要的作用,而逆境条件下植物清除活性氧的能力又与抗逆性有密切关系[2],因此分析植物对于盐胁迫的反应,研究其反应机制,提高作物的耐盐性,不仅对于揭示植物耐逆的机理有重要的理论意义,而且对于耐盐作物的培育,具有重要的实践意义。
1材料与方法
1.1仪器与试剂
紫外分光光度计;维生素C标准液(100μg/mL);Cu(Ⅱ)溶液(5μg/mL,pH值6.0)内含0.2moL/L的醋酸钠以及0.007moL/L的醋酸缓冲液;Cu(Ⅱ)-EDTA溶液:上述浓度的Cu(Ⅱ)溶液与6.02 ×10-5moL/L的EDTA按4∶1混合而成(需现配)。
1.2试验材料处理
先用50mmoL/L的NaCl溶液处理盐芥,隔日用100 mmoL/L的NaCl溶液处理;然后浓度梯度增加为200mmoL/L、300mmoL/L处理盐芥,并做好标记。
1.3样品制备
称取2g洗净新鲜的盐芥叶片组织置于干净的研钵中研磨,然后转移到离心管中,量取20mL双蒸水加入离心管中,称取0.5g活性炭加入离心管中,混匀。12 000rpm,离心10min,移取上清液作为盐芥样品试液。
1.4测定方法
在pH值6.0的HAc-NaAc缓冲溶液中,用活性炭吸附盐芥中的色素,Cu(Ⅱ)催化氧化维生素C,在λmax=268nm处可直接测定盐芥中维生素C含量。
2结果与分析
2.1维生素C光谱特性
维生素C的光谱特性见图1。
2.2标准曲线绘制
准确移取维生素C标准溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL、1.4mL、1.6mL、1.8mL、2.0mL于10mL干燥试管中,加水至刻度,稀释成浓度分别为2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8μg/mL、10μg/mL、12μg/mL、14μg/mL、16μg/mL、18μg/mL、20μg/mL的溶液。分别取该溶液1mL于2支干燥试管中,一支加入4mL的Cu(Ⅱ),20min后加入1mL EDTA溶液作空白;另一支试管中加入5mL Cu(Ⅱ)—EDTA溶液,摇匀,立即在紫外分光光度计上于268nm波长处测定吸光度。线性回归方程为y=0.024 6x-0.024 2, 相关系数R2为0.964 4(见图2)。
2.3样品测定
准确移取盐芥样品试液1mL于10mL比色管中,加水至刻度。分别取该溶液1mL于2支干燥试管中,一支加入4mL的Cu(Ⅱ),20min后加入1mL的EDTA溶液作空白;另一支试管中加入5mL的Cu(Ⅱ)—EDTA溶液,摇匀,立即在紫外分光光度计上于268nm波长处测定吸光度,结果见图3。
由图3可以看出,盐浓度为100mmoL/L时,对盐芥中还原型维生素C的含量没有明显影响,与野生型的还原型维生素C含量基本一致。当盐浓度为200mmoL/L和300mmoL/L时,盐芥中还原型维生素C含量逐渐下降。
3结论
试验结果表明,在低浓度的盐浓度下,维生素含量没有明显变化;随着盐浓度的增加,盐芥所含维生素C量相应降低。
4参考文献
[1] TESTER M,DAVENPORT R.Na+ tolerance and Na+ transport in higher plants[J].Ann Bot,2003,91(5):503-507.
[2] 李志英,赵二劳,张海容.紫外分光光度法测定沙棘中维生素C含量[J].山西大学学报(自然科学版),2003,26(4):339-340.
[3] 宋莉璐.铅胁迫对拟南芥和盐芥种子萌发的影响[J].现代农业科技,2007(3):9,12.
[4] 聂惠,于海峰,刘浩明.向日葵对盐胁迫的反应及其抗盐机理的研究进展[J].内蒙古农业科技,2008(6):23-25.
[5] 刘爱荣,赵习夫.盐胁迫下盐芥渗透调节物质的积累及其渗透调查作用[J].植物生理与分子生物学学报,2005(4):61-67.