HPLC法测定风痛定胶囊中青藤碱的含量

2009-11-0670600兰州军区临潼疗养院仝武军张小丽70600兰州军区临潼疗养院第二疗养区

中国疗养医学 2009年10期

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HPLC法测定风痛定胶囊中青藤碱的含量

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目的建立风痛定胶囊中青藤碱含量HPLC测定方法。方法色谱柱为CenturySIL 5 μm C18-BDS分析(4.6 mm×250 mm，5 μm)柱，流动相为甲醇:[(乙二胺:水)(1:300)](62:38)，流速为0.5 mL/min，检测波长为262 nm。结果青藤碱在1.06～10.6 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=0.999 8，平均回收率为93.38%，RSD为1.94%(n=5)。结论此方法准确可靠，简单易行，可用于该制剂的质量控制。

风痛定胶囊；青藤碱；高效液相色谱法

风痛定胶囊由青风藤、黄柏、苍术、黄芪等七味中药组成[1]，本文采用高效液相色谱法测定方中主药青风藤中青藤碱的含量，方法准确可靠，重复性好。

1 仪器与试药

美国DIONEX P680高效液相色谱仪；PDA 100 photodiode Array detector(二极管阵列检测器)，7725i进样阀、chromeleon数据处理软件；色谱柱：Century SILC18-BDS分析柱 (4.6 mm×250 mm，5 μm)；R200D电子分析天平；SK250LH型超声波清洗器。

青藤碱对照品 (中国药品生物制品检定所，批号0774-200206)风痛定胶囊3批(院内自制)。甲醇为色谱醇，水为超纯水；其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱：Century SIL 5 μm C18-BDS分析柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：甲醇:[(乙二胺:水)(1:300)](62:38)；检测波长：262 nm；流速：0.5 mL/min；柱温：26℃；进样量：20 μL[2]。

2.2 对照品溶液的制备精密称取青藤碱对照品适量，用甲醇溶解并定容于10 mL容量瓶中，制得0.53 mg/mL青藤碱对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备取风痛定胶囊10粒，倾出内容物，精密称定，置于25 mL容量瓶内，加甲醇至刻度，超声提取30 min，静置，精密量取上清液4 mL移至5 mL容量瓶内，用甲醇定容。摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，去续滤液，即得。

图1

图2

2.4 线性关系考察精密移取制得的对照品溶液0.5，1，2，3，5 mL置5 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，依次得到浓度为 0.053 0 mg/mL，0.106 0 mg/mL，0.212 mg/mL，0.530 mg/mL的对照品溶液。以青藤碱进样量为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，回归方程为Y=530.371 8X-2.307 2，r=0.999 8(n=5)，表明青藤碱在1.06～10.6 μg范围内具有良好的线性关系。

2.5 精密度试验取对照品溶液，按上述色谱条件重复进样5次，20 μL/次，测定青藤碱峰面积，RSD为0.9%(n=5)。

2.6 干扰试验取不含青风藤阴性样品，按“2.3”项下方法制备阴性样品溶液，取对照品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各20 μL，注入色谱仪，记录色谱图，阴性样品对测定无干扰(图1～3)。

2.7 稳定性试验取供试品溶液，分别在0，3，6，9，12 h进样20 μL，测定青藤碱峰面积，其RSD为0.8%(n=5)，供试品溶液在12 h内稳定。

2.8 重复性试验取同一批号样品5份，按“2.3”项下方法制备供试液，进样20 μL测定，青藤碱含量为0.364 mg/粒，RSD=0.7%(n=5)。结果表明重复性良好。