无刺树莓组培快繁技术研究

辛向阳

摘要：以无刺黑树莓和红树莓枝条顶芽茎尖为试材，进行组培快繁试验。结果表明，两种树莓的最佳启动培养基为Ms+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.3mg/L+GA₃0.5mg/L，培养30天后均可形成3—5个丛状芽，长1—2cm，粗壮；最佳增殖培养基分别为Ms+6-BA1.0mg/L+NAA 0.3mg/L，增殖倍数分别为3.20和3.11，芽生长粗壮，分化清晰；最佳生根培养基为Ms+NAA 2.0mg/L，培养30天后生根3—5条，根长4—6cm，生长粗壮整齐，移植于细砂加腐土基质中，成活率达93％以上。

关键词：无刺树莓；组培快繁

中图分类号：S663.2文献标识码：A文章编号：1002—2910(2009)01—0016—03

树莓生产长期采用扦插繁殖会造成品种退化，品质下降，且易感染病害。利用组培对树莓优良品种进行离体快速繁殖，既能保持原品种的品质，提高产量，又能加快繁殖速度，满足大面积栽培对苗木的需求。有关树莓的组培技术研究报道较多，但是对无刺红树莓和黑树莓尚未见报道。本试验利用无刺红树莓和黑树莓的枝条顶芽进行茎尖离体培养和快速繁殖，筛选出无刺红树莓和黑树莓茎尖离体培养和快速繁殖的培养基，已培育两种树莓苗木1万多株。

1材料与方法

供试材料为无刺红树莓和黑树莓的枝条顶芽。

启动培养基：以MS为基本培养基(下同)，设附加6-BA(0.2，0.5mg/L)、NAA 0.3mg/L，GA₃0.5 mg/L等3种生长调节物质共2个处理。增殖培养基：设附加6-BA(0.1，0.3，0.5。1.0 mg/L)、NAA(0.1，0.3mg/L)2种生长调节物质共8个处理。生根培养基：设附加NAA(2.0，3.0，4.0mg/L)3个处理。以上各培养基加琼脂6.0g/L、蔗糖3.0％，pH值5.8～6.0。接种后的材料在培养室温度24～26℃、光照12小时/天，光照强度2500Lx的条件下培养。

2结果与讨论

2.1茎尖的启动培养

将两种树莓带顶芽的枝条剪成长2.0cm左右枝段，于自来水下冲洗30分钟，常规消毒法消毒(75％酒精消毒10秒，再用0.1％升汞消毒12分钟，用无菌水冲洗5次)后，在超净工作台上用解剖针剥出生长点，切取0.5～0.7mm的茎尖接种到不同启动培養基上，结果见表1。

从表1可看出，黑树莓和红树莓在不同培养基上处理后均可形成长1～2cm的芽，启动速度没有差异，但在培养基处理1上形成了3～5个丛状芽，在处理2上只形成1～2个芽。无刺红树莓和黑树莓最佳启动培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.3 mg/L+GA₃0.5mg/L。

2.2增殖培养

将茎尖苗单芽茎段转接到8种增殖培养基上培养30天后的调查结果见表2。

从表2看出，在NAA浓度一定时，两种树莓的增殖率均随6-BA浓度的增加而不断提高，但在不同的NAA和6-BA浓度配比培养基上，芽的生长表现差异较大。黑树莓最佳继代培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA0.1mg/L。红树莓的最佳继代培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L。

2.3生根培养及移栽

新梢长至4～5cm时，转接到生根培养基上，10天后有根尖长出，17天根长2cm左右，培养30天后的生根状况见表3。

从表3可看出，3种培养基均可生根，随NAA浓度的提高，根的数量和长度增加，但生长变细、变弱，长短不一，移栽时容易损伤根系，影响成活率。试验表明，无刺红树莓和黑树莓生根最佳生根培养基为MS+NAA2.0mg/L。

将生根的幼苗取出，洗去琼脂，用1％的高锰酸钾溶液消毒3—5分钟，晾30～60分钟，移栽于细砂：腐土为1：3的基质中，保持温度25℃左右，相对湿度80％以上，成活率可达到93％以上，苗高15～20cm时可移植于大田。

3小结

试验结果表明，无刺黑树莓和红树莓的最佳启动培养基为MS+6-BA 0.2mg/L+NAA0.3mg/L+GA₃0.5mg/L；最佳增殖培养基分别为MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L和MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg,/L；最佳生根培养基为MS+NAA 2.0mg/L。生根苗移植于细砂加腐土的基质中，成活率可达93％以上。

本试验仅以MS作基本培养基对两种树莓进行茎尖培养和快速繁殖，茎尖试管苗是否达到脱毒效果及其对产量和品质的影响，有待继续研究。