诺氟沙星胶囊含量测定的不确定度评定

王 玉 孙 丽

[摘要]目的 对高效液相色谱法测定诺氟沙星胶囊中诺氟沙星含量的测量不确定度进行分析,找出影响不确定度的因素,为检测报告提供科学依据。方法 通过分析测量过程,确定并简化不确定度来源;利用高效液相法测定诺氟沙星胶囊中诺氟沙星含量的方法验证数据及经验数据,通过统计学方法,量化不确定度分量;计算合成不确定度和扩展不确定度。结果 用HGLC法测定诺氟沙星胶囊中诺氟沙星的扩展不确定度为1.2%×Q%。结论 测量不确定度可用于诺氟沙星的液相方法评价;测量不确定度的评定方法的确立对于药品质量标准的研究具有重要意义。

[关键词] 测量不确定度;诺氟沙星;高效液相色谱法

[中图分类号] R927.2[文献标识码] A[文章编号] 1004-8650(2009)06-112-02

Evaluation of Measurement Uncertainty in the HPLC determinatain of Norfloxacin Capsules

WANG Yu , SUN Li

(Suqian Institute for Durg Control ,suqian 223800)

[Abstract] Obiective Find out the effective factors of uncertainty by analyzing the uncertainty of measurement in determination of salviol by HPLC and provide the evidence to evaluate the measurement. Methods To facilitate the identification and analysis of the uncertainty sources arisng from the procedure of analysis,a cause and effect diagram was constructed and simplified.Each uncertainty component,whether associated with individual sources or with the combined effects of several sources, was evaluated with respect to significance of its contribution to the overall measurement uncertainty and was expressed as standard uncertainty.All the standard uncertainties were then combined according to the appropriate rules to give a combined standard uncertaintyand an expanded uncertainty. Results The expanded standard uncertainties the HPLC determination of ribavirin in Norfloxacin Capsules is 1.2%×Q%. Conclusion Measurement uncertainty is applicable to set the limit of the ribavirin in Capsules.The establishment of the methodology for the evaluation of measurement uncertainty is important to the studies of Chinese medical standards.

[Key words] measurement uncertainty;norfloxacin;HPLC

测量不确定度是“表征合理地赋予被测量值的分散性,与测量结果相关联的参数”,它是被测量客观值在某一量值范围内的一个评定,其大小决定了测量结果的实用价值。不确定度越小,测量结果的质量越高,使用价值越大。目前,测量不确定度的概念在国家计量基准、标准物质的研究及药品检验中广泛应用,因此,正确表达和评定测量不确定度正逐步成为国际通行的要求。

1试验部分

1.1 仪器与试药

仪器名称:高效液相色谱仪, Agilent 1100(紫外检测器,自动进样器)电子天平型号AL-204, 电子天平,诺氟沙星胶囊:成都锦华药业有限责任公司( 批号:080307 ),诺氟沙星对照品:中国药品生物制品检定所(批号:130450-200304)含量:97.8%。

1.2色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.025mol/L磷酸溶液(三乙胺调节pH值至3.0)-乙腈(87:13)为流动相;流速为1.0ml/min;检测波长为278nm;进样量:20 ul温度:25℃,相对湿度:52%。

1.3不确定度分析

2不确定度分量计算

2.1C对

对照品溶液的制备:取对照品24.81mg置100ml量瓶中,加0.1mol/L的盐酸2ml使溶解,用水稀释至刻度,摇匀。精密量取5ml置50ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,制成对照溶液1。另取对照品25.95mg,同法制成对照溶液2。

2.1.1天平称量引入的不确定度:称量主要有两个不确定度来源:重复性和由于天平校准产生的不确定度

①天平线性:±0.01mg(天平参数),按均匀分布,u(m1)=0.01/ =0.0058mg。

② 天平重复性0.02mg, 用减量法称量两次,urel,c(m1)=0.029/24.81=0.0011 ,urel,c(m2)=0.029/25.95=0.0011,urel,c(m)=(0.00112+0.00112)1/2=0.0016。

2.1.2玻璃量器:玻璃仪器的不确定度来源还有三个方面:第一,校准,按矩形分布(k= ),50ml量瓶(经检定为A级),允差为±0.05ml, U(V1)=0.05/ =0.020ml。第二,重复性:0.04ml(以实验求得标准偏差) U(V2)=0.04ml。第三,温度效应: △V=(2.1×10-4-1.5×10-5)×50×(25-20)=0.049ml。

按正态分布u(v)=0.049/2=0.024ml则uc(v1)=(0.022+0.042+0.0242)1/2=0.05075,5ml移液管(A级)。

允差为0.015ml,中间分布, Uv3=0.015/=0.0061,

100ml量瓶(A级),允差±0.10ml,中间分布,U(V1)=0.10/ =0.041ml

2.2 D:精密量取样品0.2148g置500ml量瓶中,加0.1mol/L的盐酸10ml使溶解溶解,用水稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液5ml置50ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,制成供试品溶液1。另取样品0.2119g,同法制成供试品溶液2。

2.2.1天平称量引入的不确定度:①天平线性:±0.1mg(天平参数),按均匀分布,u(m1)=0.1/ =0.058mg。②天平重复性0.02mg, 用减量法称量两次,

urel,c(m)=(0.0004052+0.0004102)1/2=0.000576

2.2.2玻璃量器:100ml量瓶(A级),同上urel,c(v1)=0.0010 ;500ml量瓶(A级),允差±0.25ml,中间分布,U(V1)=0.0.25/ =0.612ml,urel,c(v1)=0.2598/500=0.0005;5ml移液管,同上urel,c(v3)=0.00132,

urel,c(D)==0.0018

2.3

取本品20粒,精密称定,重4.6768g,壳总重1.2571g,内容物平均片重:0.1710g。

①天平线性:±0.1mg(天平参数),按均匀分布,u(m1)=0.1/ =0.058mg

②天平重复性0.02mg, 用减量法称量两次,

uc(m)=[2×(0.0582+0.022)] 1/2 =0.087

urel,c(m1)=0.087/4676.8=0.0000186

urel,c(m2)=0.087/1257.1=0.0000692

urel,c(m)=(0.00001862+0.00006922)1/2=0.00007

2.4重复性(rep)

2.4.1平均校正因子6.4365×10-6 ,U(X)=5.675×10-8,

2.4.2测定结果平均:样=0.993u(x样)=0.00481

2.5 合成标准不确定度的计算

2.6扩展不确定度计算和报告

测量不确定度报告:诺氟沙星胶囊标示百分含量为(0.9930±0.012)×100%, K=2

3讨论

从表1可知:重复性引起的不确定度分量所占比重较大,其次就是样品和对照品的配制过程由天平称量、温度效应、玻璃量器等引起的不确定度,样品称量的平均重量引起的不确定度可或略;因此,实验过程中应加强控制,加强仪器的保养,加强基本操作、标准操作训练,以减少随即和认为因素对实验结果的影响。

参考文献:

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[5] 刘永利,刘冬梅,冯丽,杨梁,复方丹参片含量测定的不确定度[J],药物分析杂志 2007.27(11)1800-1802

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(收稿日期2009-06-03)