多耐药临床分离株结核分支杆菌耐药基因rpsL的克隆表达及功能的初步研究

张万江　鲍　朗　邓喜玲　吴　芳　曹旭东　王晓樱

摘要：制备多耐药临床分离株结核分支杆团基因组DNA，PCR扩增其耐药基因rpsL基因和rrS基因，同时测分析，结果显示该株多耐药临床分离结核分支杆菌的rpsL基因的93、94bp处的碱基发生了突变，碱基C、C突变为T、T使得相对应的编码氨基酸由脯氨酸（Pro）突变为亮氨酸（Leu）；而rrS基因未发生核苷酸的插入、缺失或取代；进一步构建该株多耐药临床分离株结核分支杆菌耐药基因rpsL高效原核表达重组载体pGEX-λT/rpsL，所构建的重组质粒pGEX-λT/rpsL在大肠杆菌中高效表达了38kD的融合蛋白。结果提示，该株多耐药临床分离株结核分支杆菌对链霉素耐药仅仅是由于rpsL基因的个别碱基突变，是单基因型的，在国内外属首次研究发现。

关键词：结核分支杆菌；耐药基因rpsL；克隆；功能

中图分类号：Q78 R378

文献标识码：A

文章编号：1007-7847(2005)01-0043-06