人LXR-LBD原核表达载体的构建及其在E.Coli中的表达

巩　艳　叶治家　曹廷兵　彭家和　江　渝

摘要：从正常中国人的肝脏组织分离总RNA，采用RT-PCR获得人的LXR-LBD cDNA，然后克隆至原核表达载体pET28a，构建高效原核表达质粒pET28a-LXR-LBD，序列分析表明正常中国人的LXR-LBD cDNA序列与Gene Bank报道的序列一致。把构建的pET28a-LXR-LBD质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG进行诱导表达，Western blot检测表达产物，在相对分子质量35kD处有特异的蛋白表达条带，表达蛋白以可溶性和包涵体方式存在。在N末端融合6×His纯化标签的表达产物用Ni²⁺-NTA离子交换树脂进行纯化，纯化蛋白进行DSD-PAGE纯度分析大于90％以上。

关键词：LXR；LXR-LBD；克隆；表达

中图分类号：Q786

文献标识码：A

文章编号：1007-7847(2005)01-0033-05