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非洲猪瘟防治与治疗技术分析

2024-10-08陈华琼

安徽农学通报 2024年18期

摘要为进一步降低非洲猪瘟传播风险,提高预防能力,加强治疗手段,本文对该病常用检测技术、具体防治措施以及治疗技术进行总结分析。常用检测技术包括早期诊断、分子生物学检测以及血清学检测,具体防治措施主要有消毒防护、猪场日常管理、市场监管、防控意识以及疑似病害处理等,治疗技术包括疫苗研发与药物治疗技术。以上分析为生猪养殖业的相关人员提供参考。

关键词非洲猪瘟;检测手段;防治手段;治疗技术

中图分类号S851.33文献标识码A文章编号1007-7731(2024)18-0037-05

DOI号10.16377/j.cnki.issn.1007-7731.2024.18.009

Technical analysis of prevention and treatment of African swine fever

CHEN Huaqiong

(Supervision Office of Agricultural and Rural Bureau of Taihu County, Anqing 246400, China)

Abstract In order to further reduce the risk of African swine fever transmission, improve prevention capacity and strengthen treatment. In this paper, the common detection techniques, specific prevention measures and treatment techniques of this disease were summarized and analyzed. Common detection techniques included early diagnosis, molecular biological detection and serological detection. Specific prevention measures mainly included disinfection protection, daily management of pig farms, market supervision, prevention and control awareness and treatment of suspected diseases. Treatment technologies include, vaccine research and development and drug therapy technology were summarized. The above analysis provided references for the relevant personnel of pig farming industry.

Keywords African swine fever; detection means; control means; therapeutic techniques

非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)诱发的一种具有高度传染性的病毒性疾病,严重影响猪肉生产与贸易。近年来,对于ASF的防治与治疗技术研究逐渐被重视,Aliro等[1]采用早期诊断技术、生物安全措施以及疾病监测等对ASF进行预防,结果表明,通过基因编辑技术增强了猪的抗病性,暂没有形成有效的防控体系。黄文海[2]通过分析ASF临床鉴别诊断及防治措施,指出做好鉴别诊断,以便及时采取正确的防治措施,是降低该病对生猪养殖产业的影响的有效手段之一。本研究对ASF检测技术手段、防治与治疗技术手段进行总结分析,以促进生猪养殖产业的健康发展,为该病防治提供参考。

1 非洲猪瘟检测技术分析

1.1 早期诊断技术

早期诊断主要分为实验室检测和现场快速检测技术。实验室检测方法主要基于分子生物学技术,准确检测和鉴定ASFV的特定DNA序列,但通常需要专业的设备和较长的处理时间,与之相对的是现场快速检测技术,例如便携式PCR仪器和免疫层析法条带测试,Wen等[3]采用重组酶聚合酶扩增技术与侧向层析技术相结合的方法,研发了ASFV核酸检测量子点试纸条;李昱昊[4]利用ASF常见抗原与特定片段结合特性,建立了一种新型检测ASFV抗体胶体金试纸条方法。以上方法的建立为现场提供快速、初步的诊断结果,其灵敏度和特异性略低于实验室方法,但其效率相对较高,利用快速检测工具识别初期疫情并进行隔离至关重要,有助于限制疾病的传播。

1.2 分子生物学检测技术

在分子生物学检测技术中,聚合酶链反应技术是最常用的方法之一,该技术通过特异性扩增ASFV的DNA片段,快速准确地检测出病毒,哈登楚日亚等[5]利用重组酶聚合酶扩增技术,针对(p72)基因设计引物和探针,建立了实时荧光重组酶聚合酶扩增技术方法。PCR技术具有高灵敏度和特异性,即使在病毒载量极低的样本中也能进行有效检测,极大地提高早期诊断的准确率。潘会贤[6]分析认为,除了常规PCR,实时定量PCR技术能提供病毒负荷的定量信息,有助于评估病情的严重程度和监测疫情的发展趋势,序列分析可进一步扩展分子生物学的检测范围,通过比较病毒基因组的序列差异,确认病原体的种类,追踪病毒的传播路径和变异情况,为病情防控和疫苗设计提供重要的分子流行病学信息,极大地提升了对ASF的监控、研究和防控能力。

1.3 血清学检测技术

在ASF的诊断过程中,血清学检测技术是一种重要的辅助手段,主要用于监测猪群中ASFV抗体的存在,这类检测包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接荧光抗体测试和血凝试验等方法。王秀[7]对非洲猪瘟实验室检测技术研究进展进行综合分析,指出ELISA由于其高度的自动化和标准化,被广泛应用于大规模筛查过程中,能够提供定量分析,对ASFV特异性抗体有良好的敏感性和特异性。通过血清学检测,即使是无症状感染,也能检测到感染病毒的猪只,对控制ASF传播具有重要意义。实践应用中,血清学检测通常不适用于早期诊断,因为ASFV的抗体一般在感染后的数周内才出现[8],因此该检测技术更多地被用作病情调查和监测程序中的一部分,以评估免疫响应和疫苗接种效果。

2 非洲猪瘟防治措施分析

2.1 加强消毒防护

ASFV具有较强的环境抵抗能力,能在不同的物理和化学条件下存活较长时间,因此选择正确的消毒剂和方法尤为重要。选择消毒剂时确保其对ASFV有明确的杀灭效果,广泛使用的消毒剂包括次氯酸钠、碘伏和甲醛等。崔修军[9]探析了猪场ASF防控消毒技术,认为在具体实施消毒工作的过程中,必须采取全面的消毒方案,包括对养殖场的围墙、圈舍、饲料仓库、排泄物处理区域以及运输工具等进行定期消毒,特别是对于进出场地的车辆和人员,要求通过消毒池或消毒通道进行严格的消毒程序。针对不同的场所和物品,养殖人员要选择合适的消毒方式,如喷雾、擦拭和浸泡等。刘辉[10]总结了ASF临床鉴别诊断及防治措施,认为对于固定设施和大面积的场地,采用喷雾方式较为方便高效;对于工具和设备等可移动物品,可采用浸泡或擦拭的方式进行消毒。黄文波[2]强调了消毒剂的安全使用和存储,定期更换和轮换消毒剂,避免病毒产生抗药性,同时对消毒效果进行评估,根据评估结果调整消毒策略,确保消毒措施的有效性。

2.2 加强猪场日常管理

刘辉[10]研究指出,猪场的日常管理对ASF防治有重要意义,提出建立并执行入场消毒制度,为进入猪场的人员和车辆设置消毒通道,确保所有进入场地的人员及物品都进行严格的消毒程序,可有效控制ASF的传播。在人员管理方面,需要对猪场工作人员进行专业培训,增强工作人员对ASF的认识,规范操作流程,避免通过人员带入病源,并限制外来人员访问,必要时进行健康检查和记录追踪。在饲料和水源管理方面,肖锦红等[11]综述了ASF背景下规模化猪场饲料生产管理关键技术,表明ASFV在部分饲料组分中(如大豆粉、豆粕和胆碱等)可维持较长时间的致病性。因此使用经过检测的无病原的饲料,防止污染饲料引发病情,对ASF的预防具有重要意义。确保供给猪只的水源安全、清洁,定期对饲料与水源进行检测,此外,建立健全疾病监测系统,一旦发现疑似病例即刻隔离并上报,以便快速应对可能的病情扩散。

2.3 做好市场监管工作

由于市场存在不确定风险,导致其成为ASFV潜在传播的高风险区域之一,因此要进一步加强活猪及其产品的来源可追溯系统建设,谢希玲等[12]详细分析了ASF发生的原因,提出加强建立可追溯系统可及时精准追根溯源,封锁疫点,定点清除,将病情控制在小范围内,防止ASF的大暴发、大流行。确保所有在市场上销售的猪肉和猪产品都来源于无疫区,并且有明确的供应链记录,同时需要协调养殖户、运输商、屠宰场以及零售商之间的信息共享,确保信息更加透明、公正和规范。实行市场准入制度,仅允许经过认证的、采取有效生物安全措施的养殖场所和企业进入市场,定期对进入市场的生猪进行随机抽检,以及禁止销售来自疫区的猪只和猪肉产品。建立快速响应机制,一旦发现市场内有疑似感染的情况,立即进行封锁、样品采集和检测确认,及时启动应急预案,彻底清洁消毒,同时对感染源头进行追踪与隔离。

2.4 增强防控意识

增强防控意识。要求从业者、养殖户及相关人员深刻理解ASF的严重性及其对相关产业造成的不利影响,进一步增强危机意识。黄文波[2]认为正确认识ASF的危害,是增强对该病的防控意识的基础。通过举办教育培训班、研讨会和网络课程等形式,进一步普及ASF的基本知识、传播途径、预防和控制方法。廉子木[13]研究指出,进一步增强参与者对病情的认识和紧迫感,可促使其在实际工作中更加积极地采取防控措施。通过现代信息技术,利用媒体和社交平台宣传ASF的防控信息,包括病情动态、防控措施和成功案例等,可在迅速扩大影响范围的基础上,进一步增强公众的防控意识。定期发布防疫指南和手册,为养殖户提供实用的防控技术和方法,通过建立病情报告和响应系统,鼓励养殖户和公众积极报告疑似病情,以便及时采取措施防止疫病扩散。养殖户和从业者可定期参加由兽医部门或专业机构组织的防控技术培训,王建华等[14]研究指出,技术培训可改善养殖户对相关规定的重视和了解程度,促进养殖户遵守生物安全行为规范。

2.5 处理疑似病例

在ASF防控中,对疑似病例的处理是阻断病毒传播和维护生物安全的关键环节之一,一旦出现疑似ASF病例,必须迅速采取具体措施来进行有效管理。根据和建英[15]对疑似非洲猪瘟病毒阳性病例的应急处置经验,对于疑似感染的猪只需要迅速隔离,将疑似病例转移到预先设定的远离健康猪群并有严格的生物安全措施的隔离区域,隔离期间严格监测疑似病例的健康状况,并记录所有相关的临床症状,之后在进行疾病诊断的过程中,立即采集疑似病例的血液、组织样本,送往具备ASF检测能力的实验室进行检验,采样和运输过程中遵循严格的生物安全协议,以防止样本污染和病毒的潜在扩散。一旦被确诊为ASF,立即执行扑杀并进行无害化处理,所有确诊的病例及其密切接触的猪只均采取化学或物理方法进行无害化处理,例如焚烧或深埋,处理过程中要确保病原体被彻底消灭,防止病毒通过土壤或水源再次传播[16]。此外,对于受到该影响的养殖场区域,必须进行彻底的清洁和消毒工作,包括猪舍、运输工具和饲养设备等所有可能被病毒污染的地方,使用经批准的消毒剂按照制造商的指导方针进行使用,以确保消毒效果。最后加强疫情监测和后续追踪,对于经历过ASF的养殖场,需要在一定时期内继续进行疾病监测,确保该病得到完全控制,同时对病情处理过程中的所有活动和结果进行记录,为未来的病情预防和控制提供参考。

3 非洲猪瘟治疗技术分析

3.1 疫苗研发技术

3.1.1 灭活疫苗 灭活疫苗基本原理是通过使用经过特定处理的ASFV,这种处理能够杀死或灭活病毒,使其失去感染性,但仍能激发宿主动物的免疫反应[17]。周鑫韬[18]研究表明,在制备灭活疫苗之前,需要选择一株适宜的ASFV毒株作为疫苗株,该毒株应具备良好的免疫原性和低毒性,采用物理或化学方法灭活病毒。常见的灭活方法包括使用甲醛、β-丙内酯或紫外线照射等,随后将灭活的病毒与适当的佐剂进行混合,以增强免疫反应。通过临床试验,验证疫苗的安全性、免疫原性和保护效果。尽管灭活疫苗在理论上是一种安全有效的防控手段,但在ASF疫苗研发中面临着一些挑战,杨佳萍等[19]综合分析了ASF疫苗和病原学诊断技术研究进展,表明灭活疫苗不能提供足够长期的保护,以及在高度变异的ASFV毒株面前效果有限。疫苗生产成本、稳定性及其大规模生产和应用中的可行性也是研发过程中需要考虑的因素。

3.1.2 重组疫苗 在ASF治疗技术中,重组疫苗开发是一个前沿领域,主要利用分子生物学技术,针对ASFV的特定基因或蛋白进行设计,重组疫苗通过将ASFV的一个或多个免疫原基因插入无害的载体病毒或细菌中,以激发宿主动物的免疫反应,从而产生针对ASFV的免疫保护[19]。具体方法包括使用嗜热链球菌、腺病毒或疱疹病毒等作为载体,如张霁辉[20]以大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚基作为佐剂,与ASFV的CD2v蛋白和p49蛋白共同构建的重组核酸疫苗,具有良好的免疫原性。通过基因工程技术将ASFV的免疫原基因(如p72蛋白、p54蛋白等)插入载体的基因组中,然后将这种重组病毒或细菌引入猪体,在猪体内生成ASFV的免疫原蛋白,从而诱发猪只产生针对这些蛋白的免疫反应。这种免疫反应能够在猪只遇到ASFV时提供保护,减少病毒的复制和传播。

3.2 药物治疗技术

3.2.1 抗病毒药物 在抗病毒药物设计中,一种主要的研究方法是筛选现有的抗病毒药物库,寻找能够抑制ASFV复制和传播的化合物,如国师榜[21]利用原代猪肺泡巨噬细胞建立了一种抗病毒化合物筛选模型,共筛选到6种对ASFV抑制率大于90%的候选化合物,通过体外细胞实验和体内动物感染实验,评估药物降低ASFV滋生的能力,监测病毒载量的变化,验证了Brincidofovir对ASFV感染在体外和体内的抑制活性。定向药物设计通过结构生物学和分子建模设计新的分子,这些分子可以特异性地结合到病毒的关键蛋白或酶上,阻断其功能,从而抑制病毒的生命周期,例如Goulding等[22]研究发现,ASFV的DNA聚合酶和RNA聚合酶的活性位点是药物研究的潜在靶标,抑制其表达,以阻止病毒的快速复制。

3.2.2 免疫调节剂 免疫调节剂是指能够调整宿主免疫系统反应的药物或化合物,以增强机体对ASFV的防御能力。例如,使用干扰素(IFN)可以激活猪只的天然免疫反应,特别是类型Ⅰ干扰素如IFN-α和IFN-β,可有效抑制ASFV复制的效果[23]。此外,实验中还采用基于Toll样受体(TLR)激动剂的佐剂,这类佐剂能刺激先天免疫应答并增强疫苗引发的适应性免疫响应。许文杰[24]研究表明,可给猪只注射含有TLR激动剂的佐剂,这些佐剂通过模拟病原体的特定分子模式工作,以激活宿主的免疫细胞,TLR3的激动剂Poly(I:C)能够模拟双链RNA病毒的遗传材料,并激发一系列免疫细胞产生抗病毒状态,以增强宿主细胞对ASFV入侵的抵抗力,降低病毒的复制率,减轻疾病严重程度,提高生存率。

3.2.3 支持性治疗 支持性治疗主要是缓解症状、维持生命体征稳定,并降低次生感染风险,以提高生存率和恢复质量。在水分与营养支持方面,需要确保动物有足够的水分摄入,通过静脉或皮下注射补充电解质和营养素,尤其是当猪只出现食欲下降或不能自主饮食时进行治疗。丁伟洋[25]研究认为,抗生素可以用来预防或治疗继发的细菌性感染,防止因细菌性感染加重猪的疾病状况,在解热和抗炎疗法中,使用非甾体抗炎药如布洛芬可控制高热和减轻炎症反应,帮助改善猪的整体舒适度和生存机会。

综上,本文介绍了常用ASF检测手段,包括早期诊断、分子生物学检测以及血清学检测;阐述了ASF的防治手段与治疗技术,对于ASF的防治需要重点关注日常消毒、加强市场监管、做好病猪处理和增强防控意识等方面;对于ASF的治疗技术应用,重点关注疫苗以及药物两个方面。为生猪养殖人员提供参考,以实现对ASF的有效控制,促进生猪养殖业的可持续发展。

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(责任编辑:胡立萍)