安肠组方联合磷酸铝凝胶对宫颈癌放疗致放射性肠炎患者炎症因子、免疫功能以及肠道菌群的影响

2024-05-17孙月红何新颖贾大鹏杜强胡婷婷杨洪娟孙云川

广州中医药大学学报 2024年5期

孙月红，何新颖，贾大鹏，杜强，胡婷婷，杨洪娟，孙云川

（河北省沧州中西医结合医院，河北沧州 061000）

放射性肠炎（radiation enteritis，RE）属于宫颈癌等恶性肿瘤在进行放疗后所发生的最为常见的并发症之一，在临床中的发病率较高[1-2]。有临床研究[3]指出，约75%的宫颈癌患者在进行放疗后会出现放射性肠炎，严重者会威胁患者的生命安全。目前，临床对于放射性肠炎主要采用营养支持、抗炎、止血等方式治疗[4-5]。安肠组方为本院临床验方，由仙鹤草、生地榆、白头翁、木香等中药材组成，具有健脾止泻、理气止痛、凉血清热、活血祛瘀、利水消肿等功效[6]。磷酸铝凝胶属于天然有机凝胶，能有效中和胃酸，改善胃内pH 值，同时能降低胃酸的过度分泌，减轻炎症反应，生成胃肠道黏膜保护膜，加速组织修复[7]。基于此，本研究探讨了安肠组方联合磷酸铝凝胶对宫颈癌放疗后所致放射性肠炎患者炎症因子、免疫功能以及肠道菌群的影响。现将研究结果报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象及分组选取2021 年1 月～2023 年1 月在河北省沧州中西医结合医院进行宫颈癌放疗后所致放射性肠炎的患者，共78 例。根据就诊先后顺序，采用随机数字表法将患者随机分为联合组41 例和参照组37 例。本研究符合医学伦理学要求并通过河北省沧州中西医结合医院医学伦理委员会的审核批准（批件号：1256HD15）。

1.2 纳入标准①符合《中国放射性直肠炎诊治专家共识（2018 版）》中的诊断标准[8]；②出现腹痛、腹泻以及黏液或血性分泌物增多；③既往无消化道、肠道手术史；④卡氏评分＞70 分；⑤自愿参加本研究并签署知情同意书；⑥依从性好，能配合治疗和临床资料收集的患者。

1.3 排除标准①存在先天性心脏病、肝肾功能障碍等疾病的患者；②存在炎症性肠病、慢性阿米巴痢疾等肠道疾病的患者；③存在严重的血液性、传染性、免疫性疾病的患者；④存在其他恶性肿瘤疾病的患者；⑤临床病历资料不齐全的患者。

1.4 治疗方法

1.4.1 参照组给予磷酸铝凝胶治疗。用法：磷酸铝凝胶（生产厂家：韩国保宁制药株式会社；批准文号：国药准字HJ20 171269；规格：20 g/袋×4 袋），每次1 袋，每天3 次，开水冲服。疗程为15 d。

1.4.2 联合组在参照组的基础上给予安肠组方保留灌肠治疗。安肠组方的基本方药组成：仙鹤草、生地榆各30 g，茯苓、白头翁、白术各15 g，炒白芍12 g，木香9 g，甘草6 g，黄连5 g。随症加减：腹痛明显者可加乌药、延胡索各5 g；黏液多者可加薏苡仁、枳壳各5 g；出血多者可加三七粉6 g。上述中药由河北省沧州中西医结合医院中药房提供并由医院制剂室统一制备（每剂中药加水600 mL，文火煎煮30 min 后浓缩至100 mL）。用法：每次100 mL，每天1次，加热到温度适宜后保留灌肠。疗程为15 d。

1.5 观察指标及疗效评价标准

1.5.1 中医证候积分分别于入组前1 d 及治疗结束后1 d，评估患者的中医证候积分情况，具体包括黏液脓血便、腹泻、里急后重、腹痛等[9]。按症状严重程度分正常、轻度、中度、重度4级，主症（黏液脓血便、腹泻）分别赋值0、2、4、6 分，次症（里急后重、腹痛）分别赋值0、1、2、3 分。积分值越高，表示患者的病情程度越严重。

1.5.2 血清炎症因子水平检测分别于入组前1 d

及治疗结束后1 d 的清晨7 时左右，抽取患者空腹静脉血4 mL，行离心处理（速率为4 700 r/min、半径为12 cm，时间为6 min），分离血清后将其置于低温-75 ℃中保存待测。采用流式细胞仪检测2 组患者的血清白细胞介素2（interleukin-2，IL-2）、降钙素原（procalcitonin，PCT）水平。

1.5.3 免疫功能指标检测分别于入组前1 d 及治疗结束后1 d，抽取患者空腹静脉血4 mL，采用免疫透射比浊法检测T 淋巴细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

1.5.4 肠道菌群检测分别于入组前1 d 及治疗结束后1 d，采用改良TIANamp Stool DNA Kit 方法进行粪便细菌基因组总DNA 提取以计算乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠埃希菌的水平。于清晨8时，取自然排出的新鲜粪便样品2 g以上，将其分装于无菌离心管内，置于-75 ℃的低温环境中保存。将1.38 mL缓冲液加入至无菌离心管内，进行1 min 摇晃均匀。摇晃均匀后通过离心机（转速为4 700 r/min，半径为10 cm，时间为3 min）进行上清液转移，在转移的上清液中取1.55 mL，放置于全新的灭菌管内。将4.20 µL 的102 mg/mL RNA 酶加入至其中，随后放置一旁使其保持静止状态，静置5 min。收集管壁内滴液，加入211 µL 无水乙醇，摇晃均匀；将上一步所得溶液加入收集管吸附柱CR2 中，在37 ℃的常温室内进行7 min 静置，并将48µL 的PBS缓冲液向吸附膜中间进行滴加，离心3 min后，弃掉吸附柱CR2。记录DNA 质量及产率，计算肠道菌群中乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠埃希菌水平。

1.5.5 临床疗效评价标准参照文献[10]。显效：患者的临床症状得到显著改善，各项功能基本恢复至正常范围内；有效：患者的临床症状和各项功能均得到一定程度改善；无效：患者的临床症状和各项功能均无任何好转。总有效率（%）=（显效例数+有效例数）/总病例数×100%。

1.6 统计方法应用SPSS 26.0统计学软件进行数据的统计分析。计量资料用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用两独立样本t检验，组内治疗前后比较采用配对t检验；计数资料用率或构成比表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2 组患者的基线资料比较表1 结果显示：2 组患者的年龄、病理类型、宫颈癌分期、放疗剂量等基线资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），表明2 组患者的基线特征基本一致，具有可比性。

表1 2组宫颈癌放疗后所致放射性肠炎患者基线资料比较Table 1 Comparison of baseline data between the two groups of patients with radiation enteritis caused by radiotherapy for cervical cancer[± s或例（%）]

2.2 2组患者治疗前后中医证候积分比较表2结果显示：治疗前，2 组患者的黏液脓血便、腹泻、里急后重、腹痛等中医证候积分比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。治疗后，2组患者的黏液脓血便、腹泻、里急后重、腹痛等中医证候积分均较治疗前降低（P＜0.05），且联合组的降低幅度均明显优于参照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。

表2 2组宫颈癌放疗后所致放射性肠炎患者治疗前后中医证候积分比较Table 2 Comparison of TCM syndrome scores between the two groups of patients with radiation enteritis caused by radiotherapy for cervical cancer before and after treatment （± s，分）

注：①P＜0.05，与治疗前比较；②P＜0.01，与参照组治疗后比较

2.3 2组患者治疗前后血清炎症因子水平比较表3和图1 结果显示：治疗前，2 组患者血清IL-2、PCT 水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。治疗后，2 组患者血清IL-2、PCT 水平均较治疗前降低（P＜0.05），且联合组的降低幅度均明显优于参照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。

图1 宫颈癌放疗后所致放射性肠炎患者的炎症因子流式图Figure 1 Results of flow cytometry for inflammatory factors in the patients with radiation enteritis caused by radiotherapy for cervical cancer

表3 2组宫颈癌放疗后所致放射性肠炎患者治疗前后血清炎症因子水平比较Table 3 Comparison of serum levels of inflammatory factors between the two groups of patients with radiation enteritis caused by radiotherapy for cervical cancer before and after treatment （± s）

注：IL-2：白细胞介素2；PCT：降钙素原。①P＜0.05，与治疗前比较；②P＜0.01，与参照组治疗后比较

2.4 2组患者治疗前后免疫功能指标比较表4结果显示：治疗前，2 组患者的T 淋巴细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。治疗后，2 组患者的T 淋巴细胞亚群CD4+、CD4+/CD8+水平均较治疗前升高（P＜0.05），CD8+水平均较治疗前降低（P＜0.05），且联合组对CD4+、CD4+/CD8+水平的升高幅度及对CD8+水平的降低幅度均明显优于参照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。

表4 2组宫颈癌放疗后所致放射性肠炎患者治疗前后免疫功能指标T淋巴细胞亚群比较Table 4 Comparison of immune function indicators of T lymphocyte subsets between the two groups of patients with radiation enteritis caused by radiotherapy for cervical cancer before and after treatment （± s）

注：①P＜0.05，与治疗前比较；②P＜0.01，与参照组治疗后比较

2.5 2组患者治疗前后肠道菌群水平比较表5结果显示：治疗前，2 组患者肠道菌群中的乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠埃希菌水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。治疗后，2 组患者肠道菌群中的乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠埃希菌水平均较治疗前升高（P＜0.05），且联合组的升高幅度均明显优于参照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。

表5 2组宫颈癌放疗后致放射性肠炎患者治疗前后肠道菌群水平比较Table 5 Comparison of intestinal flora levels between the two groups of patients with radiation enteritis caused by radiotherapy for cervical cancer before and after treatment[± s，（log10CFU/g）]

注：①P＜0.05，与治疗前比较；②P＜0.01，与参照组治疗后比较

2.6 2组患者临床疗效比较表6结果显示：治疗15 d 后，联合组的总有效率为90.24%（37/41），参照组为70.27%（26/37），组间比较（χ2检验），联合组的临床疗效明显优于参照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表6 2组宫颈癌放疗后致放射性肠炎患者临床疗效比较Table 6 Comparison of clinical efficacy between two groups of patients with radiation enteritis caused by radiotherapy for cervical cancer[例（%）]

3 讨论

宫颈癌为临床女性常见生殖道恶性肿瘤，早期症状不明显，只有部分患者可能会出现阴道排液、出血等症状，半数以上患者在确诊时已进入晚期宫颈癌[11]。美国国立综合癌症网络（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）指南对于晚期宫颈癌的治疗推荐同步放化疗的治疗方式，在临床中也取得了较好的治疗效果。但放化疗后患者自身会出现不同程度的毒副反应，其中放射性肠炎为宫颈癌放疗后常见的毒副反应。若患者出现3级以上的放射性肠炎，需暂停放疗，对患者的放疗生物效应及生活质量造成较大的影响[12]。放射性肠炎在临床中常表现为腹痛、腹泻、大便次数增多等症状。而造成放射性肠炎的主要发病机制是由于宫颈癌患者肠道内受到射线照射后，肠黏膜上皮细胞遭受破坏、变性脱落，造成肠黏膜充血，导致炎性细胞浸润。早期肠黏膜细胞受到抑制后会造成小动脉出现闭塞、发生肿胀，造成肠壁缺血、糜烂[13]。目前，临床上大多使用磷酸铝凝胶治疗。研究[7]表明，磷酸铝凝胶能有效中和胃酸，改善胃内pH 值，同时能降低胃酸的过度分泌，减轻炎症反应，生成胃肠道黏膜保护膜，加速组织修复。但我们在临床中发现，单纯应用磷酸铝凝胶治疗，其疗效仍存在一定局限性。

根据放射性肠炎的临床表现，可将其归属于中医学的“肠澼”等范畴。有关其病机，《景岳全书·泄泻》曰：“泄泻之本，无不由于脾胃”，故有脾虚生湿、湿热夹杂之说。中医学认为，湿热毒邪郁结于肠腑，与气血相搏，致脂膜、肠络损伤，造成下痢脓血、肠道功能出现逆乱和气机失调，从而导致腹胀、腹痛等症状的发生。本研究所用的安肠组方中，仙鹤草、三七粉止血收涩；生地榆凉血清热；茯苓、白术宁心健脾、渗湿利水；白头翁解毒止痢、凉血清热；炒白芍缓急止痛、养血调经；木香、黄连燥湿止泻、清热止痛；甘草缓急和中；诸药合用，共奏健脾止泻、理气止痛、凉血清热、活血祛瘀、利水消肿等功效。现代药理学研究证实，安肠组方中的多味中药能对金黄色葡萄球、伤寒杆菌、铜绿假单胞菌等细菌进行干预抑制，加速肠黏膜修复，提高患者机体免疫力，起到较好的镇痛效果，加速放射性损伤修复。本研究结果显示：在疗效方面，治疗15 d后，联合组的总有效率为90.24%（37/41），参照组为70.27%（26/37），组间比较，联合组的临床疗效明显优于参照组（P＜0.05）。在中医证候方面，治疗后，2 组患者的黏液脓血便、腹泻、里急后重、腹痛等中医证候积分均较治疗前降低（P＜0.05），且联合组的降低幅度均明显优于参照组（P＜0.01）。研究结果表明，安肠组方联合磷酸铝凝胶对宫颈癌放疗后所致放射性肠炎患者进行治疗，能有效改善患者临床症状，提高患者生活质量，临床疗效显著。

放射性肠炎是长臂毛细血管内皮细胞发生损伤，甚至出现凋亡、坏死，进而造成肠道黏膜出血水肿、溃疡，导致大量嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润，周围血管扩张，肠道血管通透性增加，造成病原体入侵至体内，加重炎症反应[14-15]。而血清白细胞介素2（interleukin-2，IL-2）、降钙素原（procalcitonin，PCT）等炎症因子能较好地反映机体的炎症反应水平。本研究结果显示，治疗后，2 组患者的血清IL-2、PCT 水平均较治疗前降低（P＜0.05），且联合组的降低幅度均明显优于参照组（P＜0.01）。研究结果表明，安肠组方联合磷酸铝凝胶对宫颈癌放疗后所致放射性肠炎患者进行治疗，可通过降低IL-2、PCT 水平，进一步降低机体内炎症反应情况，对T细胞的稳态进行改善，对肠上皮屏障进行修复，从而对放射性肠炎达到较好的治疗效果。

免疫功能方面，本研究结果显示，治疗后，2 组患者的T 淋巴细胞亚群CD4+、CD4+/CD8+水平均较治疗前升高（P＜0.05），CD8+水平均较治疗前降低（P＜0.05），且联合组对CD4+、CD4+/CD8+水平的升高幅度及对CD8+水平的降低幅度均明显优于参照组（P＜0.01）。研究结果表明，安肠组方在减轻炎症反应的同时，能够对T淋巴细胞亚群中的CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平进行调节，以恢复免疫系统的正常平衡。因此，本课题组认为，安肠组方联合磷酸铝凝胶能对宫颈癌放疗后所致放射性肠炎患者机体内的T淋巴细胞亚群进行调节，对患者的免疫微环境进行改善，从而降低机体内炎症反应，提高机体免疫功能，提升患者的生活质量[16-17]。

正常人肠道内存在的多种菌群以及自身肠道内的肠黏膜生物屏障能对肠道内的微环境的平衡进行维持。而放疗致放射性肠炎的发生会损伤肠道内屏障，增加肠道内通透性，使肠道菌群出现失衡[18]。研究[19-20]证实，放射性肠炎患者肠道内的微生物会出现多样性变化，肠道菌群发生失调，造成炎症的发生，与肠道炎症彼此之间相辅相成。而肠道菌群出现紊乱，造成致病菌侵害机体，加重肠道损伤。因此，对肠道菌群的失衡进行及时调节和修复，是治疗放疗致放射性肠炎的新治疗措施。本研究结果显示，在肠道菌群方面，治疗后，2 组患者的乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠埃希菌水平均较治疗前升高（P＜0.05），且联合组的升高幅度均明显优于参照组（P＜0.01）。研究结果表明，安肠组方联合磷酸铝凝胶能显著改善宫颈癌放疗后所致放射性肠炎患者的肠道菌群失衡情况。

综上所述，安肠组方联合磷酸铝凝胶治疗宫颈癌放疗致放射性肠炎患者，能显著改善患者的临床症状，减轻炎症反应，提高机体免疫功能，平衡肠道菌群，临床疗效显著，具有较高的临床推广和应用价值。