血清S-CD105、periostin、TK1水平与非小细胞肺癌根治术后复发的关系研究

黄光俊,吕增波,张朝青（.贵州省盘州市人民医院,贵州 盘州 553000;.云南省曲靖市第一人民医院,云南 曲靖 655000）

非小细胞肺癌（NSCLC）是肺癌最常见的病理类型，早中期NSCLC以手术治疗为首选，但是癌组织极易形成微转移，导致肿瘤复发，且早期不易发现[1]。NSCLC术后复发可导致全身癌细胞扩散，预后较差，中位生存期为11.4-17.7个月[2]。因此探寻预测NSCLC根治术后复发的生物学指标十分重要。可溶性CD105（SCD105）是CD105的可溶性形式，CD105在内皮细胞上表达上调，调控新生血管形成，是癌症预后的潜在生物指标[3]。骨膜素（periostin）是一种多功能的细胞外基质蛋白，可通过激活PI3K/Akt信号通路促进癌细胞转移，与肿瘤发生进展密切相关[4]。胸苷激酶（TK1）是一种参与嘧啶代谢的胞质酶，可催化γ-磷酸基团添加到胸苷，TK1在恶性肿瘤中过表达，且与预后不良有关[5]。本研究旨在探讨血清S-CD105、periostin、TK1水平与NSCLC根治术后复发的关系，为NSCLC根治术后复发诊治提供参考依据，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2019年1月-2021年6月我院收治的127例NSCLC患者，纳入标准：①均接受肺癌根治手术和淋巴结系统清扫，经术后病理证实为NSCLC，符合《中华医学会肺癌临床诊疗指南（2018版）》[6]中NSCLC诊断标准；②术后定期接受随访，至少6个月；③患者及家属对研究内容知情同意并签署同意书。排除标准：①合并其他恶性肿瘤；②术前CT、MRI、骨扫描等影像检查已证实肿瘤细胞已发生远处转移；③随访失联。本研究已获得我院伦理委员会批准。

1.2 实验室检查 所有NSCLC患者术后48h内采集静脉血，检测血清S-CD105、periostin、TK1水平。血标本处理：采集外周静脉血3ml注入干燥试管，待血液凝固后取上层血清离心（2000rpm，半径15cm，时间10min），然后取上清液冷冻保存。采用UniCel DxI 800化学发光免疫分析仪（美国贝克曼库尔特公司）检测血清TK1水平，采用ST-360型96孔板多功能全自动酶标免疫检测仪（济南巴艾贝斯生物工程有限公司）运用酶联免疫吸附试验检测S-CD105、periostin水平，试剂盒购自美国赛默飞公司。

1.3 临床资料收集 收集患者年龄、性别、吸烟史、组织学分型（鳞癌、腺癌、其他）、分化程度（高分化、中分化、低分化）、肿瘤直径（≥3cm、＜3cm）、T分期（T1、T2、T3）、纵隔淋巴结转移、手术方式（全肺切除、肺叶切除、肺叶袖式切除）、肿瘤标志物[采用酶联免疫吸附试验检测血清癌胚抗原（CEA）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平]。

1.4 随访 从手术结束后随访至患者复发或随访期满，随访期为24个月，每3个月门诊复查一次，接受CT、PET-CT、超声、纤支镜、MRI、骨扫描、血清肿瘤标志物等检查，确定复发情况，根据术后是否发生复发将患者分为复发组和无复发组。

1.5 统计学分析 使用SPSS25.00进行数据分析，经Kolmogorov–Smirnov检验的计量资料符合正态分布以（）表示，采用独立样本t检验。计数资料以[例（%）]表示，采用χ2检验。多因素Logistic回归分析NSCLC术后复发的危险因素。受试者工作特征曲线（ROC）分析S-CD105、periostin、TK1以及联合预测NSCLC术后复发的价值。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 两组临床资料以及血清S-CD105、periostin、TK1水平比较随访期间53例复发，复发率41.73%。复发组年龄、中低分化、T3、纵隔淋巴结转移、血清S-CD105、periostin、TK1、CEA、NSE水平高于无复发组（P＜0.05），两组性别、吸烟史、组织学分型、肿瘤直径、手术方式比较，无统计学差异（P＞0.05），见表1。

表1 复发组和无复发组基线资料、血清S-CD105、periostin、TK1水平差异[,n(%)]

表1 复发组和无复发组基线资料、血清S-CD105、periostin、TK1水平差异[,n(%)]

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2.2 影响NSCLC术后复发的危险因素分析 建立Logistic回归方程，以年龄、分化程度、T分期、纵隔淋巴结转移、S-CD105、periostin、TK1、CEA、NSE为自变量，NSCLC术后复发为因变量（赋值：0=否，1=是），ENTER法筛选变量（入=0.05，出=0.10）。结果显示，纵隔淋巴结转移、高水平S-CD105、高水平periostin、高水平TK1是NSCLC术后复发的危险因素（P＜0.05），见表2。

表2 影响NSCLC术后复发的危险因素分析

2.3 血清S-CD105、periostin、TK1预测NSCLC术后复发的价值血清S-CD105、periostin、TK1预测NSCLC术后复发的曲线下面积分别为0.700、0.717、0.718，其中periostin、TK1曲线下面积高于CEA（Z=2.141、2.086，P= 0.032、0.037），S-CD105与CEA比较，无统计学差异（Z=1.747，P=0.081），S-CD105、periostin、TK1曲线下面积均高于NSE（Z=2.766、3.139、2.905，P=0.006、0.002、0.004）。联合S-CD105、periostin、TK1预测NSCLC术后复发的曲线下面积为0.892，高于单独S-CD105、periostin、TK1（Z=4.358、3.848、3.611，P=0.000、0.000、0.000），见表3和图1。

表3 S-CD105、periostin、TK1预测NSCLC术后复发的效能

3 讨论

早期预测NSCLC根治性手术后复发有助于指导临床治疗，为临床术后联合放化疗提供依据。常规血清肿瘤标志物检测方便、经济，但是灵敏度和特异性不理想，在肿瘤复发评估中应用较为局限，因此有必要探讨更为敏感的生物标志物。

CD105又称内皮糖蛋白，是一种I型同源二聚体整合跨膜糖蛋白和辅助转化生长因子-β（TGF-β）受体，主要表达于血管内皮和基质细胞，在增殖的内皮细胞上特异性高度表达，诱导内皮细胞活化和增殖，促使新生血管生成，与恶性肿瘤发生和进展有关[7]。S-CD105作为S-CD105的可溶性形式，与细胞中S-CD105表达有密切相关性。本研究发现S-CD105与NSCLC根治术后复发也存在密切关系，复发组血清S-CD105水平明显高于无复发组，S-CD105水平增高是NSCLC术后复发的危险因素，说明S-CD105水平增高可能促使NSCLC术后肿瘤复发。分析可能的机制为：CD105通过TGF-β1信号转导促使内皮细胞增殖分化，基质内内源性血管生长因子（VEGF）的合成，诱导新生血管和血管网络形成[7]，导致NSCLC增殖、迁移和复发。

periostin是一种由信号肽组成的多模块蛋白质，在骨膜、成纤维细胞、富含胶原蛋白的结缔组织中表达，periostin的FAS1域和N端EMI域与细胞外基质蛋白结合调节细胞增殖分化，促进骨发育，参与组织修复和上皮-间充质转换过程[8]。研究[9]表明，periostin与NSCLC也存在密切关系，NSCLC癌症相关成纤维细胞的periostin表达增高，且与NSCLC病理分期、恶性程度和淋巴结转移有关。本研究结果发现periostin与NSCLC根治术后复发亦有关，periostin水平增高是NSCLC术后复发的危险因素，表明periostin可作为NSCLC术后复发的预测指标。上皮间质转化与肺癌术后复发有关，periostin可能通过p38/细胞外信号调节激酶信号通路促使Snail和Twist表达，促使上皮间质转化，增加细胞迁移潜力[10]，导致肿瘤复发。

TK1是一种DNA补救途径酶，在胞质溶胶内转化为单磷酸盐形式（dTMP），dTMP被胞质溶胶内连续酶转化为三磷酸形式的脱氧胸苷三磷酸（dTTP），dTTP再通过核孔复合物被动输入细胞核，参与DNA合成和转录[11]。有研究[12]显示，TK1水平与乳腺癌复发、转移均存在正相关关系。本研究发现TK1与NSCLC患者根治术后复发亦存在密切关系，TK1水平增高是NSCLC术后复发的危险因素，提示TK1参与NSCLC术后肿瘤复发过程，推测可能的机制为MAP激酶途径激活上调TK1表达，TK1被转录因子MAZ转录上调，TK1通过诱导生长和分化因子15表达促进肺癌细胞生长，增加癌细胞侵袭性和转移能力[13]，导致肿瘤复发。

本研究ROC分析结果显示S-CD105、periostin、TK1预测NSCLC术后复发的曲线下面积高于常规肿瘤标志物CEA、NSE，说明S-CD105、periostin、TK1在NSCLC预后预测中具有较高的价值。联合S-CD105、periostin、TK1后预测效能较单独指标明显增高，提示联合检测可提高预测效能，为临床NSCLC根治术后复发的预判提供更可靠的信息。回归分析还显示纵隔淋巴结转移与NSCLC根治术后复发有关，临床可结合高危因素和血清学标志物识别高复发风险患者，强化术后放化疗，以控制病情，预防肿瘤复发。

总之，NSCLC根治术后复发患者血清S-CD105、periostin、TK1水平均增高，S-CD105、periostin、TK1水平增高是NSCLC患者术后复发的危险因素，可作为复发风险的预测指标。