艾可特肠佳粉剂对大菱鲆生长性能及肠道健康的影响

2024-03-14周佩林李丽叶仕根张静崔艳红单云盟张涛张劲松

养殖与饲料 2024年3期

周佩林，李丽，叶仕根，张静，崔艳红，单云盟，张涛，张劲松*

1.大连海洋大学水生动物医院，辽宁大连 116023；

2.葫芦岛市现代农业发展服务中心，辽宁葫芦岛 125000；

3.北京诚致中和生物科技有限责任公司，北京 100010

大菱鲆（Scophthalmus maximus），属蝶形目（Pleuronectiformes）、鲆科（Bothidae），是1 种冷水性深海底层鱼类[1]，于1992 年引入我国，是中国比较重要的经济鱼类养殖品种之一，现已成为我国北方工厂化养殖的重要经济海水鱼类[2]。据2023 年渔业统计年鉴统计，我国大菱鲆产量为100 694 t，给养殖户带来巨大的经济收益。但随着养殖规模不断扩大、集约化程度不断提高，大菱鲆养殖环境逐渐恶化、病害频发，给大菱鲆养殖业带来了严重的经济损失[3]。主要病毒性疾病有呼肠弧病毒病、虹彩病毒病[4]，细菌性疾病有弧菌病、疖疮病[5]。抗生素类药物的使用有效解决了养殖过程中的病害问题，但长期使用会导致病原菌耐药性、药物残留以及水环境污染等问题，严重制约了大菱鲆养殖产业的健康发展[6]。肠道是鱼类非常重要的物理屏障，可以抵抗病原微生物对鱼的影响[7]。因此，如何从改善肠道组织结构来提高鱼体快速健康生长，对水产养殖业健康发展具有重要意义。

艾可特肠佳是西班牙百卫公司研发的功能性植物源性添加剂，其主要成分包括鞣花酸、菊粉、大蒜素等，是1种很好的肠道绒毛促进剂，可促进肠道绒毛更新再生，修复由霉菌毒素、抗生素等引起的肠黏膜损伤，提高肠道对饲料的消化能力和对营养物质的吸收能力，维持肠道菌群平衡，减少致病菌营养竞争，降低发病率等特点[8]。本试验以大菱鲆为研究对象，探讨大菱鲆商业饲料中添加剂量为0.1%的艾可特肠佳粉剂对其生长性能及肠道健康的影响，为艾可特肠佳粉剂在大菱鲆和其他鱼类养殖中的应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

试验所用大菱鲆均为1个月前从山东威海购买的小苗，分别在葫芦岛A、B 2个养殖场开展21周的养殖试验。A 养殖场所用鱼苗平均初始体长为（10±1）cm，体质量为（11±0.5）g；B养殖场所用鱼苗初始体长为（12±1）cm，体质量为（40±5）g。

1.2 试验饲料

饲料为从山东正合饲料有限公司购置的商业饲料，试验组饲料添加艾可特肠佳粉剂为0.1%，对照组添加量为0，添加完成后混匀并充分搅拌。饲料主要成分见表1。

表1 饲料组成和营养成分含量

1.3 养殖管理

试验采用自然光照，养殖用水体积为21 m3的水池，养殖用水为深井水，流水养殖，试验中养殖水温为15～18 ℃，盐度25‰～30‰，溶解氧为7.5 mg/L。生长试验开始时，停食24 h，选择大小均匀、体格健壮且体表无病的大菱鲆幼鱼，称质量后随机分配在6 个水池内（1 个试验组，1 个对照组，每组3 个重复），每池（500±50）尾鱼，每天的饲料投喂量按照大菱鲆体质量的2.5%～3.0%投喂，投喂2 次（08:30、17:30），养殖周期为21 周。

1.4 生长指标的测定

试验结束前，对禁食24 h 后的大菱鲆进行称质量，计算其平均体质量及平均体长。主要检测特定生长率(SGR，%)、增重率(WG，%)、肥满度（CF，g/cm³），计算公式如下[9]：

式中：Wt为平均末质量（g），W0为平均初质量（g），t为试验时间（d），W为体质量，L为体长。

1.5 样品收集及肠道组织切片测定

试验结束后停食24 h，每组随机取5 尾鱼进行解剖，分离出的后肠段用无菌生理盐水冲洗干净，滤纸吸干表面水分后置于甲醛固定液中固定24 h，室温保存。固定好的肠道组织经修剪、脱水、包埋、切片、染色、中性树脂封片，最后制成镜检合格的样片[10]，显微镜下观察肠道组织结构，结果以“肠道绒毛长度:肌层厚度”表示。

1.6 数据统计分析

图像用ImageJ软件进行测量（测量肠道后肠的绒毛长度、肌层厚度），试验数据用Excel 整理后采用Graphpad Prism 9.5 进行t检验和显著性分析，数据以“平均值±标准差”表示，以P＜0.05 为差异性显著。

2 结果与分析

2.1 艾可特肠佳粉剂对大菱鲆生长性能的影响

由表2 可知，与对照组相比，在大菱鲆饲料中添加0.1%艾可特肠佳粉剂对大菱鲆的试验末质量、体长、特定生长率、增重率、肥满度并无显著影响。

表2 饲料中添加艾可特肠佳粉剂对大菱鲆生长性能的影响

2.2 艾可特肠佳粉剂对大菱鲆肠道组织的影响

由图1 可知，与对照组相比，试验组大菱鲆肠道绒毛间排列整齐，绒毛分枝增多。由图2 可知，与对照组相比，添加0.1%艾可特肠佳粉剂的试验组大菱鲆肠道绒毛长度极显著增加65.8%，肌层厚度显著增加44.7%，绒毛长度与肌层厚度比值显著增加38.9%。

图2 饲料中添加艾可特肠佳粉剂对大菱鲆肠道组织的影响

3 讨论

3.1 艾可特肠佳粉剂对大菱鲆生长性能的影响

目前，大菱鲆养殖是我国主要鱼类产业之一。集约化及工业化的养殖会污染水体，造成菌毒侵害鱼体，鱼类生活环境复杂，对大菱鲆生长性能造成不良影响，降低经济效益[11]。抗生素作为促生长添加剂，具有促进动物生长及增强抗病力的功能，但耐药性以及残留对人体有一定的危害。艾可特肠佳粉剂是1 种天然的植物生长促进剂，被视为具有健康、绿色且安全的抗生素替代潜力产品。罗兴等[12]研究结果表明，高脂饲料中添加含硫氨基酸对大菱鲆脂肪代谢具有调节作用，但在生长方面并无显著影响；刘芳等[13]研究结果显示，饵料中添加扇贝蒸煮液酶解产物对大菱鲆幼鱼的肥满度无显著影响；马季等[14]研究结果发现，植物原料替代饲料中鱼粉及鱼油对大菱鲆的增重率、特定生长率均无显著性差异，这与本研究结果一致。本研究中，与对照组相比，试验组大菱鲆的试验末质量和增重率均未达到显著性水平，这可能主要与本试验设计的目的侧重评估艾可特肠佳粉剂对大菱鲆肠道绒毛长度与肌层厚度的影响有关，因此试验设计中使用的粉剂并无额外过量添加，这与研究粉剂需求量的梯度试验不同。对生长无影响很可能是因为基础配方中的营养物质含量已经满足了大菱鲆的需求，且饵料利用效率高低与艾可特肠佳粉剂添加量有关。另外，受鱼的养殖密度与尾数的影响，前期试验组与对照组放置的大菱鲆尾数不同，密度过大是导致各组生长性能差异不显著的主要因素之一；加上后期进行分苗，导致差距更小。

3.2 艾可特肠佳粉剂对大菱鲆肠道组织的影响

鱼类肠道是营养物质消化和吸收的主要场所，是从外界获取物质、能量的媒介，起着抵御病原菌的重要作用[15]。本试验结果表明，添加0.1%肠佳粉剂对大菱鲆肠道绒毛及其肠壁厚度有明显的保护作用。鱼类肠道由黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜层4 个部分构成[16]，黏膜层是肠道进行营养物质消化吸收和肠道菌群黏附的主要场所[17]，肠道肌层可为肠道蠕动提供充足的动力，促进营养物质吸收[18]，因此，通过观察黏膜层和肌层的结构变化可直观地了解肠佳粉剂在肠道中发挥的作用。本研究结果发现，饲料中添加0.1%艾可特肠佳粉剂的肠道黏膜褶皱高度、肌层厚度显著高于对照组。郝甜甜等[19]研究结果发现，饲料中添加糖萜素对大菱鲆幼鱼的肠道绒毛长度、黏膜厚度有显著的影响；崔广鑫等[7]研究结果表明，在饲料中添加蜡样芽孢杆菌可以增加大菱鲆幼鱼肠黏膜皱襞高度、肌层厚度，显著改善幼鱼肠道组织结构，这与本研究结果一致。添加不同剂量的艾可特肠佳粉剂对大菱鲆是否有影响，还需要进一步研究。