EGFR、ALK、ROS-1基因在肺癌组织中表达及与其预后的关系

余春华 余淑华

肺癌为临床常见的恶性肿瘤之一,具有较高的发生率与死亡率[1]。近年,伴随临床对于分子生物学与肺癌驱动基因研究的持续开展,临床逐渐发现一些基因的表达与肺癌存在紧密联系[2]。表皮生长因子受体(EGFR)、间变型淋巴瘤激酶(ALK)、肉瘤致癌因子-受体酪氨酸激酶(ROS-1)三种基因的突变、融合会通过激活下游不同信号通路进而调节癌细胞的生长、繁殖、分化等生物学行为,但临床关于三者是否与肺癌患者预后存在关系临床尚未完全明晰。基于此,本研究以2019年2月至2020年2月本院收治的75例肺癌患者为研究对象,分析EGFR、ALK、ROS-1表达与患者预后间的联系。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2019年2月至2020年2月本院收治的75例肺癌患者。纳入标准:经病理检查证实;患者具有较为优良的依从性;未合并其它恶性肿瘤;意识清晰,可正常交流。排除标准:存在精神疾病者;合并全身性感染者;伴有传染性疾病者;存在血液系统疾病者;伴有凝血功能、免疫系统异常者;存在肝肾等脏器功能不全者。所有患者中男性42例,女性33例;年龄41～75岁,平均年龄(60.23±2.49)岁;病理类型:41例腺癌,34例鳞癌;临床分期:45例Ⅰ～Ⅱ期,30例Ⅲ～Ⅳ期;分化程度:39例低分化,36例中高分化;淋巴结转移:33例有,42例无。

1.2 方法

采集所有患者的癌组织与癌旁正常组织(距肿瘤组织边缘≥3 cm),将其分别划入观察组与对照组,采用免疫组化法测定其EGFR、ALK、ROS-1表达。检查措施:将癌组织、癌旁正常组织标本以10%甲醇溶液固定,用石蜡包埋,然后制作成4 μm切片;用柠檬酸钠缓冲液行抗原修复,滴入3%过氧化氢溶液,在室温下孵育15 min,结束后用磷酸缓冲盐溶液(PBS)洗涤3次;用10%山羊血清在室温下封闭30 min,滴加一抗,在4 ℃环境下过夜,次日再用PBS洗涤3次,滴加二抗后在室温下孵育30 min,最后染色、脱水、封片、镜检。阳性评估依据:①染色强度:不着色为0分;浅黄色为1分;棕黄色为2分;棕褐色为3分。②阳性表达率:<10%为0分;10%～40%为1分;41%～70%为2分;>70%为3分。两者成绩>3分为阳性,反之为阴性。

1.3 观察指标

(1)两者EGFR、ALK、ROS-1阳性表达率对比。(2)EGFR、ALK、ROS-1阳性表达与患者临床病理特征的关系。(3)EGFR、ALK、ROS-1阳性表达与患者生存率的关系。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 两组EGFR、ALK、ROS-1阳性表达率对比

观察组EGFR、ALK、ROS-1阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组EGFR、ALK、ROS-1阳性表达率对比(例,%)

2.2 EGFR、ALK、ROS-1阳性表达与患者临床病理特征的关系

EGFR、ALK、ROS-1阳性表达与患者年龄、性别、病理类型无关(P>0.05);与临床分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),见表2。

表2 EGFR、ALK、ROS-1阳性表达与患者临床病理特征的关系(例,%)

2.3 EGFR、ALK、ROS-1阳性表达与患者生存率的关系

随访3年后,EGFR、ALK、ROS-1阳性表达患者的生存率分别为56.52%(13/23)、46.15%(12/26)、42.11%(8/19),低于阴性表达患者的63.46%(33/52)、69.39%(34/49)、67.86%(38/56),差异有统计学意义(χ2=4.710、3.867、3.967,P=0.030、0.049、0.046)。

3 讨论

肺癌是源自肺部支气管黏膜或腺体的恶性肿瘤,其患病率与死亡率均处于较高水平[3-4]。肺癌的发病机制较为复杂,临床尚未完全明晰,通常认为与吸烟、职业暴露、空气污染等有关[5-6]。由于肺癌患病早期无明显症状,导致大部分患者确诊时多为中晚期,预后较差。因此,积极的明晰肺癌的发生机制,以指导临床施以及时的治疗,对于改善患者预后至关重要。

EGFR属于一跨膜糖蛋白,主要存在于基质、表皮与部分平滑肌细胞内,可通过磷酸化调节癌细胞的增殖与生长相关信号传导,与多种恶性肿瘤的发生发展与预后密切相关[7]。ALK是一种Ⅰ型膜糖蛋白,正常仅存在于神经系统内,且呈低水平,当其发生基因重排或基因融合后,将会刺激下游信号通路表达,增加癌变风险[8]。ROS-1属于酪氨酸激酶胰岛素受体基因,其异常表达会持续传递生长增殖型号,导致癌细胞出现异常增殖[9]。本研究结果显示,观察组EGFR、ALK、ROS-1阳性表达率高于对照组,且EGFR、ALK、ROS-1阳性表达与患者的临床分期、分化程度、淋巴结转移有关,提示在肺癌患者机体内,EGFR、ALK、ROS-1呈异常高表达,而其与肺癌的发生与发展存在紧密联系。分析可能与三者的阳性表达会激活多条下游信号通路,继而调控肿瘤细胞增殖与分化有关。本研究结果还显示,随访3年后,EGFR、ALK、ROS-1阳性表达患者的生存率分别为56.52%(13/23)、46.15%(12/26)、42.11%(8/19),低于阴性表达患者的63.46%(33/52)、69.39%(34/49)、67.86%(38/56),提示EGFR、ALK、ROS-1阳性表达与患者的预后存在紧密联系,阳性表达患者表现出更低的生存率。

综上所述,EGFR、ALK、ROS-1三者在肺癌组织内呈异常的高表达,三者与肺癌的发生与发展密切相关,且阳性表达患者的生存率更低。