正交优化四肢通络外用颗粒的提取工艺研究*

杨 姗,陈 丽,李胜琴,朱鑫龙

(织金县中医院医院,贵州 毕节 552100)

四肢通络外用颗粒原方名为四肢洗剂,为我院市级名中医长期临床验方,主要由桑枝、桂枝、淫羊藿、红花、当归、独活、川牛膝、透骨草、伸筋草、乳香、没药、萆薢、木瓜、积雪草等16味中药组成。方中桑枝、桂枝、川牛膝具有通利关节、祛风湿的作用[1-3],伸筋草、透骨草、木瓜具有舒筋活络、祛风除湿的作用[4-5],红花、当归、乳香、没药合用具有活血止痛的作用[6-7],羌活、独活、积雪草、淫羊藿、补骨脂具有祛风除湿、温补肾阳的作用[6,8-9]。诸药合用,具有通利关节、温筋通络、活血祛风的功效。在长期临床使用中发现,该方对跌打损伤后血瘀阻滞或兼(或)夹感受风寒湿所致的四肢骨节筋络损伤、肿胀疼痛、关节动作不利等具有显著疗效。原方使用时需临时煎煮,使用及携带不方便,因此在原方的基础上我院预将其制备成颗粒剂。现为保证四肢通络外用颗粒的质量和稳定性,本文对其提取工艺进行优化,建立其提取工艺参数,以保证疗效。

1 仪器与试药

1.1 仪器

电热鼓风干燥箱(型号:DHG-9070A,厂家:上海一恒科学仪器有限公司);数显恒温水浴锅(型号:HH4,厂家:常州隆和仪器制造有限公司);万分之一电子天平(型号:ATY124R,厂家:岛津企业管理(中国)有限公司);百分之一电子天平(型号:YP20002B,厂家:宁波金诺天平仪器有限公司)。

1.2 试药

桑枝(由贵州同济堂中药饮片有限公司生产,批号:210416);桂枝(由安徽康和中药科技有限公司生产,批号:220405);淫羊藿(由安徽旭松中药饮片有限公司生产,批号:220223);红花(由成都康美药业生产有限公司生产,批号:220300357);川牛膝(由贵州同济堂中药饮片有限公司生产,批号:220110);萆薢(由成都康美药业生产有限公司生产,批号:220200531);伸筋草(由安徽润芙蓉药业有限公司生产,批号:02-21110101);透骨草(由江西彭式国药堂饮片有限公司生产,批号:21102503);乳香(由贵州同济堂中药饮片有限公司生产,批号:220510);没药(由成都康美药业生产有限公司生产,批号:201202651);木瓜(由成都康美药业生产有限公司生产,批号:220500381);羌活(由安徽德昌药业股份有限公司生产,批号:20210601);独活(由贵州同济堂中药饮片有限公司生产,批号:210528);积雪草(由安国市聚药堂药业有限公司生产,批号:2202001);当归(由安徽康和中药科技有限公司生产,批号:220214);补骨脂(由安徽润芙蓉药业有限公司生产,批号:02-21100101)。

2 试验方法与结果

2.1 单因素试验

2.1.1 加水量的考察

称取四肢通络外用颗粒1/3处方量,固定提取时间和提取次数,分别考察加水量为4倍、6倍、8倍、10倍和12倍时对出膏率的影响。结果显示,不同加水量条件下的出膏率分别为171.49 mg/g、210.02 mg/g、233.37 mg/g、260.25 mg/g和265.14 mg/g,随着加水量的增加,出膏率增加,但当加水量达到10倍和12倍时,出膏率基本达到平衡(图1)。

图1 加水量的考察结果

2.1.2 提取时间的考察

称取四肢通络外用颗粒1/3处方量,固定加水量和提取次数,分别考察提取时间为0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h和2.5 h时对出膏率的影响。结果显示,不同提取时间下的出膏率分别为209.00 mg/g、264.77 mg/g、265.30 mg/g、263.04 mg/g和264.10 mg/g,随着提取时间的增加出膏率增多,但当提取时间达到1.0 h时,出膏率基本不变(图2)。

图2 提取时间的考察结果

2.1.3 提取次数的考察

称取四肢通络外用颗粒1/3处方量,固定加水量和提取时间,分别考察提取次数为1次、2次和3次时对出膏率的影响。结果显示,不同提取次数下的出膏率分别为264.85 mg/g、319.85 mg/g和343.23 mg/g,随着提取次数的增加出膏率增大(图3)。

图3 提取次数的考察结果

2.2 正交试验分析

根据单因素试验结果,以出膏率为评价指标,以加水量(A)、提取时间(B)和提取次数(C)为考察因素,采用L9(34)正交试验设计(表1),优化四肢通络外用颗粒的提取工艺,结果见表2、表3。

表1 因素水平表

表2 正交试验结果

表3 方差分析结果

由直观分析结果可知,各因素对四肢通络外用颗粒出膏率的影响为C>A>B,提取次数(C)对出膏率的影响最大,最佳提取工艺为A3B2C3。由方差分析结果可知,加水量(A)和提取次数(C)均有显著性差异,因此确定加10倍量水、提取时间1 h、提取次数3次为四肢通络外用颗粒的最佳提取工艺。

2.3 验证性试验

按正交试验结果,称取四肢通络外用颗粒处方饮片,平行3份,各加10倍量水进行煎煮,每次1 h,共煎煮3次,过滤,合并滤液,取适量药液水浴挥干水分后干燥至恒重,计算出膏率。结果显示3次试验的平均出膏率为334.13 mg/g,该提取方法稳定、可靠,可作为四肢通络外用颗粒的最佳提取工艺。

3 讨论

医院制剂自20世纪50年代出现至今,是国家医药行业的重要组成和必要补充,是临床专科特色用药的必要体现。医院制剂不仅可以弥补市场药物供给不足,还可以满足医院科研需要[10]。此外,医院制剂遵循中医药基础理论,辨证施治,根据患者体质、证、候,运用君臣佐使理论从本质上用药,对于缓解患者的痛苦、调理患者体质、解决常见病、多发病及重大疾病的治疗上发挥着巨大作用,疗效确切、价格低廉,具有良好的社会效益和经济效益。

四肢通络外用颗粒原方为四肢洗方,在我院长期临床使用中有较好的临床疗效,其使用方法是将中药饮片煎煮后对四肢疼痛部位进行熏洗。但原方使用时需进行临时煎煮,其煎煮工艺参数未规范,导致不同患者自行煎煮时参数不同,疗效有差异,且患者使用和携带不方便。四肢通络外用颗粒是以原方为基础,遵循中医药基础理论将其制备为颗粒剂,本文通过正交试验优化四肢通络颗粒的提取工艺,建立其提取工艺参数,保证其临床疗效和稳定性。本次研究为我院的医院制剂研究奠定了基础,也为我院医院制剂工作的开展提供了新思路。