组织内TRIM3及FoxO1表达与原发性肝癌患者病理特征及预后间的关系分析

张莉莉 甄飞

原发性肝癌(PHC)在我国发病率较高,PHC可增加患者发生肝功能衰竭、多器官功能障碍的风险,提高病死率[1]。尽管可以通过手术及微创介入治疗PHC,但其复发率仍然较高,患者5年生存率也较低。影响PHC患者预后的因素也较多,如肿瘤细胞分化程度低、发生转移、门静脉侵犯等,均可导致不良预后[2]。三重基序蛋白3(TRIM3)及叉头转录因子O家族1(FoxO1)是与肿瘤相关的基因蛋白,已被证实其表达缺失可导致多种恶性肿瘤,但TRIM3及FoxO1与PHC的关系研究较少[3-4]。因此本研究旨在探讨组织内TRIM3及FoxO1表达与PHC患者病理特征及预后间的关系。

资料与方法

一、纳入标准

①PHC诊断符合相关标准[5];②肝功能Child A或B级;③经术后病理学检查证实;④临床资料完整。

二、排除标准

①人类免疫缺陷病毒感染;②转移性肝癌;③接受过放化疗治疗;④合并其他恶性肿瘤;⑤长期应用免疫抑制剂;⑥继发性肝癌;⑦有合并性脑病。

三、一般资料

回顾性分析2018年1月—2019年12月南京医科大学附属淮安第一医院119例PHC患者的临床资料。本研究获得南京医科大学附属淮安第一医院医学伦理委员会批准(2018-04号)。

四、方法

(一)收集资料 收集患者的临床资料。

(二)TRIM3、FoxO1检测 采用免疫组化染色法检测患者肝癌组织与癌旁组织内TRIM3、FoxO1表达,癌旁组织取肿瘤周围5 cm内的肝组织。判断标准：TRIM3主要分布于胞浆中,FoxO1主要分布于细胞核中,显微镜下均出现棕黄色颗粒判定为阳性细胞,依据染色强度评分：0分(未染色)、1分(淡黄色)、2分(棕黄色)、3分(褐色),依据染色细胞占比评分：1分(≤10%)、2分(11%～50%)、3分(51%～75%)、4分(>75%),两者之积≥3分为阳性,<3分为阴性。

(三)随访观察 电话或门诊随访3年,观察患者的3年生存情况。

五、统计学方法

应用SPSS 22.0统计软件处理数据。计数资料用百分比(%)表示,采用χ2检验,采取Kaplan-Meier法绘制生存曲线。P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、PHC患者肝癌组织与癌旁组织TRIM3、FoxO1表达比较

PHC患者肝癌组织中TRIM3、FoxO1阳性率显著低于癌旁组织(P<0.05)。见表1。

表1 PHC患者肝癌组织与癌旁组织TRIM3、FoxO1表达比较[n(%)]

二、肝癌组织内TRIM3及FoxO1表达与PHC患者病理特征间的关系

TRIM3阳性患者肿瘤大小<5 cm、高分化、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期的占比显著高于TRIM3阴性患者(P<0.05),FoxO1阳性患者肿瘤大小<5 cm、单发、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期的占比显著高于FoxO1阴性患者(P<0.05)。见表2。

表2 肝癌组织内TRIM3及FoxO1表达与PHC患者病理特征间的关系[n(%)]

三、肝癌组织内不同TRIM3及FoxO1表达PHC患者预后比较

对119例PHC患者行3年随访,3年生存率为45.38 %(54/119);55例肝癌组织TRIM3阳性患者3年生存率为61.82 %(34/55),64例肝癌组织TRIM3阴性患者3年生存率为31.25 %(20/64),Kaplan-Meier生存分析显示,两组的3年生存率差异有统计学意义(Log Rank=10.242,P=0.001);50例肝癌组织FoxO1阳性患者3年生存率为60.00 %(30/50),69例肝癌组织FoxO1阴性患者3年生存率为34.78 %(24/69),Kaplan-Meier生存分析显示,两组的3年生存率差异有统计学意义(Log Rank=6.978,P=0.008)。见图1。

图1 肝癌组织内不同TRIM3及FoxO1表达PHC患者3年生存曲线

讨 论

近年来有较多研究报道表明,基因等位突变、基因缺失等遗传因素在PHC的发生、发展过程中具有重要作用[6-7]。因此在早期诊断PHC时对其遗传基因进行研究,可能为PHC的早期发现及治疗提供新的方法。研究发现[8-10],TRIM3、FoxO1表达与食管鳞状细胞癌、卵巢癌、子宫内膜癌等多种恶性肿瘤相关,TRIM3减少可增加食管鳞状细胞癌淋巴结转移及微淋巴管密度,FoxO1可影响卵巢癌、子宫内膜癌患者的肿瘤细胞形态及分期,但TRIM3、FoxO1与PHC的相关研究较少。

本研究结果显示,TRIM3、FoxO1均在肝癌组织中阴性表达较多,在癌旁组织中阳性表达较多,提示TRIM3及FoxO1表达缺失或低表达对PHC的发生、发展具有重要作用。肿瘤的恶化和进展离不开单个或多个基因突变的发生,TRIM3属于抑癌基因,其阳性表达有助于延缓肝癌细胞增殖。有研究证实[11],TRIM3在其他恶性肿瘤中也有抑癌效果,也有研究显示[12-14],TRIM家族的其他蛋白,如TRIM19、TRIM21、TRIM24等,与细胞的周期、分化、凋亡相关。FoxO1具有稳定癌细胞周期的作用,其水平变化可以调控癌细胞的分化成熟及黏附能力[15]。FoxO1阴性表达可使肝癌细胞的增殖调控异常,增强其持续性自我增殖能力;同时改变肝癌细胞的侵袭能力,显著提高上皮细胞突破基底膜的风险[16]。

本研究在观察TRIM3表达与PHC患者病理特征的关系时发现,TRIM3表达与肿瘤大小、病理分级、TNM分期具有相关性,FoxO1表达与肿瘤大小、数量、TNM分期具有相关性。TRIM3阴性或低表达时可以促进肿瘤生长,TRIM3阳性及高表达可能通过抑制肿瘤细胞克隆形成、迁移和侵袭,使肝癌细胞在细胞周期G1期出现生长阻滞,并调节p21蛋白的表达及获细胞的敏感性,导致肝癌细胞凋亡,从而对肿瘤大小、病理分级及TNM分期产生影响[17]。FoxO1表达与PHC患者病理特征的关系主要体现在其对肿瘤大小、数量、TNM分期的影响,FoxO1阴性表达可以使肝癌细胞侵袭正常肝脏上皮组织的能力增强,扩大癌栓深度和癌栓范围,从而提高患者临床分期;FoxO1表达缺失可能通过改变肝脏上皮细胞增殖特性影响肿瘤的大小和数量[18-20]。

另外,本研究结果显示,TRIM3及FoxO1阳性的患者3年生存率均显著高于TRIM3及FoxO1阴性的患者,提示TRIM3及FoxO1表达与PHC患者预后显著相关,TRIM3及FoxO1阳性表达可延长患者生存时间,这可能是因为TRIM3及FoxO1蛋白阳性表达有利于肿瘤细胞生物学特征的稳定,从而可使肿瘤细胞发生转移及复发的风险降低,进而影响患者的预后。

综上所述,组织内TRIM3及FoxO1表达与PHC的疾病进展相关,可能起到抑癌作用,同时TRIM3、FoxO1可用于PHC患者预后的评估,为PHC的诊治提供新的思路。

利益冲突声明：所有作者均声明不存在利益冲突。