东乡族人群Duffy、Kidd、Diego 血型系统等位基因频率多态性研究

崔军 张伟萍 惠霞 张晓萍 李国英 杨海燕

（1.临夏回族自治州中心血站,甘肃 临夏 731100；2.甘肃省红十字血液中心；3.甘肃省人民医院）

人类红细胞血型抗原在不同地域、不同人（种）群中出现的频率呈高度多态性，其分布存在明显的地区和民族差异，是人类遗传学的1个重要遗传标志[1]。东乡族为甘肃省特有少数民族，中国境内东乡族的人口数为774 947，主要聚居在甘肃省临夏回族自治州的东乡族自治县，居住环境比较封闭，有民族语言，无民族文字[2]。我们通过研究甘肃省东乡族人群Duffy、Kidd、Diego 血型系统等位基因频率及多态性分布特点，为临床输血治疗提供数据基础。

1 对象与方法

1.1 调查对象

所有标本来自2017 年1—12 月甘肃省临夏回族自治州中心血站的东乡族随机献血者共100名。纳入标准：3 代以内为临夏本地东乡族人群、无血缘关系。参与实验研究的献血者均签署了知情同意协议。每位献血者采集静脉外周血8 mL，EDTA-Na2抗凝，-20℃保存。

1.2 试剂与仪器

血液基因组DNA 提取试剂盒(天根公司，批号：R6329)；人类红细胞稀有血型基因分型检测试剂盒（中济万泰公司，批号：20180604)，2K-15 高速台式冷冻离心机（Sigma 公司)，NanoDrop Lite 分光光度计（Thermo 公司），7500 PCR 仪(Applied Biosystems公司)。

1.3 方法

1.3.1 基因组DNA提取

按照基因组DNA提取试剂说明书进行操作，同时测定DNA溶液浓度和纯度，要求浓度为（30～50）ng/μL，纯度A260/A280为1.8～2.0，-20℃以下保存。

1.3.2 Duffy、Kidd、Diego血型系统基因分型

采用荧光PCR法进行基因分型，严格按照试剂说明书进行操作。等位基因频率计算：某等位基因频率=某等位基因的纯合子频率+1/2 杂合子频率。等位基因不配合率（MP）依据公式计算，MP=2ab(1-ab)[3]，a，b分别代表等位基因a和b的频率。

1.4 统计学分析

不同民族Duffy、Kidd、Diego 血型系统等位基因频率比较采用四格表χ2的Fisher 精确检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 甘肃东乡族Duffy、Kidd、Diego血型系统等位基因频率

Duffy 血型基因型未检出FY*01N 和FY*02N；Kidd 血型基因型未检出JK*01N和JK*02N；Diego 血型基因型未检出DI*01/01。Duffy、Diego血型系统符合Hardy-Weinberg 遗传法则（P＞0.05），Kidd 血型系统不符合Hardy-Weinberg遗传法则（P＜0.05），见表1。

表1 甘肃东乡族人群Duffy、Kidd、Diego血型系统表现型与等位基因频率分布（n=100）Table 1 Phenotype and allele frequency distribution of Duffy, Kidd and Diego blood group system in Dongxiang ethnic group of Gansu Province(n=100)

2.2 甘肃东乡族Duffy、Kidd、Diego血型系统等位基因频率与我国其他地区不同民族比较

见表2。

表2 甘肃东乡族与我国其他地区不同民族Duffy、Kidd、Diego血型等位基因频率分布比较Table 2 Comparison of allele frequency distribution of Duffy,Kidd and Diego blood groups system between Dongxiang ethnic group in Gansu Province and other ethnic groups in China

3 讨论

截止2023年7月，国际输血协会（ISBT）已确认45个红细胞血型系统，共360个红细胞血型系统抗原[18]。目前临床重视的主要是ABO 和Rh 2 个血型系统，对Duffy、Kidd、Diego 等血型系统的关注相对较少。但这些血型可引起血型鉴定困难、交叉配血不合或者输血后引起免疫性溶血反应[19]，特别是抗-Jkb可能引起溶血性输血反应以及胎儿新生儿溶血病[20]。因此，了解不同民族人群Duffy、Kidd、Diego 血型系统等位基因分布的差异，对指导本地区临床科学合理用血和及时提供安全的血液具有重要意义[21]。

在甘肃东乡族人群中Duffy、Kidd、Diego 血型系统对偶抗原Fya/Fyb、Jka/Jkb的不配合率比较高。理论上抗原不配合率越高，在随机输血及妊娠等免疫过程中刺激机体产生免疫性意外抗体的概率就越高，从而增加反复输血患者及多次妊娠者的风险，导致免疫性溶血反应和胎儿新生儿溶血病的发生率增加。Kidd血型抗体都具有低免疫原性，在血浆中能迅速下降到很低或者不能检测的水平，一般很难被检测，易发生漏检问题，但又会引起严重和致命的速发型溶血反应，也能引发迟发型溶血反应，会导致少尿、肾功能衰竭等严重后果[22]。因此，临床上应重视ABO 和Rh 血型系统以外的血型抗原的配合性输血，提高患者的输血疗效。

甘肃东乡族人群红细胞抗原等位基因的多态性分布呈现了一定的民族性和地域特征。Duffy血型系统等位基因分布与西安汉族、新疆回族、新疆哈萨克族等西北地区各民族相近，与东北地区和南方地区不同民族差异较大；Kidd 血型系统等位基因分布与中国北方地区各民族相近，与南方地区部分民族差异较大；Diego 血型系统等位基因分布与中国各民族相近，说明东乡族人群与中国西北地区各民族一样经历了复杂的融合过程，在吸收和融合其他民族的基础上形成了不同于其他地区种族人群的特点，使血型抗原等位基因分布具有地域性和民族特异性。

综上所述，甘肃东乡族人群Duffy、Kidd、Diego血型系统等位基因分布具有较为丰富的多态性及地区性遗传特征，具有中国西北地区人群及特有民族遗传特征，分析其等位基因多态性分布特点，将为群体遗传学、人类学研究提供本地区本民族宝贵的基础资料，同时为临床输血治疗提供指导。