广西某猪场7种主要病毒性疫病的抗体检测与分析

韦桂元，谭锦瑜，石宗承，何东贤，陆晶山，莫红芳*

（1.广西柳州市柳江区农业科技推广中心，广西 柳州 545100；2.广西农业职业技术大学，广西 南宁 530007；3.广西壮族自治区柳州种畜场，广西 柳州 545003）

随着我国生猪产业规模化、集约化程度迅速提升，猪引种和猪只流动越来越频繁，加上猪疫病种类增多和复杂程度的加深，使疫病监测在防控工作中变得越发重要［1］。CSF、FMD、PR、PRRS、PCVAD、PPI 及JE 是目前一直困扰养猪业生产与发展的重大病毒性传染病［2］，一旦发病严重，就会给猪场造成巨大的经济损失。因此，做好上述7 种病毒性疫病的疫苗免疫及抗体监测，对于猪场来说非常重要和必要。

疫苗免疫是目前预防病毒性疫病最有效的防疫措施，但其免疫效果易受到动物个体差异、疫苗质量及类型、疫苗保存及运输、免疫程序、饲养管理水平等因素影响［3］。抗体水平是反映猪群是否处于感染状态的重要指标［1］。通过监测血清的抗体水平，可有效分析猪群的免疫状态和疫病感染情况，以此作为优化免疫程序和净化猪场疫病的重要依据［1］。本研究利用ELISA方法检测广西某猪场7 种病毒性疫病的抗体水平，并结合疫苗免疫程序进行免疫效果分析，以期为猪生产中重要疫病的综合防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 检测试剂及仪器 猪瘟ELISA 抗体检测试剂盒（批号：130501）、O型口蹄疫ELISA抗体检测试剂盒（批号：130907）、猪伪狂犬病gB 蛋白ELISA抗体检测试剂盒（批号：140201）、猪伪狂犬病gE 蛋白ELISA 抗体检测试剂盒（批号：140202）、猪繁殖与呼吸综合征ELISA 抗体检测试剂盒（批号：121213）、猪圆环病毒感染2 型ELISA抗体检测试剂盒（批号：131201）、猪细小病毒病ELISA 抗体检测试剂盒（批号：131205）、猪乙型脑炎ELISA 抗体检测试剂盒（批号：130101），均购自武汉科前生物股份有限公司；Thermo Scientific™Multiskan™FC 酶标仪，购自赛默飞世尔科技（中国）有限公司。

1.2 血清样本 2022 年10 月从广西某存栏300头母猪的猪场随机采集155 份血液样本，放置于37 ℃恒温箱作用2 h 后，转移至4 ℃冰箱过夜，在常温下以5 000 r/min 离心3 min，分离上清即为血清。其中，商品猪（45～120日龄）血清样本55份，种猪（公5头、母95头）血清样本100份。

1.3 方法

1.3.1 疫苗免疫程序 经了解，该猪场防疫员每年均严格按照制定的疫苗免疫程序（表1）开展商品猪、种猪的疫苗免疫工作。

表1 该猪场CSFV、FMDV、PRV、PRRSV等疫苗的免疫程序

1.3.2 检测方法与结果判定 猪瘟病毒抗体、猪伪狂犬病病毒gB 蛋白抗体、猪伪狂犬病病毒gE蛋白抗体均采用阻断ELISA 试剂盒进行检测，O型口蹄疫病毒抗体、猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体、猪圆环病毒2 型抗体、猪细小病毒抗体、日本乙型脑炎病毒抗体均采用间接ELISA 试剂盒进行检测。严格按照各诊断试剂盒的说明书进行操作和结果判定。

2 结果

2.1 CSFV、FMDV-O 抗体检测结果 表2 显示，猪群CSFV、FMDV-O 整体的抗体平均合格率分别为90.3%和81.3%，达到了我国强制性疫苗免疫抗体合格率标准（70%）。其中种猪抗体合格率分别为100%、100%，免疫效果理想，但商品猪免疫合格率分别为72.7%、47.3%，说明商品猪FMDV-O 抗体免疫合格率偏低，部分血清抗体达不到保护水平，难以抵御FMDV-O强毒攻击。可能是由于免疫程序不合理、疫苗使用不当及免疫抑制性疾病等导致的免疫失败［4］。

表2 CSFV、FMDV-O抗体检测结果

2.2 PRV-gB、PRV-gE 抗体检测结果 在我国，猪伪狂犬抗体检测一般检测gB、gE 两类抗体，以此来区分抗体是由疫苗毒产生还是野毒产生［5］。由表3可知，各阶段猪群PRV-gB抗体整体水平较好，抗体阳性率均值为96.8%，说明PRV免疫效果良好。PRV-gE抗体阳性个体总数为0，表明该猪场不存在伪狂犬野毒感染。

表3 PRV-gB、PRV-gE抗体检测结果

2.3 PRRSV、PCV2 抗体检测结果 表4显示，商品猪PRRSV 抗体阳性率为10.9%，由于商品猪血清采集自45～120 日龄猪群，PRRSV 母源抗体已逐渐消失，说明商品猪群中存在PRRSV 感染情况［6］。虽然商品猪进行了两次PCV2 疫苗的免疫，种猪每个季度加强免疫一次PCV2 疫苗，但是商品猪、种猪PCV2 抗体的阳性率分别只有63.6%和83.0%，这可能与商品猪母源抗体不足、机体免疫系统发育不完善或种猪出现免疫耐受等因素有关［5］。

表4 PRRSV、PCV2抗体检测结果

2.4 PPV、JEV抗体检测结果 从表5可看出，猪群PPV、JEV整体的抗体平均阳性率分别为84.5%、69.7%，其中商品猪PPV、JEV 抗体阳性率分别为60.0%、20.0%。由于商品猪未免疫PPV、JEV疫苗且母源抗体已逐渐消失，说明商品猪群普遍存在野毒感染，应引起重视［7］。种猪于每年3 月份免疫JEV疫苗，并在产后2周免疫PPV疫苗，抗体阳性率分别为97.0%和98.0%，说明疫苗免疫效果良好。

表5 PPV、JEV抗体检测结果

3 结论及讨论

本研究采用ELISA 检测试剂盒对广西某猪场开展了猪群健康状态监测工作，充分掌握了该猪场7种主要病毒性疫病的抗体水平和野毒感染情况［8］。从猪群整体的平均抗体阳性率分析，猪场CSFV、FMDV-O、PRV-gB、PCV2、PPV 的平均抗体阳性率分别为90.3%、81.3%、96.8%、76.1%、84.5%，均超过我国强制性疫苗免疫抗体阳性率标准（70%），说明疫苗免疫效果较好；PRRSV、JEV 的平均抗体阳性率分别为52.3%、69.7%，低于国家标准，说明疫苗无法发挥较好的免疫保护作用；PRV-gE 抗体阳性个体总数为0，表明无伪狂犬野毒感染。

从各阶段猪群的抗体阳性率分析，种猪7 种疫病的抗体阳性率均高于国家标准（70%），说明抗体水平较高，能提供有效的免疫保护力；商品猪已接种CSFV、FMDV-O、PCV2、PRV疫苗，还未接种PRRSV、PPV、JEV 疫苗，结果FMDV-O、PCV2抗体水平较低，阳性率均低于国家标准，说明疫苗免疫效果较差，而PRRSV、PPV、JEV 抗体阳性率较高，说明存在野毒感染，且PPV 野毒感染更为严重。鉴于以上结果分析，建议该猪场查找疫苗免疫失败原因，优化免疫程序，加强疫苗免疫水平监测，对PRRSV、PPV 和JEV 感染阳性商品猪进行隔离和监控，并检测病毒核酸，将核酸阳性的猪只作淘汰处理。