黔西南州不同产地何首乌品质检测及最佳采收年限考察

【摘要】目的：为探究我州何首乌产收年限与有效成分累积水平的关系，采用《中华人民共和国药典》2020版一部中何首乌项下的二苯乙烯苷和蒽醌类含量测定方法，测定二苯乙烯苷和蒽醌类的含量，以确定何首乌的适宜采收年限。结果：二苯乙烯苷平均值为1.93%，最大值为3.34%，最小值为0.44%；结合蒽醌平均值为0.30%，最大值为0.70%，最小值为0.07%。结论：安龙3年生达最大值，分别为二苯乙烯苷3.3%和蒽醌类0.7%。安龙县品质最佳，普安次之，白碗窑较次。采收年限可选择第一年采收，将3年生何首乌作为精品药材生产。

【关键词】何首乌；采收年限；含量测定；二苯乙烯苷；结合蒽醌

【DOI编码】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.04.007

【基金项目】黔西南州科技局-科技支撑计划（2018-1-12号）：黔西南州主产区何首乌品质检测及最佳采收年限考察。

Quality Testing and Optimal Harvesting Period Investigation of Fleeceflower Root from Different Production Areas in Qianxinan Prefecture

JIN Zhao， WANG Dandan*， LIU Zhihai， PENG Qili

（Qiannan Prefecture Inspection and Testing Center， Xingyi 562400， China）

Abstract： Objective： To explore the relationship between the production and harvest years of fleeceflower root. in our province and the accumulation level of active ingredients， the content determination method of diphenylene glycoside and anthraquinone under the heading of fleeceflower root in Part 1 of the 2020 Edition of the Pharmacopoeia of the People’s Republic of China was used to determine the suitable harvesting period of fleeceflower root. Result： The average value of stilbene glycoside was 1.93%，the maximum value was 3.34%， and the minimum value was 0.44%. the average value of bound anthraquinone was 0.30%， the maximum was 0.70%， and the minimum value was 0.07%. Conclusion： Anlong’s 3-year lifespan reached its maximum value， with stilbene glycoside at 3.3% and anthraquinone at 0.7%， respectively. Anlong County has the best quality， followed by Pu’an and Baiwan Kiln. The harvesting period can be selected from the first year， and the three-year old fleeceflower root can be used as a high-quality medicinal material for production.

Keywords： fleeceflower root； harvest period； content determination； diphenylene glycoside； combining anthraquinone

何首乌又名多花蓼、紫乌藤、夜交藤等，是蓼科何首乌属多年生缠绕藤本植物。其块根入药，性温，味苦、甘、涩，入心、肝经；生首乌可安神、养血、活络、解毒（截疟）、消痈、润肠通便；制首乌可益精血、补肝肾、乌须发、强筋骨、化浊降脂[1]。何首乌有延缓衰老之功效，在临床治疗高脂血症已取得较好疗效，其提取物能减轻动脉粥样硬化症状，同时能够增加冠脉血流量，改善心肌缺血，增强免疫，改善神经衰弱，抗骨质疏松[2-3]。何首乌收录于《中华人民共和国药典》2020版一部（以下简称《药典》）。《药典》对何首乌除了常规鉴别外，还要求药材水分不得超过10.0%，其主要有效成分二苯乙烯苷以干燥品计不得少于1.0%，结合蒽醌以干燥品计不得少于0.05%。

何首乌主要活性成分为2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷和蒽醌类等化合物，二苯乙烯苷、总蒽醌的含量受种植地区和采收年限的影响较大[4]。黔西南州生态环境类型多样，气候温润，材质良好、品质高，具有道地性。目前，黔西南州的多县市充分利用地理和气候优势，结合扶贫推进项目，发展以何首乌为主的中药材种植产业。然而，对于黔西南州何首乌品质的研究相对较少，尤其是不同生长年限何首乌中二苯乙烯苷、蒽醌类含量的积累情况尚未见相关报道。为考察黔西南州所产何首乌的产收年限与有效成分累积水平的关系，本研究检测何首乌的二苯乙烯苷和结合蒽醌的含量，以确定何首乌的适宜采收年限。

1材料、仪器与方法

1.1材料

普安、安龙、白碗窑何首乌药材共9批次何首乌来源见表1。经鉴定为何首乌的干燥根茎，是由黔西南州检验检测中心副主任药师刘志海鉴定。2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β- D-葡萄糖苷（批号：110844-201915，纯度：90.7%，购自中国食品药品检定研究院）；大黄素（批号：110756-201512，纯度：98.7%，购自中国食品药品检定研究院）、大黄素甲醚（批号：110758-201817，纯度：99.2%，购自中国食品药品检定研究院）；甲醇和乙腈（色谱纯，德国默克公司）；水（娃哈哈蒸馏水），其余试剂均为分析纯。

1.2仪器

Waters e2695高效液相色谱仪，日本SHIMADZU公司AUY220型万分之一电子分析天平，日本SHIMADZU公司AUW220D型十万分之一电子分析天平，DFF型高速万能粉碎机；DK-98-M单列四孔电热恒温水浴锅，HS10260D型超声波清洗仪。

1.3方法

1.3.1对照物质的制备

精密称取2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量，加稀乙醇制成0.219 mg/mL的溶液，即得；精密称取大黄素、大黄素甲醚对照品适量，加甲醇制成含大黄素122.1μg/mL、大黄素甲醚37.8μg/mL的混合对照品溶液[1]。

1.3.2样品溶液的制备

二苯乙烯苷样品溶液的制备：取何首乌药材，粉碎，过四号筛，混匀，取粉末约0.2 g，精密称定，置于100 mL具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇25 mL后称定重量，加热回流30 min，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，静置，上清液滤过，取续滤液作为样品溶液。

游离蒽醌样品溶液的制备：取何首乌药材，粉碎，过四号筛，混匀，取粉末约1 g，精密称定，置于100 mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，加热回流1 h，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液5 mL作为供试品溶液A（测游离蒽醌用）。另精密量取续滤液25 mL，置于具塞锥形瓶中，水浴蒸干，精密加入8%盐酸溶液 20 mL，超声处理5 min，加三氯甲烷20 mL，水浴中加热回流1 h，取出，立即冷却，倒入分液漏斗中，酸液用三氯甲烷振摇提取3次，每次15 mL，合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液B（测总蒽醌用）。结合蒽醌=总蒽醌的含量-游离蒽醌的含量。

1.3.3色谱条件

色谱柱：Hypersil GPLD C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）、ACE EXCEL C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；二苯乙烯苷流动相：乙腈-水（25∶75）；结合蒽醌流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（80∶20）；柱温：30℃；流速：1 mL/min；检测波长：二苯乙烯苷为320 nm，结合蒽醌为254 nm。

3结果与分析

3.1黔西南州不同地区何首乌中二苯乙烯苷含量随生长年限的变化

由表2可看出，二苯乙烯苷平均值为1.93%，二苯乙烯苷最大值为3.3%，二苯乙烯苷最小值为0.4%。对于二苯乙烯苷含量，安龙县三年生最大值为3.3%，普安产两年生最大值为2.4%，白碗窑三年生最大值为1.2%。从二苯乙烯苷含量来看，一年生和三年生中以安龙县产何首乌质量最佳，一年生二苯乙烯苷含量即达到3.2%，普安县一年生二苯乙烯苷含量达到2.2%，亦显示较好质量水平，白碗窑一年生含量较低为0.4%。

3.2黔西南州不同地区何首乌中蒽醌含量随生长年限的变化

由表2可看出，总蒽醌含量与游离态、结合态2种形态蒽醌含量的变化趋势一致，结合蒽醌含量高于游离蒽醌含量。结合蒽醌平均值为0.30%，结合蒽醌最大值为0.70%，结合蒽醌最小值为0.07%。安龙、普安、白碗窑所产何首乌的结合蒽醌含量随年份增加均呈现上升趋势。安龙、普安、白碗窑3年生的结合蒽醌含量最高分别为0.70%、0.39%、0.26%。从结合蒽醌含量来看，安龙县产何首乌质量最佳，普安县较好，白碗窑次之。

4讨论

何首乌对生长条件要求不严苛，在我国多地区都有栽培种植，主要栽培地有陕西、甘肃、江苏、浙江、安徽、福建、江西，河南、湖北、湖南、广东、广西、海南，以及贵州、重庆、四川东部、云南部分地区等。何首乌是贵州省道地药材之一，在黔西南州种植历史悠久。黔西南州属于亚热带季风湿润气候区，气候温和，雨量充沛，冬无霜寒，夏无酷暑，具有低纬度高海拔的特点。何首乌的质量主要以二苯乙烯苷和蒽醌类含量为依据，不同产地何首乌的二苯乙烯苷和结合蒽醌含量差异明显。此次研究，我们广泛收集了普安、安龙等地区的何首乌样品，对《药典》规定的指标成分进行含量测定。结果显示，在黔西南州产何首乌9批次中，二苯乙烯苷含量测定达到《药典》要求的有7批次，达标率为77.8%；结合蒽醌含量测定达到《药典》要求的有9批次，达标率为100%。另外，何首乌用量较大，野生资源消耗快，因而应加快何首乌人工栽培。前期研究也表明，尽管何首乌栽培品因产地、栽培技术的不同而表现出活性成分含量差异，但其品质基本与野生品相近。故扩大人工栽培能充分弥补市场需求空缺，保护野生种植资源。

研究表明，何首乌中二苯乙烯苷具有保护神经、改善记忆、抗氧化等作用。蒽醌类成分是解毒消痈、润肠通便的关键物质基础，其中结合型蒽醌泻下通便作用远强于游离型蒽醌。本实验结果显示，何首乌样品中结合蒽醌含量随生长年限不断上升，同时游离蒽醌含量也呈现上升趋势，这说明结合蒽醌和游离蒽醌在前三年迅速积累。

5结束语

在黔西南州人工栽培何首乌中，有7批次的二苯乙烯苷含量符合药用标准；结合蒽醌含量全部符合药用标准，以安龙产（三年）何首乌品质最佳，普安次之，白碗窑次之，这主要是因为种植水平较为先进，也可能是安龙较低的海拔和适宜的夏季温度利于何首乌有效成分的富集。三年生栽培何首乌中二苯乙烯苷含量明显高于一年生，而一年生何首乌已符合药典标准，故可选择一年采收，将三年生何首乌作为精品药材生产。

【参考文献】

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典：2020年版一部[M].北京：中国医药科技出版社，2020.

[2]俞云，汪佰莉，张雨，等.何首乌苷对亚急性衰老模型小鼠学习记忆能力及海马内ChAT和AChE表达的影响[J].四川动物，2017，36（1）：48-53.

[3]黄晓冰，黄霭霞，王光宁，等.HPLC测定不同产地何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的含量[J].食品与药品，2019，21（2）：111-115.

[4]李帅锋，郑传柱，张丽，等.不同采收期对何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分含量的影响[J].中国现代中药，2015，17（11）：1177-1179，1183.

【作者简介】

金昭，女，1985年出生，执业中药师，学士，研究方向为中药、民族药和中成药质量控制。

通信作者：王丹丹，女，1995年出生，执业药师，硕士，研究方向为中药、民族药和中成药质量控制。zunyiwangdd@163.com。

（编辑：侯睿琪）