CyclinD1、p27在非小细胞肺癌中的表达及与其临床病理特征及预后的关系

李广志 赵 蒙

作者单位：450000 河南省郑州颐和医院

肺癌是常见的肺部恶性肿瘤,其发生机制较为复杂,与患者吸烟、环境污染、化学辐射等因素存在明显关联性,该病对人体的危害性较高,癌组织能够在肺内迅速生长,并导致患者肺功能出现降低,进而引发一系列肺内症状[1]。非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)其中的一种类型,约占所有肺癌的80%,进展到晚期时,常造成患者支气管阻塞,对肺功能和呼吸功能造成不良影响,此外,还有可能引发淋巴结转移(LNM),不利于后期治疗,因此,及早确诊疾病并采取治疗方案有利于提升患者生存质量[2-3]。细胞周期蛋白D1(CyclinD1)是一种调控因子,与NSCLC的化疗敏感性有关,可促进细胞生长繁殖,该基因出现突变或阳性表达的时候会改变细胞周期进程,可能会造成细胞过度繁殖而出现恶性化[4]。p27是一种热稳定蛋白,能够抑制多种周期蛋白活性,对肿瘤细胞的形成和增殖起到明显抑制作用,参与肿瘤的发生和转移过程。本研究针对我院92例采用手术治疗的NSCLC患者,探讨CyclinD1、p27在NSCLC中的表达及与临床病理特征和术后复发的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究回顾性分析我院2016年7月至2020年6月收治的92例NSCLC患者,其中在性别分配上,男性、女性分别为58例、34例;年龄42～78(59.68±2.46)岁;鳞癌、腺癌分别为51例、41例;病灶直径3～11(6.48±0.32)cm;术后复发57例、未复发35例。

1.2 选取标准

(1)纳入标准:①经病理检查及CT等影像学检查确诊为NSCLC;②均接受手术切除治疗;③无心理障碍及精神疾病。(2)排除标准:①随访期间出现死亡者;②患者术前接受过放化疗治疗;③伴有其他系统严重疾病者;④存在手术禁忌证者。

1.3 方法

采用免疫组织化学SP法对CyclinD1、p27进行检测,选取患者癌组织及距此2 cm以上的癌旁组织石蜡标本,切4 μm左右的厚度。依次采用鼠抗人CyclinD1、p27单克隆抗体、兔抗鼠CyclinD1、p27多克隆抗体对切片进行处理。试剂盒均由成都超九八生物科技有限公司提供。组织切片均使用经微波修复的抗原,严格依照试剂盒说明书实施操作,使用二氨基联苯胺(DAB)溶液进行显色,使用苏木精实施复染。将PBS代替一抗的标本作为阴性对照,阳性片为阳性对照。由2名病理科医师将标本放于光学显微镜下进行观察,对染色范围及强度进行观察记录,并采用10个高倍镜视野按照盲法对蛋白表达情况进行评价。

1.4 评价标准

染色强度:无色、淡黄色、黄色、棕褐色分别记为0分、1分、2分、3分。染色范围:1分:染色细胞占比为1%～25%;2分:染色细胞占比为26%～50%;3分:染色细胞占比51%～75%;4分:染色细胞占比为>75%。将染色强度和染色细胞占比分数加起来,0～1分为阴性表达,≥2分为阳性表达。

1.5 观察指标

(1)CyclinD1、p27在NSCLC患者不同组织中的阳性率。(2)CyclinD1与NSCLC临床病理特征关系。(3)p27与NSCLC临床病理特征关系。(4)CyclinD1、p27在复发和未复发NSCLC患者癌组织中的阳性率。

1.6 统计学方法

应用SPSS 22.0对数据进行统计分析,计数资料以(%)表示,组间比较行χ2检验,以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CyclinD1、p27在不同组织中的阳性情况表达

NSCLC癌组织中CyclinD1阳性率较癌旁组织高,p27阳性率较癌旁组织低(P<0.05),见表1。

表1 CyclinD1、p27在不同组织中的阳性率(例,%)

2.2 CyclinD1与NSCLC临床病理特征的关系

低分化、Ⅲ期、有LNM的NSCLC患者CyclinD1阳性率较中高分化、Ⅰ～Ⅱ期、无LNM高(P<0.05),见表2。

表2 CyclinD1与NSCLC临床病理特征的关系(例,%)

2.3 p27表达与NSCLC临床病理特征的关系

中高分化、Ⅰ～Ⅱ期、无LNM的NSCLC患者p27阳性率较低分化、Ⅲ期、有LNM高(P<0.05),见表3。

表3 p27与NSCLC临床病理特征的关系(例,%)

2.4 CyclinD1、p27在复发和未复发NSCLC癌组织中的阳性情况

复发NSCLC患者癌组织中CyclinD1阳性率(89.47%)较未复发患者高,p27阳性率较未复发患者低(P<0.05)。见表4。

表4 CyclinD1、p27在复发和未复发NSCLC癌组织中的阳性情况(例,%)

3 讨论

NSCLC是肺癌的一种类型,主要起源于腺体或支气管粘膜,具有一定的家族聚集性和遗传感染性,主要由环境、辐射、吸烟、饮食习惯、慢性感染病等多种因素共同作用引发[5-7]。早期患者症状较轻且无特异性,主要表现为胸闷、胀痛、咳嗽等症状,常被误认为是肺结核、肺部炎症等其他呼吸系统疾病。随病情进展,患者体内的癌细胞会进一步增殖,导致细胞周期调控机制产生异常,严重影响患者健康。NSCLC发病率和死亡率逐年增加,探索NSCLC的发生发展机制、及时了解影响NSCLC预后的相关因素,有利于诊断疾病,为后期治疗和改善预后提供依据[8-10]。

本研究结果显示,NSCLC患者癌组织中CyclinD1阳性率72.83%较癌旁组织23.91%高,p27阳性率16.30%较癌旁组织60.87%低(P<0.05),可见CyclinD1、p27的表达与NSCLC的发生存在关联性。CyclinD1可以对细胞分化程度进行调节,参与多种恶性肿瘤的进展,CyclinD1阳性率高会导致NSCLC等肿瘤细胞持续性增殖和扩散,加强恶性肿瘤细胞活性[11-12]。p27是一种抑癌基因,对细胞的增殖具有调控作用,可抑制恶性肿瘤细胞的生长,并能对CyclinD1表达产生抑制作用,在多种恶性肿瘤中存在低表达情况[13-14]。经进一步研究发现,低分化、疾病分期为Ⅲ期、有LNM的NSCLC患者CyclinD1阳性率96.00%、93.88%、79.49%较中高分化64.18%、疾病分期为Ⅰ～Ⅱ期48.84%、无LNM52.83%高;中高分化、疾病分期为Ⅰ～Ⅱ期、无LNM的NSCLC患者p27阳性率20.90%、30.23%、24.53%较低分化0.00%、疾病分期为Ⅲ期4.08%、有LNM5.13%高(P<0.05),提示CyclinD1、p27与NSCLC分化程度、疾病分期等临床病理特征存在明显关联性。CyclinD1能够激活CDKs并催化多种关键底物,在正常组织中基本不表达或呈现弱表达,该蛋白过度表达会导致细胞内基因调控异常,从而造成NSCLC癌细胞发生侵袭和转移。而肿瘤细胞增殖活性越高,癌细胞分化程度越低,在实行手术治疗后存在残端恶化的风险越大,不利于患者预后。p27能够负性调控细胞周期,其过低表达会降低肿瘤细胞的抑制能力,造成肿瘤细胞不断增殖,增强肿瘤恶性程度。研究数据显示,复发NSCLC患者癌组织中CyclinD1阳性率89.47%较未复发患者45.71%高,p27阳性率5.26%较未复发患者34.29%低(P<0.05),充分佐证CyclinD1、p27表达与NSCLC术后复发存在明显关联性。这一结果与闫晓红等[15]研究结果一致。CyclinD1高表达、p27低表达均会促进肿瘤细胞的增殖,促进疾病进展,加大术后复发风险。

综上所述,CyclinD1在NSCLC中的阳性率高,p27在NSCLC中的阳性率低,且二者与NSCLC分化程度、疾病分期等临床病理特征和术后复发存在明显关联性,临床可将CyclinD1、p27指标作为评估NSCLC进展和预后的重要指标进行检测,为临床治疗提供参考。