口服补液盐散（III）中元素杂质的研究

史大勇，郭 伟，颜世强，李亮亮，解春文

（山东达因海洋生物制药股份有限公司，山东 威海 264300）

国际人用药注册技术协调会议（International Conference on Harmonization，ICH）批准的Q3D元素杂质指南中，将药品中的“重金属”一词变为“元素杂质”。元素杂质不仅对药物药效产生影响，也会导致人体中毒，因此，元素杂质检测在药物研发过程中至关重要。我国于2017年加入ICH，在ICH Q3D的基础上，《中华人民共和国药典》2020年版[1-2]收录适合我国国情的元素杂质控制要求。一般原料药的元素杂质来源有：有意加入的合成原料残留物；无意加入的原料负载杂质和生产设备等杂质，且最终能被检测到的元素杂质[3-4]。

口服补液盐散（III）是世界卫生组织推荐的治疗急性腹泻脱水的药物，其纠正脱水的速度优于静脉滴注，主要由氯化钠、氯化钾、枸橼酸钠和葡萄糖组成。除具有补充水、钠和钾的作用外，对急性腹泻有治疗作用，临床主要用于补充水、钠和钾，治疗急性腹泻[5-8]。

本文参照《中华人民共和国药典》2020年版和ICH Q3D元素杂质指南要求，创建电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定口服补液盐散（III）中多元素杂质的方法，灵敏度高，干扰少，简便准确，可用于对口服补液盐散（III）中各元素杂质的质量控制[9-10]。

1 仪器与试药

7700X型电感耦合等离子体质谱仪（美国安捷伦公司）；MS105DU电子分析天平（梅特勒-托利多）；MARS 20微波消解仪（美国CEM公司）。

口服补液盐散（III）（批号：150802，150803，150804，山东达因海洋生物制药股份有限公司）；多元素标准溶液（铅、镉、砷、汞、钴、钒、镍、镁、铝、锰，唯一标识：175056，国家有色金属及电子材料分析测试中心）；汞单元素标准溶液（唯一标识：158022-1，国家有色金属及电子材料分析测试中心）；硝酸（优级纯，含量≥70 %，天津科密欧）；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 仪器参数与样品测定

仪器参数见表1。

表1 金属离子含量测定ICP-MS实验参数

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品储备溶液（各元素含量：10 ng/ml）精密量取多元素标准溶液0.5 ml与汞元素标准溶液0.05 ml，置于50 ml量瓶，加5 %硝酸水溶液稀释至刻度，摇匀，再精密量取混合液0.5 ml，置于50 ml量瓶，加5 %硝酸水溶液稀释至刻度，摇匀即得。

2.2.2 对照品溶液 精密量取对照品储备溶液0.1，0.4，2，8，12，24 ml，分别置于50 ml量瓶，再以5 %硝酸水溶液稀释至刻度，摇匀即得。

2.2.3 供试品溶液（10 mg/ml溶液） 精密称取样品0.5 g，置消解罐中，加入浓硝酸5 ml，消解 30 min，以5 %硝酸水溶液稀释至50 ml即得。

2.3 方法学验证

参考美国药典＜233＞[11]，验证口服补液盐散（III）元素杂质的测定方法，其验证结果如下。

2.3.1 线性与定量限 精密量取各元素杂质标准溶液适量，在0～5 ng/ml浓度范围内，配制各元素杂质的混合线性试液，以元素浓度（X）及校正数值（Y）进行线性回归，计算回归方程。结果，铅、镉、砷、汞、钴、锰、钒和镍在0.01～4.99 ng/ml内，镁元素的浓度在0～4.89 ng/ml内，铝元素的浓度在0.16～5.02 ng/ml内，线性关系良好，其R2均大于0.9940。取空白溶剂平行测定11次，计算定量限，均低于各元素相应限度。结果见表2。

表2 线性实验与定量限结果

2.3.2 回收率 按2.2.1项对照品储备溶液配制对照品储备溶液，按2.2.2项对照品溶液配制对照品溶液。

供试品溶液1：精密称取样品0.5 g，共6份，分别加入对照品储备液1 ml，置入消解罐，加入浓硝酸5 ml，开始消解，再加5 %硝酸水溶液稀释至50 ml，即得。

供试品溶液2：精密称取样品0.5 g，共6份，分别加入对照品储备液10 ml，置入消解罐，加入浓硝酸5 ml，进行消解，再加5 %硝酸水溶液稀释至50 ml，即得。

供试品溶液3：精密称取样品0.5 g，共6份，分别加入对照品储备液20 ml，置消解罐中，加入浓硝酸5 ml，进行消解，再加5 %硝酸水溶液稀释至50 ml，即得。

每个浓度各制备6份，分别进样测定，计算各元素回收率。结果见表3。

表3 回收率试验结果

2.3.3 精密度 取待测样品按2.2.3项下方法处理，连续进样6次，计算各元素的浓度。结果，各元素含量RSD为0～12.9 %。

2.3.4 重复性 取待测样品6份，按2.2.3项下方法处理，计算各元素的浓度。结果，各元素含量RSD为0～12.6 %。

2.3.5 中间精密度 不同日期，不同操作人员分别取待测样品6份，按2.2.3项下方法处理，计算各元素的浓度。结果，各元素含量RSD为0～12.1 %。

2.4 测定结果

取不同批次待测样，按2.2.3项下方法处理后，分别进样分析，计算样品中各元素的含量。结果见表4。

表4 待测品测定结果

3 分析与讨论

3.1 样品处理方法的选择

ICP-MS的进样方式有消解进样、直接或稀释进样及有机加氧进样等方式[12-13]。消解进样具有分解快速、完全，挥发性元素损失小等优点；而直接或稀释进样适合固态样品和有机成分少的样品。本品处方中葡萄糖含量大于60 %，选择直接或稀释进样会有干扰元素被检出，对待测元素产生干扰，所以进行消解，可保证测定结果可靠[14-15]，因此选择微波消解法。

3.2 供试品消解量的确定

分别称取口服补液盐散（III）0.5，1.0，1.5 g，按2.1项方法对供试品进行消解，发现称取供试品1.0 g与1.5 g无法消解完全，因此确定取供试品0.5 g进行消解。

3.3 元素杂质的确定 和限度制定依据

按照ICH Q3D中对口服固体制剂的检测规定，需对1类、2A类元素杂质进行风险评估。口服补液盐散（III）由原料氯化钠与氯化钾引入铝、镁和锰，这3种杂质元素属于ICH Q3D中的其他元素分类，毒性较低；但上述元素杂质在含量较高条件下会引起肾毒性及肝毒性，因此同样需检测其含量。本文根据ICH Q3D关于金属催化剂或金属试剂残留限度指南规定，制定了口服补液盐散（III）中各个元素杂质的限度，并创建合理的控制上述元素杂质的方法[16]。