HIV/AIDS 合并机会性感染患者IP-10、SAA、hs-CRP、PCT、CD4+ T 细胞计数检测的意义

赵 静 李永勤 李 艳 范伟光 杨学刚

（1. 保定市人民医院感染科，河北 保定 071000；2. 保定市人民医院检验科，河北 保定 071000）

机会性感染（opportunistic infection，OI）是指当人体免疫功能下降时，寄生于人体中的一些非致病性微生物导致的感染或对致病微生物的易感性增加而发生的感染。OI是导致获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）患者死亡的重要原因，是人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染和AIDS（简称HIV/AIDS）患者管理的关键，有超过50%的HIV/AIDS患者死亡与OI有关[1-2]。由于病毒和宿主、抗病毒启动的时机差异，不同患者表现出不同的免疫状态。本研究拟通过检测HIV/AIDS患者外周血中γ-干扰素诱导蛋白10（interferon-gamma induced protein 10，IP-10）、高敏C反应蛋白（high-sensitivity C-reactive protein，CRP）、血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A，SAA）、降钙素原（procalcitonin，PCT）、CD4+T细胞计数，探讨OI对AIDS病程进展的影响。

1 材料和方法

1.1 研究对象

采用回顾性病例对照方式，选取2019年5月—2021年2月在保定市人民医院接受治疗和随访的HIV/AIDS患者187例，其中男165例、女22例，年龄（39.15±12.92）岁。根据是否合并OI将187例患者分为OI组[63例，其中男57例、女6例，年龄（39.07±13.19）岁]和无OI组[124例，其中男108例、女16例，年龄（39.30±12.47）岁]；合并OI的HIV/AIDS患者根据随访结果分为预后良好组（45例）和预后不良组（18例）。追踪所有患者感染途径，经性传播途径感染169例（90.37%）。OI涉及的疾病有马尔尼菲青霉菌病、细菌性肺炎、结核病、口腔念珠菌病、卡氏肺孢子菌肺炎、巨细胞病毒感染、疱疹病毒感染、新型隐球菌脑膜炎，有40例合并2种及以上感染。纳入标准：经保定市疾病预防控制中心采用蛋白免疫印迹法确诊为HIV-1抗体阳性，OI的诊断参照《中国艾滋病诊疗指南（2021年版）》[3]中的诊断标准。本研究经保定市人民医院医学伦理委员会审核批准[【2020】科伦审字（07）号]，所有患者均签署知情同意书。

1.2 方法

采集所有患者就诊（治疗前）和复诊（治疗4周后）时的静脉血样本，检测SAA、PCT、hs-CRP水平，另检测所有患者治疗前的CD4+T细胞计数。剩余静脉血样本分离血浆后-80 ℃冻存，统一检测IP-10和HIV RNA。

采用FS-301全自动免疫荧光定量检测仪（广州万孚公司）和配套试剂（免疫荧光法）检测SAA、PCT、hs-CRP。采用FACS Calibur流式细胞仪（美国BD公司）和配套试剂进行CD4+T细胞计数。采用酶联免疫吸附试验检测血浆IP-10水平，试剂盒（检测限为3.5 pg/mL，线性范围为31.25～2 000.00 pg/mL）购自杭州联科生物技术有限公司，检测仪器为Multiskan MK3酶标仪（美国ThermoFisher Scientific公司）。采用cobas TaqMan全自动病毒载量分析系统（瑞士罗氏公司）和配套试剂检测HIV RNA载量，检测下限和定量下限均为20拷贝/mL。严格按仪器和试剂说明书进行操作。

1.3 统计学方法

采用SPSS 25.0软件进行统计分析。采用GraphPad Prism 9.0软件作图。呈非正态分布的计量资料以中位数（M）[四分位数（P25～P75）]表示，2个组之间比较采用Mann WhitneyU检验，多组间比较采用Kruskal-Wallis检验。采用Logistic回归分析评估HIV/AIDS患者合并OI的危险因素。采用Spearman秩相关分析评估各项指标之间的相关性。采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评估各指标诊断HIV/AIDS患者合并OI的效能，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组治疗前后SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平比较

治疗前预后良好组和预后不良组SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平均显著高于无OI组（P<0.05），预后不良组治疗前IP-10水平高于预后良好组（P<0.05）。预后良好组和无OI组治疗4周后SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平均低于治疗前（P<0.05），而预后不良组治疗前后各项指标差异均无统计学意义（P>0.05）。见表1。

表1 各组治疗前后SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平比较

2.2 SAA、PCT、hs-CRP和IP-10诊断HIV/AIDS患者OI的效能

以无OI组为对照，ROC曲线分析结果显示，SAA、PCT、hs-CRP和IP-10诊断OI的曲线下面积（area under curve，AUC）分别为0.849、0.707、0.793、0.760。见图1、表2。

表2 SAA、PCT、hs-CRP和IP-10诊断HIV/AIDS患者OI的效能

2.3 HIV/AIDS 患者合并OI的危险因素分析

2.3.1 单因素分析

根据SAA、PCT、hs-CRP和IP-10的最佳临界值分别分组。单因素分析结果显示，OI组和无OI组不同CD4+T细胞、SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平所占比例差异均有统计学意义（P<0.05）。不同年龄、性别、感染途径和HIV RNA载量所占比例2个组之间差异均无统计学意义（P>0.05）。见表3。

表3 OI组与无OI组之间各项指标的单因素分析

2.3.2 多因素Logistic回归分析

多因素Logistic回归分析结果显示，CD4+T细胞计数减少和SAA、PCT、hs-CRP、IP-10升高是HIV/AIDS患者合并OI的危险因素[比值比（odds ratio，OR）值分别为0.028、15.606、25.499、9.147、10.303，95%CI分别为0.006～0.128、3.224～75.532、1.544～421.002、1.705～49.071、2.582～41.118，P<0.05]。见表4。

表4 HIV/AIDS患者合并OI的危险因素分析

2.4 IP-10、SAA、hs-CRP、PCT与CD4+ T细胞计数的相关性

IP-10、SAA、hs-CRP、PCT与CD4+T细胞计数均呈负相关（r值分别为-0.297、-0.390、-0.348、-0.264，P<0.05）。

3 讨论

HIV/AIDS患者的OI病原体种类繁多，常发生混合性感染，症状不典型，易复发，临床诊治较为困难[4]，且OI是AIDS患者死亡的重要原因。因此，早期发现和识别AIDS患者的OI非常重要。

CD4+T细胞是一种辅助性T淋巴细胞，是HIV进入人体后感染的主要靶细胞，可引起CD4+T细胞进行性减少。MOORE等[5]发现，CD4+T细胞数量减少是AIDS患者合并OI的主要原因。目前，CD4+T细胞计数已成为判定AIDS患者病情、预测临床进展和评价抗病毒治疗疗效的重要指标[6]。本研究结果显示，CD4+T细胞计数减少是HIV/AIDS患者发生OI的危险因素（OR=0.028，95%CI为0.006～0.128），相对于CD4+T细胞<200个/μL的HIV/AIDS患者，CD4+T细胞≥200个/μL的患者发生OI的风险降低97.2%。本研究中，OI组和无OI组HIV RNA载量差异无统计学意义（P>0.05），与BOULWARE等[7]的报道一致，与王政等[8]的报道不一致，可能是由于统计方法不同所致。研究AIDS患者HIV RNA载量下降的程度更有意义[9]，但本研究由于随访患者较少而未进行分析，这也是本研究的不足之处。

当机体受到细菌、病毒、真菌、原虫等的刺激后，会产生一系列的病理生理变化，如白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α调控表达升高，促使肝脏合成大量淀粉样蛋白A和CRP，在急性感染期，SAA、CRP可升高达1 000倍；PCT由甲状腺C细胞产生，细菌感染时会被大量释放入血液[10]。SAA是细菌、病毒感染的双敏感因子[11]，PCT、CRP只对细菌感染敏感[12]。本研究结果显示，合并OI的HIV/AIDS患者治疗前SAA、PCT、hs-CRP、IP-10水平显著高于未合并OI的患者（P<0.05），治疗4周后，预后良好组和无OI组SAA、PCT、hs-CRP、IP-10水平均显著降低（P<0.05），但是预后不良组治疗前后差异无统计学意义（P>0.05），SAA、PCT、hs-CRP和IP-10升高是HIV患者合并OI的危险因素[OR值分别为15.606、25.499、9.147、10.303，95%CI分别为3.224～75.532、1.544～421.002、1.705～49.071、2.582～41.118，P<0.05]，与文献报道[14-15]一致。CRP、SAA、PCT水平与HIV疾病进展和OI有关，基线CRP、SAA、PCT水平较高的HIV/AIDS患者更易发生OI，对HIV/AIDS患者预后评估也有一定的价值[13-14]。

IP-10是目前研究较多的一种γ干扰素诱导趋化因子，属于一种促炎因子，参与了白细胞迁移至炎症组织的过程，维持炎症反应，在炎症性组织损伤中起关键作用，是很多感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤进展相关的标志物[15-17]。本研究结果显示，预后不良组、预后良好组、无OI组IP-10水平依次升高（P<0.05），这与CRP、SAA、PCT等急性时相反应蛋白的表现不同。ROC曲线分析结果显示，IP-10诊断OI的Youden指数最高（0.703），说明IP-10判定OI的真实性优于急性时相反应蛋白。这可能是由于IP-10不仅募集、活化T细胞等免疫细胞，参与炎症反应，导致一些细胞因子水平发生变化；还参与了HIV的复制过程，促进静息记忆CD4+T细胞中潜伏的HIV激活；另外，高水平的IP-10会抑制T细胞的增殖能力和自然杀伤细胞的功能，不仅增加了HIV高危人群对HIV的易感性，也增加了对其他病原体的易感性[18-19]。

本研究结果还显示，IP-10、SAA、hs-CRP、PCT与CD4+T细胞计数均呈负相关（r值分别为-0.297、-0.390、-0.348、-0.264，P<0.05）。进一步说明SAA、PCT、hs-CRP、IP-10与HIV/AIDS患者合并OI有关。

综上所述，SAA、PCT、hs-CRP、IP-10在HIV/AIDS患者合并OI的诊断和预后评估中均有一定价值。由于本研究样本量较小，且缺乏随访数据，因此研究结论尚需大样本、多中心研究进一步验证。