牛布鲁氏菌病防控模式新探索

傅 莉，李晓雪

（1. 古浪县农业综合服务中心，甘肃 古浪 733101；2. 武威市畜牧兽医总站，甘肃 武威 733000）

布鲁氏菌能够引起牛、羊、猪等动物和人的布鲁氏病，常称“布病”，是我国二类人畜共患传染病。主要引起病畜不孕、流产、睾丸炎等和人的似感冒、似风湿及流产、不孕等症状，不仅在养殖上造成极大的经济损失，更是严重危害人类健康和公共卫生安全。布鲁氏菌因其在胞内生长繁殖不易被药物治疗、反复感染和尚未清晰发病机制等特点，从1905年被正式报道至今仍未被消除净化，目前布鲁氏菌的防控已成为动物养殖和医学界的共同难题。

近年来，地方政府把养牛产业作为产业发展的“重点工程”，养牛数量激增造成了更为严峻的疫病防控风险，尤其布病这个危害性极为严重的人畜共患病。牛布病将会引起不孕、流产、死胎等，严重影响养牛效益，更会污染周围环境，增加人感染布病的风险，因此牛布病的科学防控是对畜牧业持续发展和保障人民健康的重要措施之一。本文将对牛布鲁氏菌病的防控模式进行探索，以期在布病防控中找到效果好、成本低、易操作的防控方式。

1 构建生物安全体系

牛布鲁氏菌病的生物安全体系的构建包括养牛、产品加工和销售运输等各个环节；还包括牛场的选址布局和周边环境、硬件设施设备和软件饲养管理、人员车辆和环境卫生消毒、病死畜和排泄物或污染物的无害化处理等。构建合格的布鲁氏菌病生物安全体系能够有效避免布鲁氏菌入侵，减少牛的患病几率，从而降低布病感染造成的损失和风险，在源头做好布病防控。

1.1 牛场设计与环境 参照《生鲜乳生产技术规程（试行）》进行选择，包括地势、水源、土质、气象、交通、周边环境等。合理布局，需包括生活管理区、辅助生产区、生产区、粪污处理区和病畜隔离区等功能区，需做好道路、牛舍、牛床、水质、运动场、排水、粪污处理等场地设施。

1.2 配套设施设备 配套生产设施有饲草饲料加工投喂设施、通风及照明设施、雨水和污水分离的排水设施及消毒设施，场区入口和生产区入口处均需设置车辆消毒池或喷雾式消毒设备，人员通道需配备蒸汽消毒设施和消毒地垫，物品消毒间设有紫外灯、消毒柜或熏蒸设备，场区、圈舍内备有消毒车和消毒垫等；无害化处理设施应设有堆粪池、化尸池、焚烧炉或无害化处理暂存区等。

1.3 饲养管理 分别做好犊牛、青年牛、成年牛的饲养和管理。做好日粮搭配、保证充足的饲料营养和清洁新鲜的饮水供应，注意添加维生素和矿物质。做好饲草饲料的管理，对购入的青贮饲料、精料、饲料添加剂等进行质量检验，做好购买和使用记录等，将饲料专库储存，定期检查，避免受潮霉变和防虫防鼠。做好引种管理，正规渠道购买引入精液、胚胎、种牛等，引种时注意证章证明等的检查、验收和保管。对引入牛要进行整群检测，隔离观察30 d，无发病死亡等现象方能混群饲养。同时注意做好圈舍防寒保暖、散热通风、卫生打扫、定期消毒。注意牛的健康状况观测和记录。建立自繁自养制度。

1.4 防疫管理

（1）消毒：建立消毒制度。按照消毒技术规范采用不同消毒液不同方式对场区、圈舍、工具、人员、车辆等进行消毒。场区、圈舍每半月至少消毒一次，人员车辆每进出一次场区和生产区均要消毒，工具使用前后消毒并在平时做好清洁保管。认真做好每次消毒，保证消毒时间和效果，做到不留死角，并做好消毒记录。

（2）监测：按照《布鲁氏菌病防治技术规范》根据地方区域性和养殖场情况制定布病监测计划，实行病原学监测和免疫抗体监测。奶畜和种畜每年进行2 次阳性检测，进行淘汰和处置。免疫后进行抗体检测，不合格的及时进行补免。

（3）免疫：做好布病免疫，建立免疫制度、科学制定免疫程序、建立免疫档案，使用农业农村部批准的布病疫苗，实行区域性强制免疫，奶牛原则上不免疫（泌乳期奶牛禁止免疫），免疫后要进行抗体效价检测。

1.5 无害化处理 需按照《病害动物和病害动物产品生物安全处理规程》和《粪便无害化卫生要求》对病原学阳性牛及其产品和污染物、牛群粪污等进行无害化处理。

1.6 制度运行管理 制定生物安全、人员车辆、无害化处理等管理制度并严格按照制度维护运行。有专人负责生物安全管理，对场区人员进行生物安全知识、疫病防控、消毒、饲养技术等的培训和考核；建立人员健康档案，禁止人畜共患病人员进行生产工作；做好生产人员和防疫人员的安全防护工作，避免人员被感染；建立车辆流通管理制度，防止外来车辆携带病原菌造成风险隐患；配备专职兽医人员，对布病进行监测和诊断。

2 免疫接种

控制布病的最佳方式是免疫接种，目前所用的疫苗多为弱毒疫苗。虽然具有较好的免疫效果，但存在毒力返强、引发孕畜流产、疫苗感染人和无法区分自然感染等缺点。因此，学者们开启了向低毒力、高免疫性、能区分自然感染等的布鲁氏菌疫苗新的研究方向。

研究人员对布鲁氏菌的探索从病原学诊断到疫苗免疫及监测，从基因型分类到机体作用机制逐步深入。标记疫苗有望满足安全性、保护性、功能性俱佳的条件，尤其是基因缺失疫苗几乎完全符合学者们的期盼，成为了近年来的研究热点。目前我国已成功上市了牛布氏菌病活疫苗（A19-△VirB12株），其特点为低毒、有效、能鉴别野毒感染。

2.1 A19- △VirB12 株疫苗 VirB12 蛋白是布鲁氏菌免疫蛋白中IV 型分泌系统（T4SS）的成员。IV 型分泌系统（T4SS）是帮助布鲁氏菌在巨噬细胞中定植、逃避溶酶体降解的一个复合蛋白体，包括VirB1～VirB12 共12 种蛋白，是布鲁氏菌的关键的毒力因子，与布鲁氏菌胞内复制和感染相关。在这12 个蛋白中有三个是非必需蛋白，即VirB12 蛋白、VirB1 蛋白、VirB7 蛋白，它们的作用是增强T4SS 分泌和感染细胞功能。因此VirB12 基因的缺失只会弱化T4SS 系统的免疫功能，进而影响和降低布鲁氏菌的毒力，而且不会改变布鲁氏菌菌株的生理和化学特性，可制成VirB12 基因缺失疫苗。

牛布氏菌病活疫苗（A19-△VirB12 株）是将布鲁氏菌A19 株通过现代分子生物学技术敲除VirB12 基因而获得的基因缺失疫苗。该疫苗于2020年7 月获得中华人民共和国新兽药注册证书《布氏菌病活疫苗（A19-△VirB12 株）》获批上市。新疆维吾尔自治区畜牧科学院兽医研究所和天康生物制药有限公司已对该基因缺失疫苗进行了十余年的研究、试验和论证，证实了该疫苗的安全性和有效性。同时，该疫苗为我国第一株可以鉴别牛布鲁氏菌疫苗免疫和野毒株天然感染的疫苗。

2.2 疫苗免疫和野毒株天然感染的鉴别 牛布氏菌病活疫苗（A19-△VirB12 株）可以利用VirB12 蛋白的表达与否来鉴别天然感染的野毒株和疫苗免疫，具有鉴别功效。钟旗等建立了用A19-ΔVirB12 株中因敲除基因无法表达的VirB12 蛋白作为标记抗原的一种间接ELISA 方法，目的用于鉴别和区分牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12 疫苗免疫所产生的抗体和天然感染产生的抗体。任立松等发明建立了将VirB12 蛋白、BMEI 1330（内参蛋白）两个蛋白按比例混合后作为酶标底物的一种间接ELISA 技术同样可以鉴别和区分布鲁氏菌病A19-ΔVirB12 疫苗的免疫与天然野毒株感染，且已经组装成了标准试剂盒。

2.3 免疫程序 牛布氏菌病活疫苗（A19-△VirB12株）用于预防牛布鲁氏菌病，免疫有效期为12 个月。疫苗免疫后15～180 d 可用ELISA（VirB12）方法区分本疫苗和野毒株感染。3～8 月龄皮下注射5 mL/头，根据抗体水平和布鲁氏菌病流行情况进行补免。疫苗2～8 ℃或-15 ℃条件下贮存，有效期为12 个月，需冷藏运输。免疫疫苗时要注意人员配备和防护，对使用过的一次性用品、疫苗空瓶等进行无害化处理。

3 政府引导

政府部门对本地区牛布鲁氏菌病的发生流行情况进行检测和调查，根据实际情况制定牛布病防控实施方案，提出防控目标、防控机制、防控措施，需投入大量资金用以布病防控。布病防控的基本原则坚持人病兽防、关口前移、坚持科技引领，推动畜间布病快速鉴别诊断技术和防控模式创新应用。政府部门在布病监测排查、强制免疫和评价、布病净化和无疫小区建设、调运监管、基层动物防疫检疫人员生物安全防护、布病防治和群众知识普及等方面需加强组织领导、保障经费投入、强化部门协作。

4 讨论与结论

布鲁氏菌病的防控已成为世界难题，尤其在人畜共患病方面。因人的布鲁氏菌病无法根除治疗，给患者的身心造成了严重的伤害。2022 年我国报道的人间布病71437 例，较2021 年增加了1670 例，可见我国人间布病仍在增加，防控形势依然严峻。在人畜共患病防控方面，我国提出“人病兽防、关口前移”，因此做好畜间布病的防控对人间布病的控制尤为重要。

当前，畜牧业发展日新月异，奶牛产业势头正盛、肉牛产业蒸蒸日上，而疫病防控风险也伴随提高，集约化、数字化、综合化的规模养牛场已成为市场主力。规模养牛场在牛的健康养殖上越发积极，在疫病防控上越发重视，且牛场的管理制度也越发健全完善，尤其在牛场的生物安全管理上越发科学规范。做好生物安全管理和生物安全体系建设是更直接、更有效、更低成本的防控疫病、保障养殖、增加效益的方法，因此，做好牛的布病的防控首先要做好生物安全体系建设。生物安全体系建设不仅可以有效控制牛布病发生和流行，也能做好其他疫病的防制。

疫苗不仅可以保障规模场牛的养殖，更能保障无法建立生物安全体系的散养户牛的健康养殖和利益。牛布鲁氏菌疫苗的使用是现阶段我国防控牛布病的主要方法，能够很好的预防牛感染布病。我国牛布鲁氏菌疫苗的安全性、稳定性、有效性越来越高，新型疫苗的研制使疫苗的可供选择性也越来越多，这对牛布病防控来说及其有利。

奶牛原则上不免疫布鲁氏菌疫苗，为保障奶牛健康除了做好生物安全体系建设外，更应该做好布病净化。布病净化可以依据完善的法律法规，采取“检测- 扑杀- 无害化处理- 监测- 净化”的技术路线和科学严谨的评估方式，建立布病净化场和无疫小区。肉牛养殖场也应当建立净化制度，做好净化管理。布鲁氏菌病的净化将成为布病防控今后一个阶段的主要目标和任务。

牛布鲁氏菌病的防控模式可从建立生物安全体系、新型疫苗利用、布病净化和政府政策等方面进行探索，寻找出实际可行的防控新模式。