10%嘧啶肟草醚悬浮剂的高效液相色谱分析

夏友青，龚顺泽，金银秀，徐德锋

（台州职业技术学院医药学院，浙江 台州 318000）

嘧啶肟草醚（Pyribenzoxim）是由韩国LG 化学集团研发的嘧啶水杨酸类除草剂，主要通过抑制乙酰乳酸合成酶而起除草的作用，是一种广谱选择性芽后除草剂。对水稻田多种一年生禾本科杂草、阔叶杂草、莎草科杂草均具有明显的防效，使用方式灵活，既可用于水稻直播田又可用于水稻移栽田，使用技术简单［1-4］。有关嘧啶肟草醚的分析方法标准研究相对较少。关于嘧啶肟草醚残留的分析方法报道，潘金菊等［5］、张玉婷等［6］建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定水稻中嘧啶肟草醚残留量的方法，陈晓林等［7，8］建立了嘧啶肟草醚在水稻田土壤、植株和大米（糙米）中的残留分析方法。本研究通过试验研究，建立了10%嘧啶肟草醚悬浮剂的定量分析方法，该方法具有操作简单、快速、准确等特点。

1 材料与方法

1.1 试剂

乙腈（色谱纯）、甲醇（色谱纯）［阿拉丁试剂（上海）有限公司）］；超纯水；嘧啶肟草醚标准品，10%嘧啶肟草醚悬浮剂样品（江苏润泽农化有限公司）。

1.2 试验仪器

Agilent 1260 型高效液相色谱仪，具有紫外列检测器、自动进样器和色谱工作站；ODS-3 色谱柱（C18，250.0 mm×4.6 mm，5 μm，日本岛津公司）；Millipore integral 10 型超纯水系统（密立博中国有限公司）；XS205 型分析天平（梅特勒-托利多公司）；0.45 μm 尼龙滤膜（上海安谱实验科技股份有限公司）［9-11］。

1.3 液相色谱操作条件

流动相为乙腈∶水∶乙酸=800∶200∶0.5（体积比）；柱温为室温；流速1.0 mL∕min；检测波长245 nm；进样体积10 μL，保留时间约14 min。

1.4 测定步骤

1.4.1 标准溶液配制 准确称取嘧啶肟草醚标准样品0.038 5 g（精确至0.2 mg），置于50 mL 容量瓶中，加适量乙腈超声溶解5 min，冷却至室温后加乙腈定容摇匀，用0.45 μm 微孔滤膜过滤，静置备用。

1.4.2 试样溶液配制 准确称取嘧啶肟草醚试样0.396 0 g（精确至0.2 mg），置于500 mL 容量瓶中，加适量乙腈超声溶解5 min，冷却至室温后加乙腈定容摇匀，用0.45 μm 微孔滤膜过滤，静置备用。

1.4.3 测定 在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标准溶液，待各针相对响应值变化小于1.5%时，按照标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进样测定。

1.4.4 质量分数计算 将测得的2 针试样溶液和试样溶液前后2 针标准溶液中嘧啶肟草醚的峰面积（图1、图2）分别取平均值。试样中嘧啶肟草醚的质量分数X（%）按下式计算。

图1 嘧啶肟草醚标样色谱分布

图2 10%嘧啶肟草醚悬浮剂色谱分布

式中，A1为标准溶液中嘧啶肟草醚峰面积的平均值；A2为试样溶液中嘧啶肟草醚峰面积的平均值；m1为嘧啶肟草醚标样的质量，单位为g；m2为嘧啶肟草醚试样的质量，单位为g；P为标准品中嘧啶肟草醚的质量分数，单位为%。

2 结果与分析

2.1 色谱条件的选择

通过Agilent 1260 型高效液相色谱仪的光谱数据采集功能，获得嘧啶肟草醚的紫外可见吸收光谱（图3）。从图3 中可以看到，在吸收波长190～400 nm区域内，嘧啶肟草醚有2个吸收峰波长分别在202 nm和245 nm 附近，由于最大吸收波长202 nm 附近溶剂的干扰比较明显，因此将检测波长定为245 nm。依据嘧啶肟草醚的理化性质，选用乙腈和酸性水溶液作为流动相，用乙腈溶解样品，二者均能很好地分离且峰形对称，基线平稳，结果较好。

图3 嘧啶肟草醚全波长扫描结果

2.2 线性相关性测定

在上述色谱分析条件下，配制了一系列不同质量浓度的嘧啶肟草醚标准溶液进行测定。以质量浓度（x）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标，得到嘧啶肟草醚的线性相关曲线。线性方程为y=21 406x+57.41，相关系数r=0.999 6，表明使用该方法测定的嘧啶肟草醚标准品在0.10～0.98 g∕L 浓度范围内线性相关性良好。

2.3 精密度测定

按照上述分析条件，取配制好的10%嘧啶肟草醚悬浮剂溶液，平行进样5 次，计算嘧啶肟草醚的标准偏差和相对标准偏差（RSD），考察该分析方法的精密度，结果见表1。由表1 可知，该方法的相对标准偏差较小，仅为0.12，说明分析方法的仪器精密度较好。

表1 10%嘧啶肟草醚悬浮剂精密度测定

2.4 准确度测定

在已知质量浓度的10%嘧啶肟草醚悬浮剂中，分别添加不同量的10%嘧啶肟草醚标准品。按照上述色谱条件分析其含量，计算回收率，结果见表2。由表2 可知，使用该分析方法的回收率在98.11%～100.00%，平均回收率为98.48%，说明测量准确度较好。

表2 10%嘧啶肟草醚悬浮剂加标回收率的测定

3 结论

本研究通过对流动相与检测波长的选择，精确度与回收率的验证等，建立了10%嘧啶肟草醚悬浮剂的高效液相色谱分析方法。该方法嘧啶肟草醚在0.10～0.98 g∕L 的质量浓度范围内具有良好的线性关系（r=0.999 6）；标准偏差为0.12，相对标准偏差为1.21%，方法的仪器精密度较高；平均加标回收率为98.48%，准确度较好。该方法具有操作简便、快速、经济等特点，适合在生产和试验中对10%嘧啶肟草醚悬浮剂进行定量分析，是进行产品质量检测较理想的分析方法。