亚甲蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂的影响因素探讨

邓 杰

（广东省中山生态环境监测站，广东 中山 528400）

亚甲蓝分光光度法GB7494—1987 中测定阴离子表面活性剂常规方法需进行三次萃取[1]、三次反洗，最后将氯仿层合并通过脱脂棉，放入50 mL 容量瓶中再进行比色。而该标准附录B 中说明在需要快速分析时，可采用一次萃取简化法，在确保测量结果准确无误下一次萃取操作过程比较简单，在大批量测定中花费时间短且不容易积累误差，同时在测定过程中还不需要使用大量的易挥发、毒性较大的有机试剂三氯甲烷，减轻三氯甲烷对环境和实验人员的健康安全的影响。

1 实验部分

1.1 实验原理

阳离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的盐类，统称亚甲蓝活性物质（MBAS）。该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长652 nm 处测量氯仿层的吸光度。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 仪器

紫外可见分光光度计GENESYS150。

1.2.2 试剂

详见《水质 阴离子表面活性剂的测定 亚甲蓝分光光度法GB 7494—1987》。

1.3 实验步骤[2]

1.3.1 三次萃取的步骤

将水样移至分液漏斗，以酚酞为指示剂，逐滴加入氢氧化钠溶液（1 mol/L）至水溶液呈桃红色，再滴加硫酸（0.5 mol/L）到桃红色刚好消失；加入25 mL 亚甲蓝溶液，摇匀后再移入10 mL 氯仿，激烈振摇30 s，注意放气，再缓慢旋转分液漏斗，使滞留在内壁上的氯仿液珠降落，静置分层；将氯仿层放入预先盛有50 mL洗涤液的第二个分液漏斗，用数滴氯仿淋洗第一个分液漏斗的放液管，重复萃取3 次，每次用10 mL 氯仿；合并所有氯仿至第2 个分液漏斗中，激烈摇动30 s，静置分层，将氯仿层通过玻璃棉或脱脂棉，放入50 mL容量瓶中。再用氯仿萃取洗涤液2 次（每次用量5 mL），此氯仿层也并入容量瓶中，加氯仿到标线，用10 mm比色皿，测定波长652 nm 处的吸光度值，以氯仿为参比测定样品的吸光度。

1.3.2 一次萃取的步骤

将水样移至分液漏斗，以酚酞为指示剂，逐滴加入氢氧化钠溶液（1 mol/L）至水溶液呈桃红色，再滴加硫酸（0.5 mol/L）到桃红色刚好消失；加入25 mL 亚甲蓝溶液，摇匀后再移入10 mL 氯仿，激烈振摇30 s，注意放气，再缓慢旋转分液漏斗，使滞留在内壁上的氯仿液珠降落，静置分层；将氯仿层放入预先盛有50 mL洗涤液的第2 个分液漏斗，用数滴氯仿淋洗第1 个分液漏斗的放液管，激烈摇动30 s，静置分层，将氯仿层通过玻璃棉或脱脂棉，放入10 mm 比色皿中，测定波长652 nm 处的吸光度值，以氯仿为参比测定样品的吸光度。

2 结果与分析

2.1 萃取次数对实验的影响

从表1 可以看出，国家标准常规方法测定的样品吸光度比快速分析方法的吸光度要大，且样品浓度越大吸光度的差距就越大，国家标准常规方法的萃取效率比快速分析方法的萃取效率要高。

表1 不同方法对测定吸光度的影响

从表2 标准曲线的测定中可以看出，国家标准常规方法的曲线相关系数在0.999 5～0.999 6，快速分析方法的曲线相关系数在0.999 4～0.999 5，两种方法相比，曲线的截距相差不大，斜率相差比较明显，但是两种方法的线性关系都良好，相关系数都能满足曲线的要求。

表2 标准曲线的测定

从表3 可以看出，在国家标准常规方法下测定的不同浓度的标准样品均符合要求，快速分析方法下测定的不同浓度的标准样品均符合要求，但是国标常规方法下的标准样品更接近中值。

表3 标准样品的测定

2.2 三氯甲烷试剂对实验的影响

对于三氯甲烷试剂对阴离子表面活性剂的影响，选择广东广试试剂科技有限公司生产的三氯甲烷（分析纯500 mL），利安隆博华（天津）医药化学有限公司（优级纯500 mL）进行测试，测试结果如表4。

表4 不同三氯甲烷对比

由表4 可见，2 个品牌的三氯甲烷的吸光度差别较大，且浓度越高，吸光度的差距就越大，可见三氯甲烷的纯度对实验的吸光度有较大的影响，且含杂质较高、透明度低的三氯甲烷的空白值也大，使用前应验证三氯甲烷是否符合实验要求。

3 结论

1）从实验中可以看出，国家标准常规方法和快速分析方法在标准曲线和测定样品浓度均满足实验要求，国家标准方法萃取效率较高，测定标准样品更加接近于中值。而快速分析方法在实验过程中减少了三氯甲烷的用量和萃取次数，降低了监测人员的工作量和对环境的污染。

2）三氯甲烷的纯度直接影响实验的吸光度，在使用前应对三氯甲烷进行验证。