外周血Tfh/Tfr比例及sPD-L1、PIC表达与弥漫大B细胞淋巴瘤患者化疗效果的关系

梁倩

(周口市中心医院 血液科,河南 周口 466000)

弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)恶性程度较高[1-3]。目前,DLBCL的治疗措施包括化疗、放疗、免疫治疗等[4-5]。然而由于肿瘤微环境中免疫细胞的异常分布和功能,不同患者对化疗的反应有差异,部分患者难以获得理想的疗效[6]。

滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell,Tfh)是一种能够促进B细胞产生抗体的T细胞,而滤泡调节性T细胞(follicular regulatory T cells,Tfr)则是一种能够抑制B细胞产生抗体的T细胞[7]。Tfh/Tfr比例的变化与恶性淋巴瘤的发生和预后相关[8]。可溶性程序性死亡配体-1(soluble programmed deathligand-1,sPD-L1)、纤溶酶α2纤溶酶抑制剂复合物(plasmin inhibitor complex,PIC)是与DLBCL发生发展密切相关的细胞因子,其血清水平与免疫治疗的疗效密切相关[9]。为探究外周血Tfh/Tfr比例及sPD-L1、PIC表达与DLBCL患者化疗疗效之间的关系,本研究对比了经化疗后有效的DLBCL患者与无效的DLBCL患者血清中以上指标的差异。

1 对象与方法

1.1 研究对象

将2019年4月至2022年4月在周口市中心医院接受化疗治疗的106例DLBCL患者纳入本次研究,根据化疗效果分为有效组(68例)和无效组(38例)。纳入标准:符合2016年世界卫生组织恶性淋巴瘤分类诊断中的标准[4];年龄18～75岁;化疗方案为吉西他滨联合顺铂联合地塞米松方案;化疗效果评价采用《中国淋巴瘤治疗指南2018版》[10]中的标准。排除标准:伴有其他类型的恶性肿瘤;肝、肾功能衰竭;人类免疫缺陷病毒感染;长期使用糖皮质激素、免疫调节剂等;接受化疗疗程不足,转院治疗等;其他情况导致患者治疗期间死亡等。本研究经周口市中心医院医学伦理委员会审批。

1.2 检查方法

采集患者清晨空腹外周肘静脉血5 mL,通过流式细胞仪检测外周血CD4+T 细胞(Tfh细胞)、CD4+T细胞(Tfr细胞),并计算Tfh /Tfr比值;采用双抗体夹心-酶联免疫吸附法测定外周血sPD-L1 水平;通过全自动免疫分析仪检测PIC水平。

1.3 治疗方法

根据指南[10],第1天和第8天给予1 000 mg·m-2的吉西他滨(江苏奥赛康药业股份有限公司,国药准字H20093698),第1天给予75 mg·m-2的顺铂(齐鲁制药有限公司,国药准字H37021358),第1～4天给予40 mg·m-2的地塞米松(齐鲁制药有限公司,国药准字H12020514)。

1.4 病情判断

采用《中国淋巴瘤治疗指南2018版》中的标准评价DLBCL患者化疗效果,将其分为完全缓解、部分缓解、稳定、进展。将完全缓解和部分缓解计入化疗有效。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 Tfh/Tfr、sPD-L1、PIC

106例患者化疗2个周期,其中68例患者化疗有效,38例患者化疗无效,化疗有效组患者的Tfh、Tfh/Tfr、sPD-L1、PIC低于无效组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组患者Tfh/Tfr、sPD-L1、PIC比较

2.2 基础资料

两组患者的年龄、体重指数(body mass index,BMI)、性别及合并基础疾病情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 两组患者基础资料比较

2.3 临床检查指标

无效组患者乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)>350 U·L-1患者占比、肿瘤分期Ⅲ+Ⅳ期患者占比、发生结节外侵犯患者占比、淋巴瘤国际预后指数(lymphoma international prognostic index,IPI)评分>2分患者占比均高于有效组患者(P<0.05);两组患者的美国东部肿瘤协作组(eastern cooperative oncology group,ECOG)评分、EB病毒(epstein-barr virus,EBV)感染率、骨髓浸润、结节外侵犯数量、肿瘤细胞起源情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 两组患者临床检查指标比较[n(%)]

2.4 影响化疗效果的多因素分析

以单因素分析有统计学意义的指标(LDH水平、肿瘤分期、结节外侵犯、IPI评分、Tfh/Tfr、sPD-L1、PIC)作为自变量,患者化疗效果是否有效作为因变量,建立logistic回归模型,结果显示:LDH水平>350 U·L-1、肿瘤分期为Ⅲ期或Ⅳ期、IPI评分>2 分、Tfh/Tfr较高、sPD-L1较高、PIC较高是DLBCL患者化疗无效的独立危险因素(P<0.05)。见表4。

表4 logistic回归因素分析结果

3 讨论

淋巴瘤是一种临床常见的恶性肿瘤,根据病理类型分为霍奇金淋巴瘤及非霍奇金淋巴瘤[11]。DLBCL是非霍奇金淋巴瘤中最常见的类型,其在人群中的发病率较高[12]。化疗是DLBCL的主要治疗方式之一[13]。不同的DLBCL患者对化疗的敏感度不同,部分患者出现耐药。有研究表明,肿瘤细胞凋亡通路相关基因的异常表达导致细胞凋亡功能下降以及肿瘤微环境的变化等可能参与DLBCL患者对化疗药物的耐药[14]。寻找敏感的DLBCL患者化疗的疗效评价指标,对提高DLBCL患者疗效、降低病死率具有重要意义。Tfh/Tfr比例反映体液免疫反应的平衡状态,sPD-L1可以抑制T细胞的活性,从而调节免疫应答,PIC可以促进B细胞的增殖和分化,二者均参与了DLBCL的发生发展[15]。本研究结果显示,化疗有效组患者的Tfh、Tfh/Tfr、sPD-L1、PIC低于无效组。Tfh和Tfr是两种重要的淋巴细胞亚群,前者辅助B细胞产生免疫应答,后者具有免疫应答抑制作用[16]。Tfr水平较高的DLBCL患者可能因其免疫抑制特性而导致治疗效果不佳。高水平的Tfr能够抑制Tfh的表达,从而抑制正常的免疫应答,这可能导致化疗过程中对肿瘤细胞的消灭不完全。此外,Tfr还可以通过增加恶性B细胞的生长和生存来促进DLBCL的发展和化疗耐药性。因此,Tfh、Tfh/Tfr可用于预测DLBCL患者的化疗效果,较高水平的Tfh、Tfh/Tfr提示更高的耐药性。PD-L1/PD-1、PIC是免疫负调节通路[17-18],参与抑制性肿瘤微环境的形成,进而帮助肿瘤获得免疫逃逸,导致DLBCL对化疗药物效果不理想。本研究表明sPD-L1、PIC也可能成为预测DLBCL化疗效果的有用指标,其水平高提示DLBCL对化疗药物效果不理想。本研究多因素分析显示,Tfh/Tfr较高、sPD-L1较高、PIC较高是DLBCL患者化疗无效的独立危险因素,进一步验证了Tfh/Tfr、sPD-L1、PIC水平与患者化疗效果不理想的相关性。

本研究结果显示,LDH水平>350 U·L-1、肿瘤分期为Ⅲ期或Ⅳ期、IPI评分>2分是DLBCL患者化疗无效的独立危险因素。LDH是机体重要的糖酵解酶,参与各类癌细胞增殖过程。淋巴系统中β2-MG可以促进LDH的产生,DLBCL患者中β2-MG水平升高,导致LDH产生增加,且LDH的升高水平与疾病进展具有协同性。IPI评分是DLBCL常用的危险分层量表,分值越高提示肿瘤恶性程度越高。研究表明,肿瘤分期晚、合并症多、肿瘤进展都是导致DLBCL对化疗效果不理想的重要因素[19],本研究结果与之一致。

4 结论

化疗无效的DLBCL患者Tfh/Tfr、sPD-L1、PIC水平高于化疗有效的患者,与患者化疗效果不佳具有相关性。LDH水平>350 U·L-1、肿瘤分期为Ⅲ期或Ⅳ期、IPI评分>2分、Tfh/Tfr较高、sPD-L1较高、PIC较高是DLBCL患者化疗无效的独立危险因素,临床诊疗过程中可以监测DLBCL患者Tfh/Tfr、sPD-L1、PIC水平,从而预测化疗药物的疗效。