莫西菌素微乳制剂对小尾寒羊生长性能、血液生化指标及胃肠道线虫驱虫效果的影响

■ 张国华 金振华 王丽坤 张 备 沈思思 薛沾枚 林秀蔚 张 艳

（黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，黑龙江齐齐哈尔 161005）

畜禽寄生虫类疾病对养殖业的发展危害极大，且胃肠道线虫病在日常养殖业中十分常见[1]。我国部分地区羊消化道线虫的感染率为27%～100%，85.7%的群体对伊维菌素（Ivermectin，IVM）耐药，75.0%的群体对阿苯达唑耐药，并且存在对IVM 和阿苯达唑双重耐药的情况[2]。目前主要以IVM类药物治疗消化道线虫病，但是长期大量地使用相同的药物会产生耐药性，降低用药效果[3-4]。耐药性的产生促使得我们必须尽快选择出更适合的药物、剂型、剂量来解决目前羊消化道线虫治疗困难的问题。

莫西菌素（Moxidectin，MXD）是由链霉素发酵的单一成分的大环内酯类抗生素，其作用机制和驱虫范围与IVM 类似，然而由于其亲脂性等特点导致了其具有更好的药效[5]。目前MXD 被广泛应用于猪、牛、羊等动物的寄生虫病的预防与治疗[6-8]。微乳载体系统相对于普通给药系统有可减少给药次数、降低毒副反应、增加药物治疗稳定性等优点。

本研究将MXD 与微乳载体系统相结合，以有效地增加其溶解度，获得更好的稳定性，帮助药物的释放以及吸收，提高生物利用度和降低应激[9-10]。MXD因其特殊的亲脂性可以制备出很多剂型，但目前国内外未见关于MXD 微乳制剂对小尾寒羊生产性能、血清生化指标、胃肠道线虫防治效果的研究，因此本研究对MXD 微乳制剂的小尾寒羊生长性能和血液生化指标的影响进行初步研究，并将其与IVM注射剂、MXD 注射剂和MXD 微乳制剂注射剂对胃肠道线虫的治疗效果进行比较，为MXD 微乳制剂的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

MXD 微乳制剂（主要成分：MXD 含量为1%；批号：20220320）黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院自制；IVM 注射液（主要成分：IVM 含量为1%；批号：20220120）购自重庆方通动物药业有限公司；MXD 注射液（主要成分：MXD 含量为1%；批号：20211220）购自安徽天安生物科技有限公司；血清生化检测白蛋白(ALB；批 号20220418)、谷 丙 转 氨 酶（ALT；批 号20220527）、谷草转氨酶等(AST；批号20220613)、肌酸激酶（CK；批号：20220312）、乳酸脱氢酶（LDH；批号：20220329）、尿素氮（UREA；批号：20220607）购自深圳雷杜生命科学股份有限公司。基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.2 主要仪器

制冷离心机（LEGEND MICRO 17R）购自赛默飞世尔中国有限公司，电子天平(TD30001C)购自天津天马电子衡器有限公司，全自动生化分析仪（BS220）购自深圳迈瑞医疗器械有限公司，显微镜（E200）购自尼康仪器（上海）有限公司。

1.3 试验动物及分组

试验在黑龙江省西部地区某小尾寒羊养殖场开展，通过饱和盐水漂浮法及麦克马斯特氏法测定粪便中含有虫卵的母羊125 只，3 月龄左右，体重（24.26±1.67）kg，在试验前2周未使用驱虫药及抗生素。试验动物随机分为5组，每组25只，分别为空白对照组（不注射任何药物）、IVMSC0.2组（皮下注射IVM 0.2 mg/kg）、MXDSC0.2组（皮下注射MXD 0.2 mg/kg）、MXDSC0.2微乳组（皮下注射1倍剂量MXD 微乳，0.2 mg/kg）、MXDSC1.0微乳组（皮下注射5倍剂量MXD微乳，1.0 mg/kg）。各试验动物在试验当天早上用药，皮下注射为颈部皮下注射，按照试验分组分栏饲养。在试验前2 周安排进入新的饲养环境以减少应激反应的发生，试验期间自由采食干草、全价饲料和水。饲料不含抗生素及驱虫药，舍饲，观察小尾寒羊的临床表现。

1.4 生长性能测定

试验的第0天第30天早上6：00，在试验动物未进行进食的情况下称重，记录初始体重（IBW）、终末体重（TBW）。计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（FCR）。

ADG（g）=（TBW-IBW）/30

FCR=ADFI/ADG

1.5 血液生化指标测定

各试验组动物在试验第0 天和第7 天早上6：30，空腹采集静脉血10 mL，4 000 r/min 离心分离得到血浆后12 000 r/min 离心分离血清。应用全自动生化分析仪（BS220）进行血液生化检测。检测项目包括白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、尿素（UREA）。

1.6 粪便样本采集以及检测

试验第0、7、14、30 天早上8：00 采集各试验组动物的新鲜粪便10 g，对采集的每一份粪便样本标记好采集时间以及分组情况，立即进行实验室检测。

新鲜粪便应用饱和盐水漂浮法制片，置于显微镜下进行鉴定和计数，运用麦克马斯特氏法测定每克粪中虫卵个数（EPG），以虫卵减少情况来评价疗效。

疗效（%）=（试验前EPG-试验后EPG）/试验前EPG×100

1.7 数据处理

试验数据应用SPSS 26.0 进行统计分析，莫西菌素微乳制剂对小尾寒羊生长性能的分析采用单因素方差法（one-way ANOVA），对试验动物血清指标生化指标和消化道线虫EPG采用双因素方差分析，各个处理之间的数据用“平均值±标准差”表示，设置P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异极显著。

2 结果与分析

2.1 莫西菌素微乳制剂对小尾寒羊生长性能的影响

由表2 可知，与空白对照组相比，IVMSC0.2组的平均日增重差异不显著（P＞0.05），MXDSC0.2组、MXDSC0.2微乳组、MXDSC1.0微乳组平均日增重差异显著（P＜0.05）。ADFI各组间差异不显著（P＞0.05）。各试验组FCR极显著低于空白对照组（P＜0.01）。

表2 试验期间各处理组小尾寒羊增重情况

表3 各处理组试验第0天和第7天血清生化指标

2.2 莫西菌素微乳制剂对小尾寒血液生化指标的影响

由表4 可知，通过分组、时间、分组×时间交互作用进行分析可见，试验第0 d 和第7 天各组血清生化指标未见显著差异（P＞0.05）。

表4 各处理组消化道线虫EPG检测情况

2.3 莫西菌素微乳制剂对小尾寒羊胃肠道线虫驱虫效果的影响

试验前在试验动物粪便中检测出有捻转血矛线虫、毛首线虫、仰口线虫3 种寄生虫，试验后胃肠道线虫EPG 检测结果见表4。通过分组、时间、分组×时间交互作用进行分析可见差异极显著（P＜0.01）。采用单因素方差分析可见，与空白对照组相比第0 天各试验组差异不显著（P＞0.05），用药第7、14、30 天空白对照组与试验组差异极显著（P＜0.01）。

对消化道线虫疗效见表5。试验第7 天IVMSC0.2组、MXDSC0.2组、MXDSC0.2微乳组、MXDSC1.0微乳组的疗效分别为81.69%、95.08%、95.55%、95.22%，试验第14天疗效分别为69.45%、92.62%、92.31%、93.63%，试验第30天疗效分别为58.58%、75.41%、87.45%、87.25%，各组间无显著差异（P＞0.05）。

表5 各处理组对消化道线虫疗效（%）

3 讨论

3.1 莫西菌素微乳制剂对小尾寒羊生长性能的影响

胃肠道线虫是一类严重影响家畜生产性能的疾病，大多数情况下，患有消化道线虫的家畜即使得到一定的治疗，但由于消化道线虫产生耐药性不能完全被驱除，仍然会导致体重下降[11-12]。Fazzio 等[13]研究发现，MXD 不仅有很好的驱杀效果，还具有增加用药对象体重的功效，这与本试验的研究结果相符。本试验结果显示感染消化道线虫的试验动物在用药后临床症状均有很好的改善，MXD 用药组的平均日增重明显高于空白对照组和IVM组。

3.2 莫西菌素微乳制剂对小尾寒血液生化指标的影响

微乳载体系统作为目前新兽药研发的一种剂型，安全性较高，且可以有效的增加载药量，溶解更多的药物[14]。陈雪虹[15]对硫酸氢氯吡格雷亚微乳的初步安全性进行评价，结果显示微乳制剂不引起溶血,对血管和皮下组织刺激性小，对器官组织无明显毒性可以安全使用。本研究在试验的第0、7天进行的血液学试验结果显示，血清生化指标显示各组检测项目未见显著差异（P＞0.05）。通过长期对6项与肝肾功能相关的血清生化指标进行检测显示数值均在正常范围之内，说明试验用药对肝、肾的血清生化指标未产生影响。初步研究说明MXD微乳制剂对试验动物安全可靠。

3.3 莫西菌素微乳制剂对小尾寒羊胃肠道线虫驱虫效果的影响

IVM 和MXD 这两种药物均属于阿维菌素家族抗寄生虫类药物，但由于近年来IVM 等广谱驱虫药的长期使用导致寄生虫抗药性产生，当胃肠道线虫对IVM的敏感性降低时，MXD 仍保持其效力[16-17]。Lloberas等[18]将这一问题在绵羊身上得到了证实，IVM 对捻转血矛线虫的疗效为0时，而MXD的疗效为95%。本试验在自然感染消化道线虫的125 只小尾寒羊粪便中检出捻转血矛线虫、毛首线虫、仰口线虫3 种寄生虫，通过观察不同时间段试验动物胃肠道线虫EPG，通过双因素方差分析显示各交互之间差异极显著（P＜0.01），单因素方差分析显示试验第7、14、30天空白对照组与其他试验组差异极显著（P＜0.01），驱虫效果显示，随着试验天数的增加，EPG 数量有所上升，在指定的时间点内，用药第7 天的EPG 最低，第14 天和第30 天较之前有所上升，其中IVMSC0.2组EPG 上升最快，MXDSC0.2组次之，MXDSC0.2微乳组、MXDSC1.0微乳组EPG 上升最缓慢。试验期间对于胃肠道线虫疗效在第7 天疗效最佳，疗效为81.69%（IVMSC0.2组）至95.55%（MXDSC0.2微乳组）。在第30 天疗效为58.58%（IVMSC0.2组）至87.45%（MXDSC0.2微乳组），可见在试验第30 天时各试验组的疗效均有不同程度的降低，但是MXDSC0.2微乳组、MXDSC1.0微乳组仍保持较好的疗效，说明MXD 微乳制剂具有一定的缓释作用。该试验中可能是由于对IVM 耐药的胃肠道线虫P-糖蛋白表达增强所以IVM 和MXD 对该转运蛋白的亲和力不同，导致了IVM 和MXD 之间疗效差异较大[19-20]。有研究表明MXD 对IVM 耐药的胃肠道线虫具有更好的疗效，可以有效的提高饲养场羊只对胃肠道线虫的抵抗能力，但在临床应用中要合理使用MXD，避免胃肠道线虫对MXD产生耐药性[21-22]。

4 结论

MXD微乳制剂增重试验显示在试验期间MXD组可以有效的增加小尾寒羊的平均日增重。试验后试验动物血清生理指标未见出现异常情况。治疗效果试验显示对小尾寒羊的胃肠道线虫药效更长，驱虫效果十分显著。本试验中MXD 微乳注射组用药浓度为0.2 mg/kg 可以很好地对小尾寒羊消化道线虫进行治疗，适合应用于临床，有着良好的市场前景，为MXD微乳制剂的进一步推广奠定了基础。