大午金凤蛋鸡禽流感和新城疫母源抗体消长规律的研究

王胜结 陆朴丽 袁海燕

摘 要：为研究大午金凤蛋鸡禽流感H5亚型Re-13株和Re-14株、H7亚型Re-4株、禽流感H9、新城疫母源抗体的消长规律，本试验对10万只大午金凤雏鸡随机抽取80只，于1、5、10、13、16日龄及20日龄采用血凝和血凝抑制试验进行禽流感H5亚型Re-13株和Re-14株、H7亚型Re-4株、禽流感H9亚型以及新城疫的母源抗体跟踪检测。结果表明：父母代种鸡禽流感和新城疫免疫抗体水平可以通过卵黄传递给雏鸡，使其产生较高的母源抗体以抵抗病毒侵袭，其中雏鸡在1日龄禽流感和新城疫母源抗体水平最高，均达到6log2以上，之后随日龄增加母源抗体逐渐下降；10日龄时禽流感H5亚型Re-13株和Re-14株、H7亚型Re-4株母源抗体下降至抗体保护水平以下，16日龄时禽流感H9亚型母源抗体水平和13日龄时新城疫母源抗体水平均下降至抗体保护水平以下。因此，建议禽流感病毒H5亚型（Re-13株）、H5亚型（Re-14株）、H7亚型（Re-4株）在7～9日龄首免；H9亚型在13～15日龄首免，新城疫在10～13日龄首免。本试验结果为禽流感、新城疫疫苗首免日龄的确定提供了一定参考。

关键词：禽流感；新城疫；母源抗体；首免日龄；大午金凤蛋鸡

中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：1673-1085（2023）08-0015-05

禽流感（Avian influenza，AI）是由A型流感病毒（AIV）引起的一种侵害禽类的急性传染性疾病，是目前对鸡群危害严重的传染病，根据致病力不同分为无致病性、低致病性、高致病性。其中H5、H7亚型中的一些毒株致病力较高，引发禽类高致病性禽流感，症状表现为急性高度致死性，也可表现为无症状隐性带毒；不仅能感染禽类，也能感染哺乳动物，威胁人类健康，给养殖业造成重大损失。新城疫（Newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（NDV）引起鸡的急性高度接触性传染病，是严重危害养鸡业的另一重要疾病[1]。禽流感和新城疫自发现以来给我国养禽业造成了巨大的经济损失[2]，随着我国规模化养殖程度越来越高，疫情一旦发生，波及范围变广，因此做好日常防控非常关键。免疫接种是预防工作的重中之重。因此，制定符合养殖场实际的科学免疫程序是免疫预防的重要一环。为有效防控AI和ND，给父母代种鸡接种禽流感和新城疫疫苗，种母鸡产生的抗体可以通过卵黄传递给雏鸡[3]，使其获得较高的母源抗体以抵抗病毒侵袭。本试验选择大午金凤雏鸡作为研究对象，检测雏鸡体内禽流感、新城疫母源抗体的消长情况，了解母源抗体在雏鸡体内的衰减变化规律，为确定禽流感和新城疫的首免日龄提供可靠依据，同时为养殖场有科学地制定免疫程序提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验动物

健康的大午金凤蛋雏鸡，购自保定兴芮农牧发展有限公司，饲养在贵州韩伟蛋业有限公司养殖场。

1.2 试验材料

1.2.1 抗原 包括禽流感病毒H5亚型（Re-13株）抗原（批号为：2022004）、禽流感病毒H5亚型（Re-14株）抗原（批号为：2022004）、禽流感病毒H7亚型（Re-4株）抗原（批号为2022005）、禽流感病毒H9抗原（批号为：2021001），均由哈尔滨维科生物技术有限公司提供；新城疫抗原（批号为：202102），由中国兽药监察所提供。

1.2.2 阳性血清 包括禽流感病毒H5亚型（Re-13株）阳性血清（批号为：2022004）、禽流感病毒H5亚型（Re-14株）阳性血清（批号为：2022005）、禽流感病毒H7亚型（Re-4株）阳性血清（批号为2021004）、禽流感病毒H9阳性血清（批号为：2021001），均由哈尔滨维科生物技术有限公司提供；新城疫阳性血清（批号为：202007），由中国兽药监察所提供。用生理盐水做对照。

1.2.3 器材与试剂 8道移液器 （艾本德）、单道移液器（艾本德）、振荡器（杭州瑞诚MS100）、高速离心机（知信H2016D）、96孔V形微量反应板、生理盐水、1%鸡红细胞悬液。

1.3 试验方法

从10万只大午金凤蛋鸡雏鸡随机抽取80只，分别于1、5、10、13、16、20日龄翅根静脉采血，分离血清后，依照国家GB/T18936-2020高致病性禽流感诊断技术和GB/T 16550-2020 新城疫诊断技术的操作标准，采用血凝试验（HA）与血凝抑制试验（HI）对血清样品检测鸡只H5、H7、H9亚型禽流感抗体水平以及新城疫抗体水平，计算平均值并绘制抗体消长曲线。

1.4 判定标准

判断标准按农业部标准，禽流感HI抗體效价≥4log2 判为合格，＜4log2 判为不合格；新城疫HI 抗体效价≥5log2 判为合格，＜5log2 判为不合格。

2 试验结果

2.1 禽流感病毒H5亚型（Re-13株）抗体水平

禽流感病毒H5亚型（Re-13株）抗体检测结果见表1、消长曲线见图1。

1～20日龄，母源抗体平均效价随日龄的增长一直呈下降趋势。从图1抗体消长规律曲线可以推测出，大约在8日之后母源抗体水平处于4log2附近，至10日龄时抗体平均效价降至3.55log2，至20日龄时抗体平均效价仅有0.36log2，接近0。

2.2 禽流感病毒H5亚型（Re-14株）抗体水平

禽流感病毒H5亚型（Re-14株）抗体检测结果见表2、消长曲线见图2。

图2显示禽流感病毒H5亚型（Re-14株）母源抗体随日龄的增长逐步下降。10日龄时，母源抗体平均效价为2.91log2，低于保护病毒侵袭的最低水平；20日龄时，抗体平均效价低至0.36log2；5～10日龄母源抗体下降速度最快，10日龄后抗体平均效价下降趋势较平缓。

2.3 禽流感病毒H7（Re-4株）抗体水平

禽流感病毒H7亚型（Re-4株）抗体检测结果见表3、消长曲线见图3。

从图3可以看出，禽流感病毒H7亚型母源抗体水平变化趋势随日龄的增长而在下降，约在7日龄后抗体平均效价低于鸡群免遭病毒侵袭的最低抗体水平（4log2），10日龄时抗体平均效价已降至3.18log2；母源抗体下降幅度最大的时间段在5～10日龄，10～16日龄母源抗体的消耗速度相对迟缓，之后迅速消耗，至20日龄左右基本消失。

2.4 禽流感病毒H9亚型抗体水平

禽流感病毒H9亚型抗体检测结果见表4、消长曲线见图4。

从图4可知，20日龄前，禽流感病毒H9亚型母源抗体随日龄的增长呈下降趋势，10日龄时抗体平均效价降至5.20log2；10～13日龄的抗体平均效价变化曲线出现一个平台期，13日龄时检测的抗体平均效价为4.91log2，低于5log2；13日龄后，母源抗体消耗的速度加快，20日龄时低至1.7log2。

2.5 新城疫抗体水平

新城疫抗体检测结果见表5、消长曲线见图5。

从图5新城疫的抗体消长曲线来看，1～20日龄期间雏鸡体内的新城疫母源抗体水平随日龄的增长而不断下降，但分别在10～13、16～20日龄时抗体平均效价消长曲线下降趋势变缓（出现平台期），且处于两个平台期间的13～16日龄抗体下降趋势变化最快。10日龄时抗体平均效价降至5.00log2，之后抗体平均效价低于5log2。

3 讨论

母源抗体的变化规律表明，雏鸡出壳后，通过吸收体内卵黄囊而从中获取了大量的抗体，1日龄时，母源抗体水平基本能维持在6log2以上。由于母源抗体是被动免疫抗体[4]，不具备持续产生的能力[5]，会随时间不断消耗和衰减。母源抗体具有双重性，一方面可以帮助机体抵御外来病毒的侵袭，另一方面会干扰疫苗免疫，降低免疫效果[6]。因此，在制定免疫程序时，需综合考虑母源抗体的双重影响。

按农业部相关标准（禽流感HI抗体效价≥4log2 判为合格，＜4log2 判为不合格；新城疫HI 抗体效价≥5log2 判为合格，＜5log2 判为不合格）对本试验结果进行分析，结果显示，大午金凤禽流感病毒H5亚型（Re-13株）、（Re-14株）和H7亚型（Re-4株）5日龄之前抗体平均滴度都在5.45log2以上，H9亚型在13日龄之前抗体平均滴度在4.9log2以上；新城疫在10日龄之前抗体平均滴度在5log2以上。因此，本试验根据绘制的母源抗体消长曲线，建议禽流感病毒H5亚型（Re-13株）、H5亚型（Re-14株）、H7亚型（Re-4株）在7～9日龄首免；H9亚型在13～15日龄首免，新城疫在10～13日龄首免。本试验结果对新城疫和禽流感首免日龄的确定具有一定的指导意义。

参考文献：

[1]  戴军洋，简永利，高永安，等.新城疫、禽流感疫苗对三黄鸡的免疫效果研究[J].上海畜牧兽医通讯， 2020（06）： 29-30+33.

[2]  张明敬，李峰，史慧.蛋鸡禽流感和新城疫母源抗体消长规律的研究[J].养殖与饲料， 2016（02）： 58-60.

[3]  刘东尧.新城疫的临床诊断要点与预防措施[J].今日畜牧兽医， 2021， 37（05）： 98.

[4]  曹玉娟，王志跃，杨海明，等.孵化期卵黄总IgY动态变化与鸡胚生长发育研究[J].中国家禽， 2013， 35（01）： 9-12.

[5]  钱明珠，王申锋，王荷香，等. H5、H7亚型禽流感母源抗体对蛋雏鸡首免日龄的影响[J].现代畜牧兽医， 2021（11）： 39-42.

[6]  高亚军，郭护林.简述家禽免疫失败的原因及应对方法[J].養禽与禽病防治， 2013（02）： 34-35.

Study on the Growth and Decline of Maternal Antibodies against Avian Influenza and Newcastle Disease in Dawu Jinfeng Laying Hens

WANG Shengjie，LU Puli，YUAN Haiyan

（Guizhou Han Wei Dan ye co.， ltd，Liupanshui  Guizhou  553000，China）

Abstract： This paper provides a reference for the age of first exemption of avian influenza and Newcastle disease vaccine by studying the growth and decline rules of H5 subtype Re-13 and Re-14 strains， H7 subtype Re-4 strains， avian influenza H9 and Newcastle disease maternal antibodies. In this trial， 80 of 100，000 Dawu jinfeng chicks were randomly selected and followed up for avian influenza H5 subtype Re-13 and Re-14， H7 subtype Re-4， avian influenza H9 and Newcastle disease maternal antibody at 1， 5， 10， 13， 16 days and 20 days of age. The results showed that the levels of immune antibodies to avian influenza and Newcastle disease in parent breeders could be transmitted to chicks through yolk， so that they could produce higher maternal antibodies to resist virus invasion. At the same time， it was found that chicks had the highest levels of maternal antibodies in one-day-old avian influenza and Newcastle disease， both reaching more than 6log2， and then the maternal antibodies gradually decreased. At 10 days of age， maternal antibodies to avian influenza H5 subtype Re-13， Re-14 and H7 subtype Re-4 decreased below the antibody protection level， at 16 days of age， maternal antibodies to avian influenza H9 subtype decreased below the antibody protection level， and Newcastle disease maternal antibodies also dropped below the antibody protection level at 13 days of age.Therefore， it is recommended that H5 subtype Re-13， H5 subtype Re-14 and H7 subtype Re-4 are exempted first at 7 to 9 days; H9 subtype is exempted first between 13 to 15 days and Newcastle disease at 10 to 13 days of age. The results of this test provide a certain reference for determining the first immunization age of avian influenza and Newcastle disease vaccine.

Keywords： Avian influenza; Newcastle disease; Maternal antibodies; First day free age; Dawu jinfeng laying hens