一例牛布鲁氏菌病的实验室诊断与防治建议

李维蓬，王正荣，张艳艳，孙艳，薄新文*

（1.石河子大学动物科技学院，新疆 石河子 832000；2.省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室/新疆农垦科学院畜牧兽医研究所）

布鲁氏菌病是由布鲁氏杆菌引起的一种可以感染牛、羊和人类的一种传染病。从畜间的疾病传播来讲，属于二类动物疫病。近年来，新疆部分地区实行新政策，通过建设规模化集中养殖小区将牛羊养殖由散养转为集中养殖，从而改善了当地混乱养殖带来的部分环境问题以及管理问题，但由于牲畜流通交易频繁，加之养殖户对于布鲁氏菌病的认识不到位，导致一些地区人畜布鲁氏菌病感染数量急剧上升，对畜牧业的安全生产产生了一定的影响，对公共卫生安全造成了一定的挑战[1]。在牛羊养殖生产中，各养殖户之间布鲁氏菌病疫情多由生产环节当中的不正当操作，接触带病畜引发；畜间布鲁氏菌病疫情的发生，多数是由于未能严格按照防疫规定，在交易环节未对牲畜进行有效的布鲁氏菌病检测，购入后不分圈观察，直接混养导致[2]。本文通过一起由养殖户报告的疑似牛布鲁氏菌病案例及检测过程，浅析布鲁氏菌病防控措施和建议，为基层工作人员能够更好的确立布鲁氏菌病处理办法，以及相关人员开展布鲁氏菌病防控提供参考[3]。

1 病例情况介绍

2022年6月9日，伊犁某养殖小区内一新建牛养殖场的母牛出现流产现象，驻场兽医检查后未找出具体原因，随后场主向其管辖区兽医站进行了反映，管辖区兽医站根据伊犁地区牛布鲁氏菌病流行情况及相关防治办法，指派驻场兽医对该可疑流产牛进行了隔离。6月20日场主联系新疆农垦科学院畜牧兽医研究所对该场进行技术援助和指导。6月21日，新疆农垦科学院技术援助人员对该场共22只成年母牛编号后进行了采血与保存，计划回实验室后采用虎红平板凝集试验进行布鲁氏菌病的初步筛查。

2 病因调查

2.1 牛场情况

该牛场现有存栏牛62头，品种为安格斯牛、荷斯坦牛和黄牛，饲养方式为圈养加放牧，场主过去未饲养过牛，于2021年9月开始养牛。牛的来源多为从本地其他养殖户手中购入，由于场主缺乏相关防疫知识，购入牛时未能索要布鲁氏菌病检测证明或疫苗接种证明。

2.2 疫苗使用情况

据场主陈述，2021年9月从当地停业牛场一次性收购了30多只牛，购入时不清楚疫苗使用情况。而后又在当地多次购买繁育牛，至今场内包括自繁育的小牛共62只，其中自繁育牛未接种过布鲁氏菌病相关疫苗。

2.3 临床症状

经现场查看，所有牛外观正常，膘情良好，体格健壮，圈内公母牛混养，自行趴跨。据场主反映，个别牛有屡配不孕的情况。

由于布鲁氏菌病对人有一定感染力，且流产牛没有其他临床症状，不建议进行解剖检查。

3 实验室诊断

6月24日，实验室对采集的22份成年母牛血清样本进行虎红平板凝集试验，将30 μL血清与30 μL虎红平板凝集试验抗原均匀混合静置观察，其中0862#样本为阳性（+++）。6月28日，对阳性血清样本进行试管凝集试验，1∶100倍稀释呈阳性，与比浊管4号（125 μL生理盐水+375 μL等倍稀释抗原混匀）清亮程度相同，根据2018版布鲁氏菌病实验室诊断规定，竞争ELISA试验（cELISA）或试管凝集试验可作为最终定性。

4 结果分析

0862#母牛为2021年9月在当地购入，购入时不清楚是否接种疫苗，卖方也未出示布鲁氏菌病检测证明，购入后至今未接种布鲁氏菌病相关疫苗，截至2022年6月已饲养9个月，布鲁氏菌病虎红平板凝集试验以及后续的试管凝集定性均为阳性。根据《布鲁氏菌病防治技术规范》相关规定，对成年动物监测时，猪、羊在5月龄以上，牛在8月龄以上，怀孕动物则在第1胎产后半个月至1个月间进行；对布鲁氏菌疫苗S2株、M5株、S19株免疫接种过的动物，在接种后18个月（猪接种后6个月）进行[4]。依据“虎红平板凝集试验阳性与试管凝集试验阳性”，判定0862#牛为布鲁氏菌病阳性确诊。

5 处理与消毒

目前尚无针对牛布鲁氏菌病的特效药物，无法有效救治病牛，建议将布鲁氏菌病阳性牛扑杀并进行无害化处理。随后要求该养殖场将场内健康牛和疑似牛分圈管理，并禁止场内牛流出[5]。

提醒养殖户按照布鲁氏菌病消毒规范将所有圈舍做到全面消毒。首先是彻底将圈内地板、墙面和水槽料槽等清理干净。其次要在圈舍地面铺设好一定厚度的干燥秸秆或稻草，进行焚烧，用高温灭菌，焚烧时务必有人在旁照看，防止失火，待火燃尽后清理残余灰烬。同时用消毒液对墙体、饲槽、水槽、地面等彻底喷洒，使消毒液自行下流，连续3日，每天1次。而且要用洁净的水清洗饲喂槽，随后牛分圈舍饲养。清扫消毒人员务必要做好个人防护，佩戴医用防护口罩、乳胶手套、鞋套等防护用具，保证接触牛时无外伤。如果条件允许，亦可将原牛舍进行销毁和灭菌处理，在养殖场地重新修建圈舍，且在今后每年都需开展有关疫病的检测[6]。如果在饲料、牛粪、饲料槽等处检测出布鲁氏菌，则应将上述物品集中运至养殖基地外进行焚烧处理，避免病菌蔓延（切记不可深埋，因为布鲁氏菌有一定几率会随地下水渗透至水源地，造成更大范围的传播）。

6 体会和建议

布鲁氏菌病是当前牧区常见又难以处理的一种人畜共患疾病。目前，基层地区在牛布鲁氏菌病防控工作中虽然可以检测出病畜，但要做好正确的处理是十分困难的，虽然无害化处理后养殖户会得到一定的补贴，但终因不及一头牛的价值，有的养殖场户为了减少损失，会偷偷将一些检测出布鲁氏菌病的牛低价售出，这些病牛进入市场后，将严重威胁到其他牛群以及消费者的健康。消灭布鲁氏菌病是一件利在千秋的大工程，需要职能部门和养殖户共同的努力与牺牲，由于一些养殖场对于牛布鲁氏菌病的关注不到位，轻视牛布鲁氏菌病防治工作。因此，加强布鲁氏菌病牛无害化处理，普及牛布鲁氏菌病相关防治知识是十分重要的。在当下，还应该充分运用新媒体，做好疫病防疫宣传，帮助更多的养殖人员掌握相关防治方法。在基层需要做好宣传资料的分发，利用村镇广播、电视、讲座等方式进行防疫知识科普，制作防疫手册，使用户在生产过程中更好地运用[7]。

在牛的养殖中，若想避免布鲁氏菌病在牛群中传播，应依照自繁自养的原则，避免疫病从外界种群传入场内种群，培育健康无病的牛群。若场内必须引种，则要提前做好调查工作，不可以从疫区引种，严禁在疫病高发期进行跨区引种。而且要向引种的养殖场索要疫苗接种证明，以为今后的疫苗接种计划保留资料，保证引进后的疫苗接种工作[8]。引种后的牛应隔离饲养30～60 d，在这期间观察其身体状况，确保没有任何异常的情况下方可入群。