细胞DNA定量、HR-HPV、AFP等多指标联合检测在宫颈癌筛查中的应用价值*

罗含荑 郎 琳 徐文敏

重庆大学附属肿瘤医院 重庆市肿瘤研究所 重庆市肿瘤医院健康体检与肿瘤筛查中心,重庆市 400030

宫颈癌与女性生殖系统健康密切相关,是危害女性生命安全的妇科肿瘤疾病之一。宫颈癌的发病过程漫长,包含从宫颈上皮内癌变进展至原位癌、早期癌、浸润癌的演变,因此,对宫颈癌进行早期筛查是尽早进行干预,提高患者生存率的关键[1]。细胞DNA定量分析技术指的是通过对患者DNA水平进行检测,了解癌症细胞相关的遗传基因变异的过程,对诊断肿瘤的良恶性具有一定的临床价值[2]。人类乳头瘤病毒(HPV)是引起宫颈癌并发的重要因素,持续的HR-HPV是大多宫颈癌及癌前病变患者的明显特点,与病变的发生息息相关[3]。AFP属于常见的肿瘤标志物,其水平表达异常与多种肿瘤疾病的发生、转移等有关[4]。基于此,本研究通过多种检测方式对宫颈癌进行筛查检测,旨在寻求更为行之有效的临床检测方式,为女性健康提供科学意见。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性选取2021年1月—2022年1月在本院进行早期宫颈癌筛查的265例高危妇女作为研究对象,年龄21～63岁,平均年龄(41.26±9.20)岁,存在白带异常、阴道出血等情况。纳入标准:(1)存在宫颈炎症状;(2)检查前24h内无性生活;(3)非月经期;(4)临床资料完整;(5)无精神疾病;(6)未行子宫切除术。排除标准:(1)其他恶性肿瘤疾病;(2)严重的脏器功能异常;(3)妊娠、哺乳状态中;(4)无性生活史;(5)宫颈手术史。另选取同期在本院进行检查的100例宫颈良性疾病患者作为对照组,年龄22～65岁,平均年龄(41.38±9.61)岁。

1.2 方法

1.2.1 细胞DNA定量:患者均制作宫颈细胞涂片,采用Feulgen染色法并进行细胞DNA定量分析,通过贝克曼z2全自动细胞像分析仪对涂片上约8 000个细胞核进行扫描,通过分析每个细胞核超过100个参数的特征值进行自动分类。评价标准:可疑,增生细胞数占总数5%～10%或DNA指数≥2.5的倍体异常细胞1～2个,嘱咐患者6个月后复查;阴性,检查中的细胞大多为正常二倍体细胞,DNA指数<2.5,无倍体异常细胞,增生细胞数占总数<5%,嘱咐患者定期采取宫颈癌筛查;阳性,增生细胞数占总数>10%或>3个DNA指数≥2.5的倍体异常细胞,嘱咐患者采取活检或阴道镜检查。

1.2.2 HR-HPV检查:使用采样刷在宫颈口取样,逆时针旋转3周并停留10s,取样后放置在1ml保存液中,将其置于低温环境下保存待测,对13种高危型HPV进行检测,检测样本的RLU/CO≥1.0则为阳性。

1.2.3 病理学检测:在阴道镜辅助下进行,依据《乳腺与女性生殖系统肿瘤病理与遗传学》[5]中的宫颈癌病理学诊断标准,宫颈上皮内瘤变1级以上则为阳性。

1.2.4 肿瘤标志物:抽取所有患者入院清晨空腹肘静脉血3ml,通过3 000r/min 离心后取上层血清待测。使用放射免疫方法测定AFP水平,采用酶免疫点印迹化学发光法检测TSGF、TK1水平,所有操作过程按照说明书由同一组检验人员严格执行。

2 结果

2.1 不同检测方式与病理学结果对比 病理学检测结果显示,265例患者中阳性153例、阴性112例。细胞DNA定量分析结果显示,阳性158例、阴性107例;HR-HPV检查结果显示,阳性156例、阴性109例;两者联合检查结果显示,阳性154例、阴性111例。见表1。

表1 不同检测方式与病理学结果对比(n)

2.2 细胞DNA定量分析、HR-HPV与两者联合检测宫颈癌的准确性分析 细胞DNA定量分析+HR-HPV对宫颈癌诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、准确度显著高于细胞DNA定量分析(P<0.05),特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度显著高于HR-HPV,差异统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 细胞DNA定量分析、HR-HPV与两者联合检测宫颈癌的准确性分析(%)

2.3 两组患者AFP、TSGF、TK1水平比较 研究组AFP、TSGF、TK1水平显著高于对照组(P<0.05),见表3。

表3 两组患者AFP、TSGF、TK1水平比较

2.4 AFP、TSGF、TK1水平及联合诊断对于宫颈癌的预测价值分析 ROC分析结果显示,AFP、TSGF、TK1三者联合预测宫颈癌的诊断价值显著高于单独检测(P<0.05),见图1、表4。

图1 AFP、TSGF、TK1水平及联合诊断对于宫颈癌预测的ROC曲线

表4 AFP、TSGF、TK1水平及联合诊断对于宫颈癌的预测价值分析

3 讨论

宫颈癌病变是多种因素共同影响下的复杂病理过程,对其疾病进程中生物学机制及有关指标进行探究对宫颈癌早期诊治具有重要意义[6]。宫颈癌患者在患病早期并无显著的临床特征,大多患者不易察觉,且存在误诊或漏诊的状况,部分患者在确诊时已步入中晚期阶段,导致预后状况差,危及生命安全。随着医学检测技术的进步,临床已具备多种检测方式用于早期的宫颈癌筛查中[7]。本研究将细胞DNA定量分析技术、HR-HPV检查、肿瘤标志物等应用在宫颈癌筛查中,展现出了较好的预测价值。

本研究265例患者中,阳性153例、阴性112例,细胞DNA定量分析联合HR-HPV检查宫颈癌的准确性及特异性显著高于单一采用细胞DNA定量分析或HR-HPV检查,且阴性预测值也较高。究其原因在于:细胞学检查在宫颈癌筛查中发挥重要基础作用,但该种检测方式对于操作者的要求较高,若操作不合格可能导致检查假阳性与假阴性的概率较高[8]。细胞DNA定量分析技术通过对患者的DNA情况进行检查,把握与患者机体肿瘤细胞有关的变异遗传基因,从而达到筛查宫颈癌细胞的目的。对于高度鳞状上皮内病变程度严重及宫颈鳞状细胞癌患者来说,该技术检测到DNA倍体异常细胞的概率更大[9]。细胞发生癌变主要是细胞迅速转移及增殖导致的,故对细胞核内的DNA情况进行检查,能够有效判别是否存在恶性癌变的可能,当患者机体产生异倍体细胞时,染色体的数量与结构显著变化,且可以将其作为早期判断的依据,异倍体细胞的表达量越高则癌症恶性程度越严重,且分化程度越低。除此之外,细胞DNA定量分析技术对于操作者的要求不高,实施过程较为便捷,适用于临床筛查宫颈癌疾病中。HPV感染是宫颈癌发生的关键,目前研究指出,有超过30种HPV与宫颈病变密切相关,依据不同致病的能力分为低危与高危型,低危型HPV大多是良性病变,HR-HPV则与宫颈癌前病变或宫颈癌本身关联紧密。大多患者在性生活稳定或频率较高时,会导致HR-HPV的感染率提高[10],病毒长期的存在在体内导致恶性可能上升。故采取HR-HPV是对患者病变进行判别的有效方式,且患者病变等级越高,筛查准确率越高。同时,HR-HPV会影响DNA倍体异常,因此,HR-HPV联合细胞DNA定量技术更能够提高宫颈癌病变筛查的准确性,为患者临床诊断及治疗提供科学意见。另外,研究组AFP、TSGF、TK1水平较对照组高,且联合三项指标能够有效提高宫颈癌的诊断价值,这可能是因为:AFP由肝细胞及卵黄囊合成,在成年人体内的含量很低,健康机体内难以被检测,但其与多种肿瘤疾病的发生有关[11],宫颈癌患者疾病进展时会分泌出大量肿瘤分泌物,患者机体炎性反应加剧,导致肝脏水平出现异常,故AFP含量上升;TSGF属于恶性肿瘤进展中有关的糖类及代谢物质,宫颈癌病变过程中患者肿瘤及相关毛细血管扩增,导致TSGF的释放,表达水平提高;TK1属于特殊激酶,参与癌变细胞DNA的合成过程,肿瘤的发生预示着大量新生血管的生成,此为导致TK1水平提升的关键[12]。故联合以上三种肿瘤标志物指标进行检测,能够有效提高宫颈癌的鉴别价值。

综上所述,细胞DNA定量联合HR-HPV检查、AFP等多种肿瘤标志物指标联合检测能够有效提高宫颈癌筛查的准确性,为早期预防提供有效依据。但本研究还存在一些局限之处,例如样本的数量不大且未对宫颈癌具体情况进行细化分析,在今后的研究中将会进一步细化研究内容,使研究结果更具有客观性和科学性。