DC-CIK细胞生物疗法结合同步放化疗在中晚期肺小细胞癌中的临床应用

钟新云 龙 瀛

万载县人民医院内三科 (江西 宜春 336100)

非小细胞癌(NSCLC)是肺癌患者主要类型(约占80%)，发病早期无特异性表现，使其早期确诊率处于较低现状，甚至多数患者在疾病确诊后，经病理检查后发现疾病处于中晚期，错过最佳治疗时机，且无论是采用手术，还是放化疗治疗，其效果均不理想[1-2]。基于手术、靶向治疗局限性明显，多数患者只能从放化疗中获得疾病控制，延长治疗时间。自肿瘤免疫治疗出现并应用于临床后，使其成为治疗恶性肿瘤的主要方法。其中树突状细胞DC、细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)是临床重点研究的免疫细胞，且DC-CIK细胞临床应用最为广泛，于体内分离有效的T淋巴细胞，并在注入白介素(IL)-2、干扰素(IFN)-Ƴ等因子，增加细胞数量，并注入抗CD3单抗，进而提高T淋巴细胞识别能力，准确清除肿瘤细胞，促使肿瘤细胞凋亡[3]。因此，本研究对中晚期NSCLC患者采用DC-CIK细胞生物疗法结合同步放化疗治疗，旨为临床晚期肺癌免疫治疗提供依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料选取我院2020年1月至2022年6月期间收治且被病理诊断为NSCLC患者80例，按随机数字表法分为两组，对照组40例，男23例，女17例；年龄40～75(59.82±4.15)岁；病理类型：鳞癌21例，腺癌15例，其他4例；临床分期：ⅢA期22例，ⅢB期12例，Ⅳ期6例；观察组40例，男21例，女19例；年龄40～76(60.12±4.21)岁；病理类型：鳞癌20例，腺癌12例，其他8例；临床分期：ⅢA期20例，ⅢB期12例，Ⅳ期8例；两组患者基线资料比较(P＞0.05)，可对比。

纳入标准：入组患者经影像学、病理等综合检查，符合NSCLC诊断标准[4]；预估患者生存时间＞3个月；患者经血尿常规、肝肾、凝血等功能检查，无异常情况；存在影像学可以测量的病灶；患者对研究知情，并签署了同意书。排除标准：对生物免疫抑制剂过敏者；伴心脑血管疾病、代谢系统疾病、内分泌系统疾病者；胸腔大量积液者；伴肺部感染、肺结核等其他肺部疾病者；伴中枢神经系统广泛性转移者；临床资料不全者。

1.2 方法对照组：采用放化疗治疗，放疗：瑞士医科达公司产的PRECISE型直线加速器6mV-X线三维适形照射治疗，每天照射剂量为2Gy，每周5次，总共照射剂量为50～60Gy。同时在放疗当天给予DP化疗治疗，多西他赛(江苏恒瑞医药，国药准字H20020543)75mg/m2，静脉滴注，d1；顺铂(南京制药厂，国药准字H20030675)75mg/m2，静脉滴注，d1～4；4周为1个周期，与放疗先同步2个周期，在放疗结束并间隔4周后，再进行巩固化疗，连续4个周期。

观察组：在对照组基础上采用DC-CIK细胞生物疗法，先采集外周血细胞、分离血细胞，获取单个核细胞(PBMC)，对其进行分离培养，于贴壁PBMC添加人重组GM-CSF800 U/mL、IL-4 500 U/mL、肿瘤坏死因子(TNF)-α等含有自体血清培养基，连续培养1周，得到DC；于未贴壁PBMC加入IFN-Ƴ 1000 U/mL、IL-2 300U/mL、IL-1β100 U/mL、anti-CD3mAb50 ng/mL与含有自体血清的培养基内进行培养，获取CIK细胞。取部分细胞进行细菌培养、真菌培养，待诊断结果为阴性，采集诱导扩增后的DC-CIK，用生理盐水对细胞进行连续洗涤3次，并配制为100mL液体，并在60min将其静脉回输给患者，每天1次，每次回输细胞数量为2.5×109/L，每间隔2d输注1次，连续5次为1个疗程，每次化疗前2周进行免疫治疗，共4个疗程。

1.3 观察指标(1)免疫功能：在治疗前后采集患者外周血4mL，抗凝，梯度离心后获得PBMC，分别添加相应抗体，混合均匀，孵育15min，连续洗涤2次，采用上海然哲仪器设备有限公司产的NovoCyte型流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群，包括CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK细胞；(2)近期效果：参照实体瘤评价标准[5]，于治疗4周后评价，完全缓解(CR)：影像学检查中，最大的肿瘤体积已经消失，未出现新的病灶，并维持4周时间以上；部分缓解(PR)：可测量的病灶长径之和降低30%以上，并维持4周时间以上；疾病稳定(SD)：可测量的病灶长径之和降低并不足30%，或增加幅度不足20%；进展(PD)：可测量的肿瘤体积较之前增加，或经影像学检查发现出现新的肿瘤病灶；疾病控制率=CR率+PR率；(3)观察两组患者治疗期间的不良反应。

1.4 统计学方法SPSS 26.0统计学软件。计量资料符合正态分布经(±s)表示，采取t检验；计数资料以百分比率(%)表示，采取χ2检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组近期效果比较观察组近期效果高于对照组(P＜0.05)，见表1。

表1 两组近期效果比较[n(%)]

2.2 两组免疫指标比较两组治疗前免疫指标水平比较(P＞0.05)，观察组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞水平高于治疗前，CD8+细胞低于治疗前(P＜0.05)，而对照组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞水平降低，CD8+细胞增加(P＜0.05)，且观察组变化幅度较对照组明显(P＜0.05)，见表2。

表2 两组免疫指标比较(%)

2.3 两组不良反应比较观察组恶心呕吐、肝肾功能损伤、放射性肺炎、血小板减少发生率低于对照组(P＜0.05)，其他指标比较(P＞0.05)，见表3。

表3 两组不良反应比较[n(%)]

3 讨 论

同步放化疗是治疗中晚期NSCLC患者的主要方法，能够直接杀伤肿瘤细胞，抑制肿瘤细胞复制、合成，促使肿瘤细胞凋亡[6]。但放化疗并不能完全彻底杀灭细胞，而且肿瘤患者自身免疫功能减退，在放化疗后会致自身免疫功能降低。本研究发现，对照组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞水平降低，CD8+细胞增加(P＜0.05)。说明同步放化疗时，会时NSCLC患者免疫功能下降。故而免疫疗法成为临床研究重点。

DC-CIK细胞生物疗法治疗时，DC细胞作为体内主要的抗原提呈细胞，通过对体内肿瘤抗原进行摄取、加工处理，并将肿瘤抗原信息传递至免疫细胞，进而诱导体内效应T细胞、细胞因子等免疫因子的释放，从而起到显著的抗癌作用[7]。CIK细胞属于免疫活性细胞，其内具备CD3+CD56+细胞，可抑制肿瘤细胞活性，促进细胞凋亡的作用[8]。通常临床常采用T细胞亚群检测机体细胞免疫功能，一般肿瘤患者存在CD3+、CD4+细胞减少，CD8+细胞增加情况，使其处于免疫抑制状态，进而降低体内免疫功能对肿瘤细胞的识别及杀伤能力，以此促使肿瘤细胞生长或增殖[9]。本组研究，观察组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞水平高于对照组，CD8+细胞低于对照组(P＜0.05)。说明DC-CIK细胞生物疗法结合同步放化疗可提高中晚期NSCLC患者免疫功能，其结果论证了上述理论。

在临床效果方面，观察组近期控制率82.50%高于对照组的57.50%，恶心呕吐、肝肾功能损伤、放射性肺炎、血小板减少发生率低于对照组(P＜0.05)。其结果与其他学者研究相一致，孙明华[10]研究显示联合明DC-CIK细胞生物疗法治疗后客观缓解率70.59%高于对照组的44.12%(P＜0.05)，陆婉玲等[11]研究表明联合免疫疗法后患者粒细胞减少法率明显降低。推测原因是同步放化疗杀灭肿瘤细胞，促使细胞凋亡的同时；采用免疫疗法可进一步增加抗肿瘤活性，分泌诸多细胞因子凋亡肿瘤细胞；同时免疫疗法抗肿瘤谱广，适应性广，能够清除微小肿瘤病灶或转移肿瘤细胞，故而能提高肿瘤治疗细胞；另外免疫治疗可增加效应细胞数量，激活体内免疫系统，刺激机体产生获得性免疫，以此能加强机体对抗肿瘤细胞的免疫功能，减少相关并发症的发生，提高患者治疗安全性[12]。

综上所述，DC-CIK细胞生物疗法结合同步放化疗可提高中晚期非小细胞癌患者近期效果，免疫水平明显提高，降低免疫抑制状态，并能减少治疗不良反应的发生，应用价值高，值得临床应用。