混合染色法在对患者进行骨髓细胞形态学检验中的应用观察

任莉 孙晖 郝旭

(西安市第一医院检验科,陕西 西安 710002)

贫血为临床常见症状,可通过测定血液指标诊断疾病。临床在诊断贫血时常采用血液检查,通过细胞内多项指标不仅可以确诊疾病,还可鉴别疾病种类。然而,有研究[1]指出,应用血液检验诊断贫血患者病因存在一定局限性,使用骨髓细胞诊断具有显著效果,可促进疾病的治疗,对患者具有重要意义。近年来,骨髓细胞学检验一直是专家及社会各界关注的焦点,如今尚未找到一种特别高效的仪器用于骨髓细胞学检验,所以只能人工检验[2]。做骨髓细胞学检查,可以判断患者体内骨髓细胞状况,判定是否有失血性贫血、溶血性贫血、缺铁性贫血等疾病,从而能及早地治疗患者,使患者健康尽快康复[3]。本文旨在探究混合染色法在对患者进行骨髓细胞形态学检验中的应用效果,现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2020年1月至2022年1月我院进行骨髓细胞学检查的患者80例,其中男36例,女44例;年龄20～79岁,平均(36.54±3.17)岁。本研究经伦理委员会(批准号IRB-2020-019)进行审查通过。

1.2方法 首先要收集骨髓液,确保为新鲜的骨髓液,大多数情况下采集的骨髓液来源于胸骨和肋骨等位置,最佳的为胸骨部位的骨髓液,在抽取骨髓液时,患者会感到轻微的痛感,骨髓液内见到油珠,这才说明所采集的骨髓液为合格的。之后是染色问题,在对骨髓细胞学进行检验时,分别使用瑞氏染色法、姬氏染液法和混合染色法对骨髓涂片进行染色,混合染色法主要的操作为将存放超过3个月的配好的瑞氏染色液将姬氏染色液稀释,直到将其稀释为十倍左右,然后滴在骨髓的膜上,确保整个骨髓的膜都被覆盖住,进行均匀染色,保证质量,染色时间越长,浓度越低,染色的效果越好,在进行涂片时,要注意均匀涂色,不要留下空隙,快速进行涂片。

1.3观察指标 显微镜下观察的指标主要有细胞内部的核膜及核仁、细胞浆的情况是否清晰,细胞着色情况是否良好。染色结束后5 min、10 min、20 min、30 min、1 h、1.5 h、2 h分别用显微镜观察涂片。把染色效果差、不能有效分辨细胞质、细胞轮廓比较模糊的涂片定为0分;把染色效果好、细胞结构清楚、细胞浆和细胞核区别明显的涂片定为10分,评分越高表明染色效果越好。

2 结 果

通过开展采用混合染色法染色骨髓液涂片显微镜观察,发现采用混合染色法处理骨髓液涂片后,细胞有着非常鲜艳的色彩,而且细胞内部结构染色情况表现得比较清晰,在细胞浆这一区域,主要色彩为蓝色,观察细胞内核仁和核膜,发现细胞内情况同样非常清楚。混合染色法在各个时间段的染色效果评分上显著高于瑞氏染色法、姬氏染色法(P<0.05)。见表1。

表1 染色效果数字法评分分,n=80]

3 讨 论

随着医疗水平的不断发展,骨髓检查内容日益丰富,技术手段不断增加,现代骨髓检查已经由早期的单纯形态学检查发展为涉及细胞化学、免疫学、细胞遗传学及分子生物学、超微结构分析多方面的检查,常规形态学检查逐渐走向规范化。将混合染色法用于骨髓细胞学检验,具有重要研究价值,该染色法操作比较简单,能清楚地显示检验结果,是骨髓细胞学检验的一种较为先进的方法[4]。有研究[5]表明,髓液涂片染色效果将直接影响检验人员观察其血细胞形态。而实际工作中,由于受各种因素的影响,使得髓液涂片在染色过程中存在诸多问题,从而造成检测结果不真实或出现假阴性现象。这些问题严重影响了临床诊断和治疗方案的制定。研究[6]证明,只需满足“长时间和低浓度”染色要求即可保证涂片染色效果层次感清晰,获得理想染色效果。

本文结果显示,采用混合染色法,骨髓涂片经显微镜染色,骨髓液涂片细胞色泽艳丽,染色状况较清晰,胞浆以蓝色为主,能明显看到细胞内核膜及核仁。混合染色法在各个时间段的染色效果评分上显著高于瑞氏染色法、姬氏染色法(P<0.05),这说明骨髓细胞学检验采用混合染色法有优良的效果,利于观察细胞形态,能清楚地显示细胞内结构和水平,具有染色充分的优势,误诊率较低,对骨髓细胞学检验有很好的推广价值。瑞氏染色法细胞核染色反应较好,而细胞质染色反应比较差;姬氏染色法和瑞氏染色法则相反。混合染色法对骨髓涂片有较好的染色效果,而瑞氏染色法和姬氏染液法均不能达到满意的涂片及染色效果。在实际的骨髓细胞学检验过程中,应用混合染色法可以很好地显示出细胞内部层次,降低误诊率,提高骨髓细胞学检验结果的准确性,为临床疾病的诊断提供了可靠基础。尽管这种人工操作方式比较简单,但在具体操作中,仍存在许多需要特别注意的问题。因骨髓细胞学检查过程中目前只能人工操作,所以医生及做检查的有关人员应着重从以下两方面培养:(1)培养职业责任感:显微镜下看骨髓染色、提取、制片过程,认真负责,认真细致,严格遵守规范制度,绝不敷衍了事;另外,还要注重自身素质的提升。(2)培养医生及有关检验人员业务素质能力:相关人员要有发展眼光,用发展眼光看问题,不断地丰富自己,学习当今技术与知识,与时俱进,要有独立执行各种任务,避免工作失误,尽力把误诊率降到最低,尽可能做到不发生影响患者治疗和康复。

综上所述,在采用混合染色法进行骨髓细胞学检测过程中,可以达到针对某些形态结构比较简单的细胞学,将其内部结构展现出来,显著提高细胞学检测准确度,可以更好地表达细胞结构,在临床上有重要应用价值。