消渴健脾胶囊传统工艺与现代工艺对脾虚湿盛2型糖尿病大鼠的疗效

马美玲, 杨明霞, 张丽娟, 朱晓东, 邓德强, 丁然然

(1新疆医科大学中医学院, 乌鲁木齐 830017; 2乌鲁木齐市中医医院科教科, 乌鲁木齐 830000)

2型糖尿病(Type2diabetesmellitus,T2DM)是指胰岛素抵抗或分泌缺陷导致的以高血糖、高血脂为特征的慢性代谢性疾病[1-2]。据国际糖尿病联盟统计结果显示2021年全球糖尿病患者约为5.37亿[3-4],我国作为糖尿病患者最多的国家,预计到2045年患者将超过1.74亿[5-6]。T2DM的中医临床症状主要是脾虚湿盛[7],治法首选培土化湿法[8]。消渴健脾胶囊是乌鲁木齐中医医院名老中医许公平主任根据几十年临床经验,结合新疆地区人群体质条件、气候因素及生活饮食习惯而研发的院内制剂,该方组由苍术、白术、茯苓等多味中药组成,具有健脾燥湿、行气和胃、祛浊化郁的功效,在治疗脾虚湿盛型2型糖尿病疗效显著[9-10]。本研究通过建立脾虚湿盛2型糖尿病模型,比较现代工艺与传统工艺制备的消渴健脾胶囊对脾虚湿盛型T2DM的治疗效果,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 仪器7600P拜安进血糖仪、拜安进血糖试纸(安晟信糖尿病保健股份公司);无菌注射器(国安医械科技有限公司);ZL-019A大小鼠饮食饮水监测系统(安徽耀坤生物科技有限公司);体重秤、Y-3102大鼠代谢笼(上海玉研科学仪器有限公司)。

1.2 试药消渴健脾胶囊现代工艺(白术、苍术采用挥发油β-环糊精包合工艺;茯苓、茵陈、栀子等采用水提法;厚朴、葛根等采用醇提法,各味中药由乌鲁木齐市中医医院制剂中心提供,使用时用生理盐水配制成药浓度为1 g/mL的药液)。消渴健脾胶囊传统工艺(由苍术、白术、茯苓等组成,水煎 2 h,滤渣,制成给药浓度为1 g/mL的药液,由乌鲁木齐市中医医院制剂中心制备)。链脲佐菌素(美国Sigma公司,批号010-83004443);柠檬酸钠(成都市科龙化工试剂厂,批号CA8号6132-04-3);柠檬酸(上海青浦群力化工厂,批号20200107);氯化钠注射液(新疆华世丹药业股份有限公司,批号19022701)。基础饲料购于新疆医科大学动物实验中心;高脂饲料(北京爱博港生物有限公司,按成分重量百分比其组成为:基础饲料67.7%、猪油10%、蔗糖20%、胆固醇2.0%、胆酸盐0.3%)。

1.3 实验动物SPF级雄性SD大鼠60只,6～ 8周龄,体重(200±20)g,购自新疆医科大学动物实验中心(动物许可证号SYXK(新)2018-0001)。所有大鼠自由饮食,饲养于洁净动物房内,室温(22±1)℃,相对湿度(35±5)%,保持正常昼夜节律。

1.4 脾虚湿盛T2DM模型建立将60只SD大鼠适应性饲养1周后,随机抽取10只为正常组,给予普通饲料喂养,其余50只大鼠连续给予高脂高糖饲料饲养4周后,禁食12 h腹腔注射2次链脲佐菌素(STZ)溶液35 mg/kg造模,2次注射间隔7 d,当随机血糖≥16.7 mmol/L视为T2DM大鼠造模成功。选取T2DM造模成功的大鼠进行脾虚湿盛证型造模[11-12],采用过劳+饮食不节+湿热环境法:大鼠每天在水迷宫游泳30 min,单日喂食高脂饲料、双日喂食大白菜(大白菜喂食量不限,自由进水),3周后将大鼠放入人工气候舱1周[温度(32±0.5)℃、湿度(65±0.5)%)],大鼠出现倦怠懒动、扎堆取暖、毛色晦暗、粪便稀溏或带黏液表明造模成功。

1.5 分组与给药采用随机数表法将造模成功的脾虚湿盛T2DM大鼠分为模型组、消渴健脾胶囊现代工艺中、高剂量组,消渴健脾胶囊传统工艺中、高剂量组,每组10只。正常组、模型组每天给予等量生理盐水5 mL/kg体重,现代工艺中、高剂量组分别给予消渴健脾胶囊溶液100、200 mg/kg体重,传统工艺中、高剂量组分别给予消渴健脾水煎液100、200 mg/kg体重,各组大鼠每天灌胃1次,连续4周,日常给予基础饲料喂养。

1.6 指标的测定

1.6.1 大鼠一般状态测定 观察各组大鼠在进食时精神状态,活动情况,皮毛光泽度。

1.6.2 大鼠体重的测定 采用大鼠体重秤测定各组大鼠造模前、造模后、给药后的体重。

1.6.3 大鼠饮食量、饮水量和尿量的测定 饮食量测定:每次测定前清空各组饲料,重新称取100 g,于第二日同一时间称取剩余饲料,计算饮食量差。饮水量测定:每次测定前清空各组饮水杯,重新量取100 mL,于第二日同一时间量取剩余水量,计算饮水量差。尿量测定:在各组大鼠代谢笼放置尿液收集器,记录开始监测时间,于第二日同一时间量取尿量。

1.6.4 大鼠空腹血糖(FBG)的测定 各组大鼠连续给药4周后,禁食不禁水12 h,尾尖采血,采用血糖仪测定FBG水平。

2 结果

2.1 各组T2DM大鼠给药前后一般状态的比较给药后正常组大鼠精神良好,饮食饮水及二便均正常,活泼好动,毛发雪白顺滑有光泽;模型组大鼠多饮、多食、多尿现象明显,大便不成型,精神萎靡不振、活动减少,体毛粗糙泛黄无光泽,并有掉毛现象。与给药前比较,给药后现代工艺与现代工艺中、高剂量组大鼠多饮、多食、多尿现象及精神状态得到明显改善,传统工艺组三多现象及毛发、精神状态改善最好。

2.2 各组大鼠给药前后体重的比较与正常组比较,各组大鼠造模结束后体重均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,给药后传统工艺组与现代工艺组大鼠体重均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。给药后传统工艺组与现代工艺组比较大鼠体重差异无统计学意义(P>0.05),见表1。

表1 各组大鼠给药前后体重的比较/g

2.3 各组大鼠给药前后饮食量指标的比较与正常组比较,模型组大鼠饮食量增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,传统工艺中、高剂量组和现代工艺中、高剂量组大鼠给药2周后饮食量降低,差异有统计学意义(P<0.05);与现代工艺中、高剂量组比较,传统工艺中、高剂量组大鼠给药2周后饮食量降低,差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 各组大鼠给药前后饮食量指标的比较/g

2.4 各组大鼠给药前后饮水量的比较与正常组比较,模型组大鼠饮水量增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,现代工艺中、高剂量组与传统工艺中、高剂量组大鼠给药2周后饮水量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与现代工艺中、高剂量组比较,传统工艺中、高剂量组大鼠给药2周后饮水量下降,差异有统计学意义(P<0.05),见表3。

表3 各组大鼠给药前后饮水量的比较/mL

2.5 各组大鼠给药前后尿量的比较与正常组比较,模型组大鼠尿量增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,现代工艺中、高剂量组与传统工艺中、高剂量组大鼠给药2周后尿量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与现代工艺中、高剂量组比较,传统工艺中、高剂量组大鼠给药2周后尿量下降,差异有统计学意义(P<0.05),见表4。

表4 各组大鼠给药前后尿量的比较/mL

2.6 各组大鼠给药前后FBG的比较与正常组比较,模型组FBG水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,现代工艺中、高剂量组与传统工艺中、高剂量组FBG水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),见表5。

表5 各组大鼠给药前后FBG比较/(mmol/L)

3 讨论

本研究结果显示,与给药前相比,消渴健脾胶囊现代工艺组和传统工艺组大鼠在灌胃给药后FBG均产生显著性差异。现代工艺中葛根、大黄、栀子等通过醇提法和水提法,药液中葛根素、大黄酚、栀子苷等有效成分含量高,说明现代工艺制备的消渴健脾胶囊在调节脾虚湿盛2型糖尿病FBG方面,与传统工艺制备的消渴健脾胶囊无差异。但三多症状、大鼠毛发、二便、精神状态的对比显示,传统工艺组比现代工艺组改善更加明显。

消渴健脾胶囊中苍术和白术为君药,以其苦温性燥,最善除湿运脾;以茯苓、厚朴为臣药,健脾行气化湿,消胀除满;佐以茵陈、栀子等,理气机、调腑气;使以葛根、车前子等,利经络之湿[13]。传统工艺制备的消渴健脾胶囊各药共煎,君臣佐使配合产生更好的药性,发挥最好的疗效,而现代工艺经过挥发油包合使苍术白术君臣之间的配伍减少,水提、醇提法将葛根、车前子之间的配伍分开,虽然药物有效成分均在含量也高,却无法达到相辅相成的作用,对大鼠一般状态的改善效果也不理想。

综上所述,现代工艺与传统工艺制备的消渴健脾胶囊均可降低血糖、增加体重,但传统工艺在改善大鼠精神状态、毛发、饮食量、饮水量、尿量方面表现更优。