农药在果蔬中的基质效应研究

2023-06-13吴爱金

现代食品 2023年7期

◎ 吴爱金

（桂平市公共检验检测中心，广西桂平 537200）

由于按照《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》（NY/T 761—2008）标准检测有机磷农残时，存在水果、蔬菜基质给农残分析结果带来干扰的问题，对分析结果精准性带来影响，这种因果蔬样品基体物质带来的影响和干扰，就是基质效应。而在生物检测中，常见的色谱、质谱或者色谱-质谱联用检测时，基质效应较为常见。按照基质给检测信号带来的响应值不同的特点，基质效应可分为增强和减弱两种效应。因此，在本研究中，将通过基质影响实验，优化NY/T 761—2008的抽样检测方法。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

花菜、萝卜、土豆、蒜苗和苹果，从梧州市选取市场销售的阴性果蔬样品，即果蔬中没有检出有机磷农药；丙酮、乙腈、氯化钠和农药标准溶液（9种，分别是甲胺磷、甲基对硫磷、敌敌畏、乐果、氧乐果、马拉硫磷、三唑磷、毒死蜱和倍硫磷）。气相色谱仪、氮吹仪、台式高速冷冻离心机、振荡器、电子天平、可调移液器、匀浆机、瓶口分液器、超纯水机、超声仪、烘箱以及冰箱[1]。

1.2 实验方法

1.2.1 试样处理

根据NY/T 761—2008 标准的抽样方法，抽取水果和蔬菜样品，将其缩分切碎后，置于匀浆机打碎，成为待测试样，并封装在聚乙烯自封袋中，在-20 ℃环境下保存备用。

1.2.2 配制标准溶液

本研究的标准溶液均为100 μg·mL-1；标准储备液为10 μg·mL-1。精准移取标准溶液1.00 mL（浓度为100 μg·mL-1）到10 mL 容量瓶中，再添加丙酮稀释到刻度后，摇匀备用。在配制其他系列标准溶液浓度时，在1.00 μg·mL-1的标准浓度下，取标准溶液200 μL（浓度为10 μg·mL-1），溶剂为基质液1 800 μL；在0.50 μg·mL-1的标准浓度下，从上一级标准溶液取1 000 μL（浓度为1.0 μg·mL-1），溶剂为基质液1 000 μL；在0.20 μg·mL-1的标准浓度下，从上一级标准溶液取800 μL（浓度为0.5 μg·mL-1），溶剂为基质液1 200 μL；在0.05 μg·mL-1的标准浓度下，从上一级标准溶液取500 μL（浓度为0.20 μg·mL-1），溶剂为基质液1 500 μL；在0.02 μg·mL-1的标准浓度下，从上一级标准溶液取400 μL（浓度为0.05 μg·mL-1），溶剂为基质液600 μL。其中，基质液是从多种不同的阴性水果中提取的基体，再将其分别溶解到含有丙酮的溶液中获取[2]。

1.2.3 有机磷农药前处理

称取5.0 g 处理后的样品，置于50 mL 离心管，再添加10 mL 乙腈，摇匀后，置于振荡器振荡5 min，待混合充分后，置于离心机离心处理4 min（离心机转速4 000 r·min-1）。再取上清液10 mL，将其置于含有氯化钠（1.0 g·L-1）的离心管（50 mL），置于振荡器振荡5 min，再置于离心机离心处理4 min（离心机转速4 000 r·min-1）。取上清液2 mL，将其置于2 mL离心管中，利用氮吹仪在75 ℃下蒸发近干后，添加1 mL 丙酮于2 mL 离心管中，将其充分均匀振动后，用0.22 μm的滤膜，将其过滤到2 mL进样瓶中，备测[3]。

1.2.4 气相色谱条件

本试验色谱柱为Agilent DB-1（30 m×250 μm，0.25 μm）。柱温最初为150 ℃，保持2 min 后，按照8 ℃·min-1的速度升高到250 ℃，再保持5 min。色谱柱的流量为2 mL·min-1。进样口和检测器的温度分别为220 ℃与250 ℃。采用火焰光度检测器与磷滤光片。氢气、空气、氮气的流速分别为75 mL·min-1、100 mL·min-1、100 mL·min-1，采取不分流进样的方式进样[4]。

1.2.5 计算定量结果

在试样中，被测的农残按照质量分数计算，单位为mg·kg-1，计算公式为

式中：ρ为标准溶液农药质量浓度，μg·mL-1；A为标准溶液被测农药峰面积；AS为农药标准溶液被测农药峰面积；V1为溶剂提取总体积，mL；V2为用于检测吸取的溶剂提取体积，mL；V3为样品溶液的定容体积，mL；m为试样质量，g。

1.2.6 基质影响实验

将5 类阴性果蔬样品均匀制样后，添加浓度一致（0.20 mg·kg-1）的9 种不同有机磷农药，按照上述试验方法进行加标回收试验。

1.2.7 基质干扰消除实验

本研究结合以上每种有机磷农药在每种果蔬中的基质效应，选择基质匹配标准溶液标准法开展基质干扰消除实验。选择萝卜和苹果作为样品，将二者按照1.2.3 所示方法提取阴性空白基质，分别选取丙酮（以下简称BTO）、含有苹果基质的丙酮（以下简称BT1）、含有萝卜基质的丙酮（以下简称BT2）作为溶剂标准曲线，标准溶液的浓度从大到小分别为1.00 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1、0.20 mg·kg-1、0.05 mg·kg-1和0.02 mg·kg-1，将得到的标准曲线斜率作为纵向坐标，将不同农药作为横向坐标，制图后分析苹果、萝卜基质对上述9 种有机磷农药带来的基质效应[5]。

2 结果与分析

2.1 基质影响实验结果

将5 类阴性果蔬样品均匀制样后，添加浓度一致（0.20 mg·kg-1）的9 种不同有机磷农药，按照上述试验方法和表1 所示的标准添加回收率进行试验。

表1 果蔬有机磷农药加标回收率表（单位：%）

由表1 可知，每一种有机磷农药在不同果蔬样品的基质效应表现的强度均不同，且每一种果蔬样品中的每一种有机磷农药的基质效应影响也不同，按照有机磷农药加标回收率范围，得到每种农药对每种果蔬的基质效应影响水平，具体结果如下。①蒜苗中由于含有硫化物，因此整体回收率较高。②敌敌畏的加标回收率偏低，这与其沸点只有74 ℃有关，前处理时的氮吹温度为75 ℃，因此会导致损失。③回收率较低的农药分别为甲基对硫磷、马拉硫磷、毒死蜱和倍硫磷，即基体效应影响较低。④强基质效应的农药分别为乐果、氧乐果、三唑磷，即对测定结果有较大影响。⑤甲胺磷的基质效应无明显规律。