茶叶中美术绿（铅铬绿）的定性方法适用性研究

◎ 詹 密

（南京市食品药品监督检验院，江苏 南京 211112）

中华民族的茶文化源远流长，一直以来人们通过煮茶、品茶以求平定心神，修身养性，是茶文化中不可或缺的部分。但同时茶叶安全问题频繁暴露，着色污染、农药残留、重金属超标等问题层出不穷，其中着色污染问题主要体现在美术绿这种化工染料上。

早在2008 年，国家就发布食品整治办〔2008〕3 号文，将美术绿这一染料列入食品中可能违法添加的食品添加剂名单[1]。2019 年5 月，补充检验方法《茶叶中美术绿（铅铬绿）的测定》（BJS 201910）得到批准并发布，给旧茶换新茶的操作增加了一道强有力的监控手段。因该染料成本低，上色明显，改善茶叶品质的效果显著，被不法商贩用来给茶叶着色，以次充好获取更大的利益[2]。当消费者长期饮用被美术绿着色过的茶叶，可能会导致铅和铬等重金属对人体中枢神经、部分脏器带来损伤，从而危害身体健康[3]。日常监测市场流通的茶叶会采取测定铅含量的方式，得出一个基础的判定[4]。

美术绿又称铅铬绿，铬酸铅和铁蓝是其主要成分，且铬酸铅所占比例高于50%，对于美术绿的检测，先需要测定铅和铬酸根的含量，再由铁蓝定性含有铁蓝，从而通过铬酸铅的含量计算来最终确定美术绿的含量。补充检验方法对铅、铬酸根以及铁蓝的定性测定的方法均进行了明确的表述，此外还有基于共聚焦拉曼光谱技术手段等[5]。在原有研究基础上，对其中的第二篇铁蓝的定性验证方法做方法学研究，铁蓝的主要成分亚铁氰根在酸性条件下蒸馏分解出氰化物，与氯胺T 反应，生成氯化氰，与显色剂生成蓝色染料，在分光光度计620 nm 处有最大吸收峰，将参比溶液的浓度作为起始浓度，绘制适当的标准曲线，并通过3水平浓度的添加实验，分别测定目标物浓度，进一步实验讨论，获得更有力的数据支撑[6]。

1 材料与方法

1.1 材料及试剂

铁 蓝（ 购 自Panphy 化 学 品 公 司），CAS 号14038-43-8；氢氧化钠（NaOH）、无水磷酸氢二钠（Na2HPO4）、无水磷酸二氢钾（KH2PO4）、氯胺T（C7H7ClNNaO2S·3H2O）、酒石酸（C4H6O6）、酚酞（C20H14O4）、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（C10H10N2O）、冰乙酸（CH3COOH）、无水乙醇（CH3CH2OH）、吡啶（C5H5N）和甲基橙（C14H14N3SO3Na），均为分析纯试剂。

1.2 设备

分析天平，型号YP1002N，量程0.01 g；分析天平，型号BP211D，量程0.1 mg；紫外分光光度计，型号Lambda 35。

1.3 实验步骤

（1）待测溶液制备。参照补充标准及相关研究说明，准备市场上售卖的绿茶一份，由于粉碎后回收率达不到相关要求，仅将该绿茶样品在取样前进行混合操作[7]。准确称取约10 g 样品，加入氢氧化钠溶液，振荡后离心过滤，移取一定体积的滤液进行蒸馏，蒸馏前加入甲基橙指示剂和固体酒石酸，用事先装好碱液的容量瓶收集馏出液，接近刻度线时取下，加水定容并摇匀，该溶液作为待测溶液，加标实验结果均采用扣除该待测溶液本底值后测得的含量。

（2）标准曲线。准确称取0.015 0 g 铁蓝标准物质于烧杯中，准确加入100 mL NaOH 溶液，于室温下振荡30 min 后，取10.0 mL 定容至100 mL，分别取稀释液0 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL、8.0 mL、10.0 mL和15.0 mL 于蒸馏烧瓶中，按照上述待测溶液过程制备出标准待测溶液，此系列标准溶液中铁蓝的浓度分别为0 mg·L-1、0.15 mg·L-1、0.30 mg·L-1、0.60 mg·L-1、1.20 mg·L-1、1.50 mg·L-1和2.25 mg·L-1。

（3）测定。准确移取铁蓝标准待测溶液、试样待测溶液、空白待测溶液及水进行显色操作后，上紫外分光光度计于620 nm 处测定吸光度值后绘制标准曲线，得出待测溶液中铁蓝的浓度。其中关键性步骤为显色之前，需将溶液调节至酸性，等待充分的反应时间后再进行下一步操作。试样中铁蓝含量的计算公式为

式中：X为试样中铁蓝的含量，mg·kg-1；c为仪器检出目标物含量，mg·L-1；100 为试样定容的体积，mL；m为试样质量，g。

（4）方法回收率。通过在空白样品中分别添加3个不同水平的待测目标物，平行6 次，计算回收率和相对标准偏差，回收率的计算公式为

式中：R为试样铁蓝的回收率，%；C为试样中铁蓝的浓度，mg·L-1；100 为试样定容的体积，mL；M为试样中铁蓝的加标量，µg。

2 结果与分析

2.1 校正曲线

将定量限浓度设置为初始浓度（除0 以外），以此2 倍、4 倍、8 倍、10 倍和15 倍递增设计标准系列 浓 度 分 别 为0 mg·L-1、0.15 mg·L-1、0.30 mg·L-1、0.60 mg·L-1、1.20 mg·L-1、1.50 mg·L-1和2.25 mg·L-1。按照上述操作，得出标准曲线方程，在设定的浓度范围内，校正曲线的相关系数均大于0.99，线性关系良好。

2.2 方法回收率及精密度

在空白样品中分别添加3 个不同水平的待测目标物，加标量及计算结果见表1 和表2。称取上述茶叶样品10 g，准确添加一定量的目标物参照上述实验步骤进行操作，测得样液中铁蓝的浓度。添加浓度水平分别为方法定量限、二倍方法定量限、十倍方法方法定量限，详见表1。

表1 加标实验加标量表

表2 茶叶中铁蓝的添加回收率和精密度数据表

3 结论

通过实验验证，本方法在0 ～2.25 mg·L-1线性良好，相关系数R＞0.99；在3 种不同添加浓度的水平上，铁蓝的回收率在86.10%～101.54%，标准偏差≤1.08%。结果表明，该方法用于茶叶中铁蓝的定性验证，结果准确可靠。越来越多的一线研究人员潜心钻研，用越来越精准的方法，监测百姓周围的不安全因素，科学呈现绿色和安全消费环境。