UPLC-MS/MS 法测定食品中5 种非法添加化学降血压药物

◎ 方 凌，朱月辉，常婷婷

（铜陵市食品药品检验中心，安徽 铜陵 244000）

随着生活水平的提高，人们对个人健康越来越关注。为摆脱对化学药品的依赖性及长时间服药可能引起的诸多不良反应，高血压患者往往优先考虑购买、食用辅助降血压类食品。然而，受利益驱动，一些不法商家为达到快速降压的“奇效”[1]，在产品中非法添加降压类药物成分，用法用量不加控制，患者若长时间服用此类产品或导致重复用药，会严重危害人们的生命安全和身体健康。

铜陵市食品药品检验中心在近5 年的食品非法添加药物监检工作中发现，某些不法分子除了非法添加市场上常见的化学药品外，还在食品中加入国外常用但未在国内上市的化学药品，具有隐蔽性，且缺乏相对应的检测方法，难以发现并追究其违法行为。本文运用液质联用技术[2]，采用多反应监测扫描方式[3]，建立同时检测食品中5 种降压类药物成分的方法。其中，托拉塞米、坎地沙坦酯、拉西地平在我国已批准上市，作为药品管理多年；阿齐沙坦是一种血管紧张素II 受体拮抗剂，多用于治疗高血压症，且具有平稳持久降压作用[4-6]，于2021 年在国内获批上市；美托拉宗临床使用已达30 年，一直被美国药典所收载，未在我国上市，国内对其检验研究较少。该方法简单快速，结果准确可靠，以期为发现并打击非法添加行为，完善食品行业监管体系提供技术支持[7]。

1 材料与方法

1.1 对照品与试剂

托拉塞米（批号：100605- 201402；纯度：100%；来源：中检院）；拉西地平（批号：100741- 201903；纯度：100%；来源：中检院）；美托拉宗（批号：1214-RB-0042；纯度：99.1%；来源：CATO）；阿齐沙坦（批号：H20D11S134845，纯度：98%；来源：源叶生物）；坎地沙坦酯（批号：Y16A9C58724，纯度：99%；来源：源叶生物）；甲酸：色谱级；乙腈：质谱级；乙酸铵：色谱级；水：超纯水。

1.2 仪器

XEVO TQ/S 超高效液相色谱串联四级杆质谱仪（美国Waters 公司）；BSA224S-CW 电子天平（德国Sartorius 公司）；KQ-250DV 超声洗器（昆山市超声仪器有限公司）；3-30KS 离心机（德国Sigma 公司）。

1.3 实验方法

1.3.1 色谱条件

色 谱 柱：C18（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）； 流动相：A 为含0.1%甲酸的20 mmol·L-1乙酸铵溶液，B 为0.1%甲酸的乙腈溶液，梯度洗脱程序见表1；流速：0.2 mL·min-1；柱温：35 ℃；进样量：5 μL。

表1 梯度洗脱程序表

1.3.2 质谱条件

离子源：ESI 电喷雾离子源；检测方式：ESI+模式下MRM 多反应监测；毛细管电压：3.0 kV；离子源温度：160 ℃；脱溶剂气温度：450 ℃；脱溶剂气流量：550 L·Hr-1；5 种目标化合物优化后质谱参数见表2。

表2 5 种成分质谱参数表

1.3.3 溶液制备

（1）对照品溶液制备。避光条件下分别精密称取5 种药物成分标准品各10 mg 于10 mL 棕色容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成1 mg·mL-1单一成分标准储备液于-20 ℃避光贮存，有效期3 个月。根据实际工作需要，用乙腈水溶液（1 ∶1）配制系列浓度的混合标准溶液。

（2）样品溶液制备。避光条件下取试样适量混匀，研细，精密称取1 g（精确至0.001 g）置于50 mL棕色容量瓶中，加乙腈适量，超声提取30 min，放冷至室温，用乙腈定容，转移至50 mL 离心管中，4 000 r·min-1离心5 min，上清液经微孔滤膜过滤（0.22 µm，有机相），取续滤液，根据实际浓度用乙腈水溶液（1 ∶1）适当稀释至线性范围内，备用，样品经处理后在48 h 内尽快测定。

2 结果与分析

2.1 线性范围、检出限、定量限

取1.3.3（1）项下单一成分对照品溶液配制混合标准溶液，在0.5 ～10.0 ng·mL-1线性范围内，以质量浓度（ng·mL-1）为横坐标x，以目标成分的峰面积为纵坐标y，进行线性回归，得到不同基质下各组分的回归方程；取1.3.3（1）项下单一成分对照品溶液逐步稀释，进行测定，在组分有明显响应的前提下，根据3 倍信噪比（S/N=3）和10 倍信噪比（S/N=10）分别计算检出限和定量限。由表3 可知，各种目标成分在线性范围内的相关系数（r）均大于0.99，其中拉西地平、托拉塞米、阿奇沙坦线性范围为1.0 ～10.0 ng·mL-1、检 出 限 均 为25 μg·kg-1、定 量 限 均 为50 μg·kg-1；美托拉宗、坎地沙坦酯线性范围为0.5 ～5.0 ng·mL-1、检出限均为12.5 μg·kg-1、定量限均为25 μg·kg-1。

表3 5 种成分线性方程、检出限以及定量限结果表

2.2 回收率以及精密度实验

取空白样品加标，美托拉宗、坎地沙坦酯的添加水平为25 μg、50 μg、250 μg，拉西地平、托拉塞米、阿齐沙坦的添加水平为50 μg、100 μg、500 μg；每个添加水平共6 组，按照样品处理后进行测定，记录峰面积，计算回收率及相对标准偏差，考察方法的回收率及精密度。由表4 可知，5 种成分的平均加标回收率为92.66%～111.17%，相对标准偏差为0.99%～5.00%，适用于测定要求。

表4 5 种成分回收率以及精密度结果表

2.3 样品测定结果

用该方法对近期收集的市场及网络平台销售的50 批降压类食品进行测定，结果有6 批样品检出上述5 种非法添加，为其中1 ～4 种混合添加。

3 结论

本方法简便快捷，灵敏度高，检出限、定量限、线性、精密度和回收率均符合日常检测工作要求，可为稽查执法部门发现、打击此类非法添加行为起到技术支撑作用。